• Forum - ADN, Bandes, Marqueurs

[Biologie Moléculaire] PCR et témoin négatif

une autre question, comment faire pr estimer la taille des bandes sachant que l'on dépose 7µL de produits PCR mais que la ladder correspond a 500ng d'ADN.  [...] Concernant la quantité relative. En général pour les ladders commerciaux, on peut connaitre la quantité d'ADN pour une ou plusieurs bandes du marqueurs de taille. Apres il faut comparer l'intensité du produit de PCR avec l'intensité des bandes du marqueurs de taille.  [...]

[Microbiologie] extraction d'ADN

pour extraire t adn t peux faire une chromatographie avec une hydorxyapatite avec la forme minerale de phosphate en partant au depart par une cncentration faible puis pr eluer tn adn au augmente la concentration mais bon ça depnde aussi de la charge des autre proteines.  [...] et pr la SDS page c est une electrophorese qui fait denaturer tn adn. c est un long mecanisme mais facile a appliquer, l essetiel c est qur tn adn denaturé va migrer et pour la revelation t utulise le.bleu de comassie, et dans un des puits tu dois aussi mettre des marqueurs de taille finilamnt t recupere tn gel et tu verifie tes bandes. j espere que je ne me trompe pas.  [...]

Demande d'aide pour un exercice

Ils peuvent être mis en évidence par le bromure d'éthidium, un agent intercalent qui fluoresce quand on expose le gel aux UV. Les fragments apparaissent alors sous la forme de bandes roses sur le gel.  [...] Le critère de séparation des fragments est leurs nombres de paires de base. L'électrophorèse sépare 11 fragments d'ADN. Grâce à des marqueurs de poids moléculaires, on estime leurs longueurs comme variant de 220 à 260 paires de bases. Les différentes bandes ou fragments identifiées sont ensuite découpées dans le gel d' agarose.  [...]

[Biologie Moléculaire] Temps de migration de long fragments d'ADN

En faisant un peu de biblio sur les marqueurs que j'ai allumé en PCR, j'ai vu que je pouvais m'attendre à des fragments allant jusqu'à quelques kpb voire dizaines de kpb (max 50-60).  [...] tu peux faire une electrophorese normale avec un gel 0.3prcent grand format a 30V pendant 14-16h, et tu obtiendras un beau gel avec une belle separation. En ce qui concerne les marqueurs tu peux aussi utiliser de l'ADN de Lambda clive avec Xho1 tu obtiendras trois jolies bandes.  [...]

A quoi sert une électrophorèse ?

Mais à quoi ça sert Je comprend pas le principe, on fait migrer des bandes, et faut comparer nos bandes avec celle du marqueur, mais comment je suis censé interpréter tout ça A quoi ça sert Pourquoi les faire migrer.  [...] Là par exemple, j'ai fais migrer un ADN d'E.Coli, avec un deux marqueurs de taille, un de 100pb, et un de 1kb, je comprend pas comment faire pour comparer les tailles, les ADN d'E.Coli se sont tous arrêtés au même endroit, et ça fait une succession de bande pour les marqueurs.  [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorèse

Il faut déterminer le nombre de fragments de restriction et leurs tailles pour l'hydrolyse des 2 ADN (ADN1 et ADN2) par les deux enzymes (BamHI et XhoI).  [...] Tu es sur la bonne voie avec l'idée des sites de restriction Un site c'est un endroit de taille petite, une position Donc, les numéros marqués sous tes traits verticaux sur la carte sont des.  [...]

TPE: La Transgénèse: Où est la physique?

Je ne sais pas ou ca en est sur l'évolution de l'optogenetique, mais le potentiel est grand. Activer des protéines en ciblant spécifiquement les cellules, en dehors de l'exemple du neurones, ca doit ouvrir d'immenses possibilitées, si on ajoute à ca l'utilisation de longueurs d'ondes différentes pour faire de la co-activation dans certaines cellules (en envoyant deux longeurs d'onde sur telle cellule tu activerai les deux proteines tandis que sur celle d'a coté tu n'enverrai qu'une des deux longueurs d'ondes et n'activerai qu'une seul).   [...] dans le même genre tu peux parler des protéines du style GFP et ses dérivés (YFP RFP...) qui permet après synthèse du construit et transgenese, de détecter et localiser des protéines dans les cellules (longueurs d'onde d'excitation et d'émission, pourquoi la longeur d'onde d'excitation est inferieur a celle d'émission.   [...]

western

J'ai pour cela augmenté la concentration de mon gel de separation (jusque 15% ce qui correspond à une protéine de 28Kd). Cependant certaines bandes non spécifiques restent trop larges (en hauteur) et empechent une bonne visualisation de ma bande d'interet.  [...] Et j'ai eu des bandes bizarres s'il y avait un vide de côté. Ton échantillon est entouré d'autres échantillons ou de marqueurs de taille S'il y a un vide, ca peut expliquer que les bandes ne soient pas toujours parallèles.  [...]

[Divers] Différence entre Biochimie et Biologie moléculaire

Je ne pense pas qu'existe une discipline qui s'appellerait phylogénie moléculaire, par contre on peut parler d'une phylogénie moléculaire pour un arbre phylogénétique construit à partir de marqueurs moléculaires c'est-à-dire d'ADN, ARN ou protéines. Mais les méthodes de construction d'arbres (on dit dans le métier de phylogénies ) sont (à peu près) les mêmes qu'il s'agisse de marqueurs moléculaires ou de caractères phénotypiques.  [...] Je ne pense pas qu'existe une discipline qui s'appellerait phylogénie moléculaire, par contre on peut parler d'une phylogénie moléculaire pour un arbre phylogénétique construit à partir de marqueurs moléculaires c'est-à-dire d'ADN, ARN ou protéines.  [...]

Dosage sur gel

Je dois comparer la largeur et l'intensité des bandes entourées en bleu avec celles du lader (Lambda) les plus proches mais j'ai du mal car l'intensité est très différente (celle du lader est faible par raport à celle des PCR). Est-ce que je peux les comparer avec celle encadrée en rouge.  [...] Hélas, il y a un écart de taille conséquent (je suppose, de mes souvenirs de ce marqueurs) entre les bandes entourées et celles qui iraient le mieux. Si tu veux utiliser quand à tout prix les bandes rouges du ladder, tiens compte de la différence de taille (il suffit de pondérer par le rapport des deux tailles).  [...]