• Forum - ADN, Bandes, Révélation

[Microbiologie] extraction d'ADN

j'ai fait l'extraction d'ADN au phénol chloroforme je me suis rendue compte à la fin de la manipulation que le culot est chargé également en protéines pourrais je me rattraper.  [...] et pr la SDS page c est une electrophorese qui fait denaturer tn adn. c est un long mecanisme mais facile a appliquer, l essetiel c est qur tn adn denaturé va migrer et pour la revelation t utulise le.bleu de comassie, et dans un des puits tu dois aussi mettre des marqueurs de taille finilamnt t recupere tn gel et tu verifie tes bandes. j espere que je ne me trompe pas.  [...]

[Biologie Moléculaire] Révélation des extraits d'ADN

Bref, la suite logique c'est bien sure la révélation sur un gel d'agarose, seulement voilà, aujourd'hui après avoir placé mon gel dans la cuve j'ai obtenu de grosses taches bleues qui ne ressemble aucunement au profil auquel je m'attendais.  [...] Mais vous avez mis du bleu de charge dans vos ADN non Les bandes bleues c'est en vision directe ou après une quelconque révélation que vous n'expliquez pas.  [...]

[Biochimie] Problème de révélation des mbnes de nitrocellulose : bandes non spécifiques claires sur fond foncé

Problème de révélation des mbnes de nitrocellulose. bandes non spécifiques claires sur fond foncé.  [...] La révélation des membranes de nitrocellulose par chimiluminescence (kit ECL) montre toutes les bandes de l'extrait protéiques blanches sur un fond gris foncé (qui se fonce au fur et à mesure du temps de l'exposition dans l'appareil). Autrement dit la révélation a donné une sorte de ponceau blanc.  [...]

[Biochimie] bandes parasites aprés révélation western-blot

[Biochimie] bandes parasites aprés révélation western-blot.  [...] j'aimerais savoir si quelqu'un à l'habitude de réaliser des immunoprécipitations avec révélation de la protéine d'intérêt en western blot.  [...]

[Biologie Moléculaire] échec de révélation sur gel d'agarose des produits d'ADN après purification

[Biologie Moléculaire] échec de révélation sur gel d'agarose des produits d'ADN après purification.  [...] échec de révélation sur gel d'agarose des produits d'ADN après purification.  [...]

[Biochimie] Problème avec mon western

Mais quand j'ai déshybridé la membrane pour hybrider l'actine, à la révélation c'était la catastrophe, j'ai eu presque pour tous les puits des mi bandes, comme si les puits étaient remplis qu'à moitié avec les protéines... je ne comprend vraiment pas.  [...] Et puis, avec ma première révélation j'avais des bandes entières mais après déshybridation (PBS-Tween pendant 2) il n y'a plus que des moitiés.. (enfin en ce qui concerne l'actine).  [...]

[Biologie Moléculaire] Eléctrophorèse

Le PAGE SDS dénature les protéines en rompant les liaisons hydrogène, donc si on obtient deux bandes à 50000 et 30000 cela signifie que la protéine est multimérique et contient au moins 2 sous-unités de ce poids moléculaire là.  [...] Je m'explique, oilà ma théorie et si elle est fausse, alors tout mon raisonnement est faux. si on prend le cas de l'hémoglobine, constituée de 4 chaînes de globine. 2 alpha et deux bêta, identiques 2 à 2. Si on fait une electrophorèse Page SDS, alors, on devrait obtenir 2 bandes.  [...]

[Immunologie] Westernblot

Nous avons séparé le gel en 2 parties, une coloré au bleu de Croomassie et l'autre pour le transfert. Après transfert (séparé en 5 bandes), nous avons utilisé le NHS-biotine (sans anticorps) sur une des bandes. Les 4 autres bandes ont servi pour une réaction immunoenzymatique.  [...] Comment as-tu fait la révélation pour les différentes bandes (NHS-biotine et réaction immunoenzymatique).  [...]

[Biologie Moléculaire] Page sds

plus le voltage est élevé, la séparation des bandes est rapide mais lors de la révélation la séparation des bandes sera moins nette. Pour certains protocoles nous réalisons des migration à faible voltage durant plusieurs heures.  [...] Si ce n'est toujours pas bon, tu peux lancer la migration pendant 16h (sur la nuit) à 60V. Le lendemain, tu check l'avance des bandes du marqueur, et tu peux accelérer à 100V pour plusieurs heures si ce n'est toujours pas bon.  [...]

[Biochimie] Marqueur de taille

Du coup je suis coincée car je ne vois pas comment identifier les bandes apparues et leur associer une masse moléculaire.  [...] Bonjour, c'est assez classique avec les marqueurs de taille, pour les voir toutes il faut des gels à gradient. La solution c'est de se baser sur l'épaisseur des bandes, en général il y en a des plus importantes, ou alors l'agencement entre elle, il faut regarder sur la notice.  [...]