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[Biologie Moléculaire] vecteur de clonage et le vecteur d'expression

Un vecteur d'expression est un vecteur dans lequel on va cloner le même fragment d'ADN après vérification du clonage dans le vecteur de clonage (taille de l'insert, séquence...) et grâce à son promoteur (constitutif ou inductible) ce vecteur va diriger la bactérie hôte d'expression pour produire la protéine d'intérêt.  [...] I) Définition des vecteurs. Petites molécules d'ADN possédant leur propre système de réplication. Ils servent de véhicule pour le clonage génique.  [...]

[Biologie Moléculaire] Vecteurs navette

Vecteur de clonage. est un plasmide ayant une réplication autonome dans la cellule hôte et un site multiple de clonage afin de cloner un fragment d'ADN d'intérêt.  [...] Il me semble, d'après mes souvenirs, qu'il s'agisse de vecteurs possédant plusieurs origines de réplications leur permettant de se répliquer à la fois dans les bactéries et dans les cellules eucaryotes.  [...]

[Biotechnologie] vecteur de clonage et vecteur d'expression

CA peut être plus ou moins similaire, a part que le vecteur de clonage est fait pour être réplicable en bactéries (comme une sorte de vecteur navette ou on insère ce que l'on veut pour l'amplifier, c'est a dire qu'il contient des origines de réplication, des sites de clonages, etc), tandis que le vecteur d'expression est lui équipé des éléments nécessaires a l'expression de ta séquence, que ce soit expression procaryote ou eucaryote.  [...] Un vecteur de clonage permet, comme son nom l'indique, de faire un clonage, c'est à dire de placer un insert dans le vecteur d'intérêt (ligation) puis après transfection/conjugaison/infection/... de multiplier la quantité d'ADN au cours des divisions bactériennes/des infections virales/... selon le type de vecteur utilisé.  [...]

Exo

Donc deja la PCR c'est pas la technique avec les vecteur pour amplifier un signal par clonage d'ADN.  [...] Amplifier une séquence d'ADN en la clonant, ce n'est pas de la PCR. Mais on peut faire une PCR sur un clone, bref, je veux pas t'embrouiller donc je te donne directement ce lien sur la PCR. Tu verras c'est très complet, mais la définition générale est bien là et t'aidera sans doute à comprendre, sinon reviens ici, quelqu'un t'expliquera bien (moi peut-être ).  [...]

vecteur de clonage et d'expression

Un vecteur d'expression contient des régions promotrices et des séquences régulatrices permettant la transcription et la traduction de l'ADN.  [...] Un vecteur de clonage permet uniquement le transport et la multiplication de l'ADN inséré dans une cellule hôte.  [...]

exercice de génomique assez complexe..

Quels seraient les sites de clonage susceptible d'insérer cette séquence d'ADN, parmi les site de clonages suivants, qu'on supposera présents chez un vecteur quelconque.  [...] Puis ensuite voir si tu peux mettre ta séquence d'ADN digéré, c'est à dire sans les morceaux sur les côtés, après (ou avant, suivant comment on se place) les /.  [...]

transgenèse

Vous savez également comment introduire un gène d'intérêt dans un vecteur désarmé, ou de l'ADN exogène dans un génome chloroplastique.  [...] Ben j'ai répondu pourtant. C'est un vecteur, donc un système porteur d'une séquence d'adn destinée à être transférée dans un autre organisme. Mais ce même vecteur peut-être utilisé pour le clonage, c'est-à-dire qu'il est capable de se répliquer dans une bactérie E.  [...]

comment cloner une enzyme extraite d'une cellule animale?

Sinon, tu as deux choix, si tu as identifié la famille de ta protéine, cherche des homologues insectes dans les banques de données, fais une retrotranscription des ARNm avec un polyT, puis à l'aide d'une amorce semi spécifique (designer pour coller à qqchose qui ressemble aux protéines homologues identifiées) tu fais une PCR et tu clones.   [...] Voilà, mais dans ces deux cas, obtenir la séquence complète peut être difficile (il faut quand même assez de produit et c'est assez cher)... d'où mon insistance pour obtenir un fragment n-ter et rétrotranscrire, puis amplifier via un polyT et ton amorce spécifique N-ter, cloner dans un plasmide et hop là (en espérant que l'ARN messager soit bien rétrotranscrit, et que la PCR se passent bien...).   [...]

[Biologie Moléculaire] PCR et Clonage

s.v.p j'aimerai bien comprendre la différence entre la PCR et le clonage autrement dit est-ce-que lors d'une amplification de l'ADN le choix entre une PCR et le clonage se fait d'une manière aléatoire ou bien y'a des règles a suivre.  [...] La PCR permet d'amplifier une portion d'un génome d'ADN selon les amorces que tu choisis. Le clonage consiste à insérer un morceau de gène à l'intérieur d'un ADN.. (souvent dans celui d'E.coli via un plasmide, dit vecteur).  [...]

PCR et vecteur de clonage

Les vecteurs de clonage permettent d'obtenir un vecteur (plasmide, phagemide, cosmide etc...) quand on parle d'amplification de l'ADN, c'est alors que tu as une molécule qui va se répliquer dans la bacterie (comme les chromosomes) ceci va permettre d'obtenir un grand nombre de copie du plasmide.  [...] Tu peux faire une PCR avec des amorces spécifiques d'une séquence pour en vérifier la présence dans un ADN donné. Par exemple à la suite d'un clonage, après sélection des transformants sur antibotiques/marqueur, avec des amorces spécifiques à l'insert, tu peux rechercher les transformants dont le vecteur a intégré l'insert d'intérêt.  [...]