• Forum - ADN, Utilisation, échantillons

Qu'est-ce que le postulat de Koch?

la PCR permet l'amplification d'une partie de l'ADN de maniere extremement importante et rapide (une sorte de photocpieuse), cela offre le gros avantage d'obtenir des quantités d'ADN travaillable a partir d'echantillons tres peu concentres.  [...] Comme l'a très bien expliqué Yoyo, cette technique permet une réplication de l'ADN et éventuellement une utilisation des échantillons ainsi obtenus.  [...]

Tampon TE

A la fin d'un extraction d'ADN, je me suis trompée, jai utilisée du tampon TE 10X au lieu du tampon 1X.. et mes mesures au spectrophotometre me montre que jai tres peu voir pas du tout d'ADN.. pensez vous que ce soit dû à l'utilisation de tampon TE10X Est ce que je peux y remedier parce que le probleme cest que je nai plus les echantillons à l'origine de l'extraction.  [...] il y a une section biologie dans le forum, ta demande y serait mieux placée.   [...]

[Biochimie] Tampon TE

A la fin d'un extraction d'ADN, je me suis trompée, jai utilisé du tampon TE 10X au lieu du tampon 1X.. et mes mesures au spectrophotometre me montrent que jai tres peu voir pas du tout d'ADN.. pensez vous que ce soit dû à l'utilisation de tampon TE10X Est ce que je peux y remedier parce que le probleme cest que je nai plus les echantillons à l'origine de l'extraction.  [...] La force ionique est un parametre essentiel pour le decrochage de l'ADN des colones, donc oui avec un TE10X tu as toute les chances que l'ADN soit encore dans la colone.  [...]

Conservation d'échantillons biologiques à t° ambiante

En fait ce sont des échantillons de queues (de rat) qui ont été congelées à -80°C, je voudrais les (faire)transporter sans utiliser de carboglace (à cause du prix).  [...] L'ADN étant très résistant, je (et d'autres personnes de mon labo) suppose que oui mais je préférerais avoir confirmation pour ne pas perdre mes échantillons (et donc du temps).  [...]

Différences d'ADN entre les ètres vivant ?

Imaginons que tu me demandes de te fournir un échantillon de mon ADN pour faire une électrophorèse et que je te passe un échantillon contenant de l'ADN de salade, quelque chose te mettrait la puce à l'oreille ou non.  [...] Imaginons que quelqu'un me demande de lui passer 2 échantillons contenant mon ADN et que par mégarde je lui passe 2 échantillons d'ADN de salade.  [...]

[Biologie Moléculaire] mélange équimolaire des ADNs

J'ai 10 échantillons que je dois mélanger pour obtenir un mélange équimolaire de 2µg total, ça veut dire que je dois prendre 200 ng d'ADN de chaque échantillon. Ça veut dire que si par exemple mon échantillon d'ADN est concentré à 40ng/µl, je dois prendre 5µl pour un mélange.  [...] Le volume des échantillons à mélanger est donc différent pour chaque échantillon (à cause de différentes concentrations des ADN).  [...]

[Biologie Moléculaire] pb migration ADNg sur gel

Sur le 2ème gel, (extraction sur d'autres échantillons avec le même kit), la patate est plutot décalée vers le bas. Il est possible que lors d'une resuspension j'ai cassé mon ADN.  [...] La dans tes echantillons tu as doses ton ARN+ADN. Comme tu ne prend aucune precaution particuliere pour isoler l'ADN, ton ARN est +/- degrade.  [...]

[Biologie Moléculaire] Interprétation PCRq en temps réel (SYBER Green)

A partir de la concentration en g/l tu calcules la concentration en mol/l en divisant les g/l par le poids moléculaire en g/mol (ou Da c'est la même chose). De là en utilisant le volume d'échantillon tu calcules la molarité n en mole, puis avec N tu connais le nombre de molécule soit le nombre de copie dans ton cas.  [...] L'utilisation en PCR des séquences ITS (ADN) dites universelles ont la même utilité que les séquences 18S (ARN) en RT-PCR, à savoir valider la présence d'ADN dans ton échantillon, leur qualité, et éventuellement normaliser tes dépôts. C'est un contrôle positif.  [...]

[Biologie Moléculaire] problème de qPCR sur des échantillons de maïs

je cherche à mettre au point une méthode de quantification en Evagreen d'un champignon dans des échantillons de maïs cultivés en serre, et tout a bien marché (dessin d'amorces spécifiques, quantification d'ADN du champignon pur...) mais dès que j'ai voulu passer les échantillons de maïs, j'ai obtenu des résultats non répétables, avec des pics de fluorescence qui ne correspondent pas au champignon et surtout qui changent d'un jour à l'autre.  [...] Etant donné que lorsque l'on mélange de l'ADN du champignon pur et de l'ADN de maïs pur on n'a aucun problème, j'ai pensé qu'il y avait des composés dans mes échantillons qui inhibaient la qPCR, mais j'ai testé plein de méthodes d'extraction et de purification et rien n'y fait.  [...]

[Biologie Moléculaire] probleme de signal southern

Quand je faisais mes southern, je les faisais avec une sonde marquee sur toute la longueur (elle etait plus longue d'ailleurs) avec un kit de chez Amersham. Mais normalement la dig marche bien, c'est ce que j'utilisais pour les EMSA. Tu as fais une quantification de ton marquage de la sonde (dilution en serie de ta sonde et revelation pour voir ou se trouve ton meilleur signal) Tu as essaye de faire synthetiser ta sonde directement avec la dig.  [...] Oui j'ai essayé de varier les concentrations des ADN a utiliser et j'utilise également ma sonde à la concentration optimum.  [...]