• Forum - Amorces, ADN, Enzyme

[Biologie Moléculaire] Pcr

Le principe de la PCR c'est la copie d'un gène par une enzyme. une ADN polymérase, la Taq polymérase. Elle s'accroche à des amorces (en anglais. primers) qui définissent les deux bouts du gène. Ces amorces sont de petites séquences de 20 nucléotides en générale qui s'accrochent par complémentarité à l'ADN.  [...] L'enzyme va copier l'ADN entre ces deux amorces. Elle a besoin de bases/nucléotides. dATP, dTTP, dGTP, dCTP. Elle ajoute donc bout à bout chaque base depuis l'amorce de départ jusqu'à l'amorce de fin. D'où l'utilisation de la Taq polymérase, des amorces et des dNTP.  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

Et pareil pour les enzymes de restriction, du fait quelles sectionnent l'ADN en des lieux spécifiques ont sait lesquels seront coupés.  [...] En bref, un PCR, c'est un grand morceau d'ADN, des amorces, petites (20 nucléo), qui correspondent généralement à une séquence précise du grand morceau d'ADN et tout ce qu'il faut pour faire de l'ADN (nucléotide, enzyme, cycle...). On amplifie alors l'ADN compris entre les deux amorces, généralement des dizaines de milliers à des millions de fois (cela va très vite.  [...]

amplification de l'ADN

moi, je veux savoir si, au moment de l'ajout de l'amorce, c'est possible de lier au bout de la sequence une suite de nucleotides qui auraient la meme fonction qu'une amorce...cela reviendrait a coller une suite de nucleotides a un brin d'ADN deja coupe. Etant donne que, in vivo, il existe des enzymes qui ont les proprietes de couper et coller des genes ou suites de nucleotides, je me demande si je peux les utiliser pour enchainer des bouts d'ADN.  [...] Et oui, il est également possible de faire des couper/coller de bouts d'ADN avec des enzymes de restriction. C'est comme ça qu'on fait des vecteurs pour transfecter des gènes dans des cellules. Mais c'est pas non plus de la PCR et on se sert pas d'amorces.  [...]

Un particulier peut il se procurer du materiel de laboratoire ?

Pour les produits. Des amorces, des ADN polymérases, du NaCl2, des enzymes de restriction ecoR1, des ligases ect.  [...] Tu seras de toute façon limité si tu fait du Franco-Français dans tes achats. Toutes personnes travaillant en labo et faisant des expériences en dehors de son entreprise sait que l'on peut mettre la main sur de l'excellent matériel qui est de l'import certifié Américain, tu peux te renseigner il y'a pas mal de courtier bilingue opérant en Allemagne et spécialisé sur se créneau.   [...]

[Biologie Moléculaire] Aflp

-restriction de l'ADN génomique par une ER à fréquence de coupure élevée et une ER à fréquence de coupure faible.  [...] Je dirais. avec des amorces correspondant aux sites de restriction des enzymes utilisées pour découper l'ADN de départ.  [...]

[Biologie Cellulaire] Quelle est la définition de la vie ? - Page 2

Alors si un virus est vivant, quand est-il de mes fragments d'ADN que je mélange avec l'ADN polymérase et des amorces pour faire ma PCR.  [...] Enfin, je précise que les virus, ce sont des acides nucléiques (ADN ou ARN) et une capside (avec parfois un tégument et une enveloppe).  [...]

[Biologie Moléculaire] ADN Polymérase alpha delta epsilon

L'ADN pol alpha peut synthétiser les amorces ARN (primer) et les allonger sur le brin à synthèse discontinue de l'ADN naissant. Pour le brin à synthèse continue le complexe ADN polymérase delta/PCNA synthétise le brin d'ADN.  [...] Les amorces ARN sont supprimées par la RNAse H, les trous seront remplis par béta ou alpha. L'ADN ligase va lier les fragments.  [...]

[Biologie Moléculaire] demande d'aide sur la PCR HRM

d'après la littérature j'ai choisi un couple d'amorces spécifique à mon ADN, j'ai testé ce couple d'amorces sur des ADNs pure du parasite (que j'utilise en tant que ADNs de contrôles positif) avec PCR conventionnelle puis avec PCR HRM j'ai eu de très belles courbes.  [...] c'est exactement mon problème, quand je teste mes amorces sur l'ADN pure des souches de Leishmania ça marche très bien mais dés que je fais une autre HRM avec ces mm amorces Avec les ADNs extraits à partir de l'animal réservoir, j'obtiens toujours des Cp qui sont très élevées, et du coup le logiciel les prends comme des négatifs.  [...]

[Biochimie] Réplication des télomères

les rectangles rouge sont les amorces, les flèches représentent le sens de traduction, Or a droite en violet, il n'y a pas d'amorce sur la droite de ce bout d'ADN donc ne sera pas répliqué, il faut donc mieux que cette partie soit une région non codante.  [...] Non, pas forcement, les amorces ARN sont remplacés a la fin de la replication en ADN gace à une polymérase qui a une activitée exonucléasique, elle va donc retirer nucléotide par nucléotide les amorces ARN et le remplacer par de l'ADN.  [...]

[Biochimie] Réplication de l'ADN

Le prof nous a dit qu'il existait un brin retardé lors de la réplication de l'ADN, avec une amorce ARN. Il est synthétisé dans le sens 5'-3' et il est complémentaire du brin 5'-3'.  [...] Sur le brin retardé, la primase va poser les amorces ARN (1 à 3 nucléotides) et l'ADN pol III va synthétiser l'ADN sur les amorces formant ainsi les framents d'Okazaki. L'ADN pol I vient enfin combler les lacunes entre les fragments d'Okazaki.  [...]