• Forum - Anticorps, Souris, Chèvre

[Biologie Moléculaire] Western blot et interférences?

Peut etre que, tout en augmentant la résolution, tu pourrais tester en parrallèle un anticorps anti bsa pour etre sur que la bande que tu observes comigre bien avec ce que tu penses etre de la bsa. Je vais peut etre dire des bétises mais si tu utilises des sérums bovins (à moins que ce soit autre chose) tu auras donc des anticorps bovins anti bsa mais si ton anticorps primaire anti PDH n'est pas d'origine bovine (en général, c'est souris, lapin ou chévre), tu réveleras avec un anticorps secondaire (souris, lapin ou chévre) qui ne reconnaitra pas les anticorps anti bsa d'origine bovine. A moins que tu révele ta protéine différemment.  [...] J'ai utilisé un gel de polyacrylamide à 7.5%, et pour épuiser les éventuels anticorps anti-BSA de mes sérums, j'ai ajouté de la BSA dans mon tampon d'incubation des immunoblots... Effectivement, la tache que j'observe à la fin est beaucoup moins grosse et mes négatifs sont parfaitement négatifs.  [...]

[Immunologie] Marquage immunofluorescence

il ne faut pas oublier de réaliser un contrôle négatif avec des anticorps isotypes control IgG1 et IgG2a de souris en première couche.  [...] Rq. on est souvent conduit à faire ceci car beaucoup d'anticorps primaires sont faits chez la souris. sinon effectivement utiliser des sources provenant d'espèces différentes est encore mieux.  [...]

Obtention d'anticorps

Les anticorps polyclonaux sont obtenus en injectant à un animal (singe, chèvre, rat, souris, ou lapin, peut-être qu'il y en a d'autres) un antigène.  [...] Un petit choc osmotique plus tard, tout le matériel périplasmique est en solution et peut être purifié =. on peut tester les anticorps solubles, puis déterminer l'anticorps monoclonal le plus intéressant.  [...]

[Immunologie] Test Elisa

Pour ce faire on a coaté la plaque avec des anticorps polyclonaux de chèvre, on a lavé puis on a mis notre solution d'Ac de souris de concentration x, on a de nouveau lavé puis enfin on a mis des Ac anti-Ig de souris couplés à la peroxydase.  [...] Oui pour l'autre question tu as raison, l'anticorps de détection utilise son site de reconnaissance de l'antigène, qui est quoiqu'il arrive dans la partie variable, pour reconnaitre le déterminant antigénique correspondant qui lui va être situé dans la partie constante de l'autre anticorps.  [...]

même marquage immunofluorescence dans le vert et le rouge

Mes 2 anticorps secondaires (avec 2 fluorochromes différents) reconnaissent un seul anticorps primaire (qui est celui produit chez la souris), ce qui suggère que les 2 anticorps sont anti-IgG de souris mais ce n'est pas ce qui est noté sur mes tubes (aliquots).  [...] En fait, je pense savoir à quoi c'est du, j'ai re-vérifié les anticorps secondaires et il s'avère qu'il y a deux anticorps anti-souris dans la boite. un produit chez la chèvre et l'autre chez le lapin. le hic c'est que sur les aliquots, la provenance n'est pas indiqués.  [...]

[Biochimie] Comment éliminer un marquage immunocytochimique?

J'ai des cellules fixé et marquée avec des anticorps primaire souris/chèvre et secondaire fluo (488 et 555) pour deux marqueurs membranaires. Je dois les traiter de manière à dénaturer leur ADN (j'ai un protocole impliquant triton et HCl à 1N) pour en marquer des modifications.  [...] Evidement mon anticorps ciblant les modifications est murin, donc je dois trouver une technique pour enlever les anticorps fixés à la membrane.  [...]

Immunomarquage de la rétine du macaque

On rince de nouveau, puis on (peut, c'est pas toujours réalisé, cela dépend des expériences) saturer les sites de réaction de l'anticorps de chèvre avec un sérum de chèvre.  [...] On rince de nouveau, puis anticorps secondaire anti-IgG de chèvre (provenant du lapin cette fois). Vu que celui ci marque la fin des réactions, pas besoin de saturer après avec un sérum de lapin.  [...]

Anticorps anti-Ig humaine de chèvre

Je fais une recherche sur le test de dépistage sur le sida et le test ELISA utilise un anticorps qui s'apelle anti-Ig humaine de chèvre. J'aimerais savoir pourquoi ça vient d'une chèvre et pourquoi mettent-ils humaine Qu'est-ce que c'est en général.  [...] Tout simplement car les chèvres réagissent bien pour la production d'anticorps, comme les chevaux et les lapins, mais que c'est moins cher à entrenir que les cheveau et qu'au final tu a beaucoup plus de sérum avec une chèvre qu'avec un lapin, et donc plus d'anticorps.  [...]

[Biochimie] Test de grossesse

Mais la source sur le fait que la fenêtre de controle détecte la sous unité alpha HCG sont du niveau 3ème (pour le chapitre des anticorps) donc peut être que tout est schématisé et qu'en faite d'autres facteurs entre en jeu, que le site n'a pas évoqué car le but n'était pas d'expliquer en détaille comment fonctionne un test de grossesse.  [...] Il existe d'autres controles. Souvent il s'agit d'anticorps anti espèce (genre chevre anti lapin) pour valider ton test. (l'ac antihcg est issu du lapin et on utilise un ac de chevre anti-lapin). Il apparait une sorte de petit v dans une fenetre dédiée.  [...]

[Immunologie] Protocole ELISA

Je suis chargée d'imaginer un protocole visant à déterminer la réaction immunitaire d'un poisson ( D. labrax ) face à une infection de parasites branchiaux ( D. aequans ). J'ai pensé réaliser en premier un test ELISA pour savoir si le poisson exprime des anticorps anti-parasite dans son sang.  [...] De la même façon, l'anticorps secondaire est une immunoglobine anti-lapin obtenue en injectant des antigènes de lapin dans une chèvre (anticorps disponibles dans le commerce). Cet anticorps secondaire est couplé à une enzyme peroxydas e obtenue chez le radis ou le raifort. test elisa.png.  [...]