• Forum - ADN, éthanol

[Génétique] Précipitation de l'ADN dans l'éthanol, pourquoi une T° basse?

J'aimerais savoir pourquoi le rendement de la précipitation de l'ADN dans de l'éthanol augmente lorsque l'on baisse la t°.  [...] Il a été montré qu'on pouvait précipiter l'ADN a temperature ambiante avec la meme efficacité qu'a -20°C. Cette croyance proviens du fait que l'ethanol deviens plus visqueux a basse temperature, mais ca n'a pas d'influence sur l'efficacité de précipitation.  [...]

demande d'infos!!! extraction de l'ADN

Quand tu as ta sauce d'ADN, tu utilises un alcool (style éthanol) pour précipiter ton ADN (car l'éthanol est hydrophobe). Tu utilises ensuite des ions chargés positivement (NH3+,...) pour rapprocher les différentes molécules d'ADN (qui sont chargée - à cause de leurs phosphates) et ça permet le regroupement des ADN entre eux, ceux qui les rend visibles.  [...] En bref, il faut precipiter l'ADN avec de l'Acetate de Sodium et de l'Ethanol 70% par agitation puis centrifugation. Il faut eliminer tout l'ethanol puis nettoyer le culot avec de l'Ethanol 100%. Apres une nouvelle centrifugation, l'Ethanol est eliminé et le culot d'ADN seché puis remis en suspension dans un tampon.  [...]

[Identification] Extraction d'ADN

Homogénéiser doucement le contenu de l'Erlenmeyer, puis transférer 10 mL de ce filtrat dans l'éprouvette. Ajuster ensuite le volume jusqu'à 40 mL avec la solution froide d'éthanol à 90° (verser très délicatement et lentement la solution d'éthanol).  [...] Pour la question 3, je ne saurai pas décrire exactement le rôle de chaque produit. Par contre je pense que l'éthanol permet de cristaliser une fois mélanger avec le contenue afin de faire apparaitre l'ADN.().  [...]

Biochimie : Pourquoi a-t'on besoin d'éthanol pour extraire le fructose du citron?

Mon hypothèse est que la partie polaire de l'éthanol va venir se fixer à l'ADN et que sa partie apolaire va repousser les molécules d'eau..mais je souhaiterai confirmation.  [...] .Mais les électrolytes présents dans la solution vont maintenant pouvoir se lier aux groupements phosphates de l'ADN, ce qu'empêchait l'eau mais pas l'alcool, puisqu'il est moins polaire. Ainsi l'ADN est neutralisé et précipite dans l'éthanol.  [...]

[Biologie Moléculaire] precipitation ADN

Dans mon protocole pour precipiter de l ADN, on me dit de precipiter a froid avec NaCl et ethanol100 puis apres centri tout ça, de rincer avec de l ethanol70...et je suis pas sure de savoir a quoi ça sert, et pourquoi pas de l ethanol100.  [...] Ce qui doit être écrit dans votre protocole c'est que l'on reprend un volume V d'ADN dans 2V d'éthanol absolu non Si l'on fait le calcul, la concentration finale en ethanol est ~70%.  [...]

[Génétique] meilleur conservateur d'ADN

Je dois conserver des tissus de différentes espèces d'octopodes afin de faire des analyses d'ADN ultérieurement. Et j'aimerais savoir quel est le meilleur conservateur tissulaire afin que l ADN que je veut prélever plus tard ne soit pas abîmé. (Ex alcool, paraffine, -80ºC).  [...] L'ethanol 70% à -20°C est très bien pour conserver l'ADN. Ceci dit, si tu ne conserves les tissus que pour en extraire l'ADN, à ta place, je ferais deja une extraction, je pelotterais l'ADN et je le conserverais ainsi à -20°C, flottant dans l'ethanol.  [...]

Solubilité d'ADN et d'ARN

J'ai une question concernant la solubilité d'ADN et d'ARN.. D'apres ce qu'on m'a dit l'adn est soluble dans l'eau et l'arn dans les solvants organiques comme l'alcool, phénol, chloroforme.. Mais ARN précipité en présence d'alcool mais non pas l'ADN.. Est ce possible Pouvez quelqu'un m'expliquer SVP.  [...] L'ADN et l'ARN ne SONT PAS SOLUBLES dans le phénol, le chloroforme, l'ethanol, l'acétone, l'isopropanol etc... C'est d'ailleurs bien pratique quand on veut les extraire et les purifier.  [...]

extraction ADN

je fait de l'extraction d'ADN avec TE, lysozyme, SDS, isopropanol et éthanol mais j'obtiens un ADN pas très propre (. 1 au spectro). on m'a dit de rajouter une étape avec le chloroforme mais celui nécessite une hotte chimique ce qu'on a pas. je voulais donc savoir par quoi on pourrai le remplacer.  [...] * précipiter l'ADN en ajoutant 1 ml d'éthanol absolu froid (conservé au congélateur) - mélanger par retournement.  [...]

inhibiteurs de la qPCR

Sachant que la qPCR sera utilisée pour quantifier le nombre de copies de gènes et que l'ADN génomique a été extrait par la méthode Salting out.  [...] C'est l'ADN génomique d'un insecte (une mouche gallifère ). L'extraction d'ADN avec le CTAB n' a pas marché donc j'ai suivi le protocole du salting out ( precipitation des débris cellulaires avec le NaCl et lavage avec l'ethanol absolu pus l'ethanol 70).  [...]

[Biologie Moléculaire] Dilution d'ADN "contaminante"?

Pour MaliciaR. ADN visqueux = culot après précipitation à l'Ethanol mal resuspendu, ou présence d'ADN génomique (volontaire ou non.). Pour aider, il est possible d'incuber @ 50°C pendant 10min pour aider à la resuspension. Dans le cas d'ADN génomique, on peut soniquer (tout dépend des applications que l'on veut faire après, mais 10-30s suffit largement).  [...] Sinon, j'ai extrait mes ADN à partir de tissus animaux lysés 3h à 55° au bain-marie, puis phénol/chloroforme avec des tubes contenant un gel bloquant la phase P/chlo (très pratique) et Éthanol précipitation avant de reprendre mon culot dans de l'eau.  [...]