• Forum - ADN, ARN, Tube

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ADN génomique

moi j'utilise le quick yeast DNA PREP et j'ai toujours des problèmes soit contamination par l'ARN soit j'arrive pas à digérer l'ADN.  [...] j'ai un protocole super simple et tres rapide, mais ca ne différencie pas l'ADN de l'ARN. Si tu es géné par une contamination ARN pourquoi ne pas mettre de la RNAse dans ton tube.  [...]

[Biologie Moléculaire] Que devient l'ARNr dans une reaction de RT

Effectivement, je n'ai pas utilisé de RNAse, ma transcriptase reverse a une petite activité RNase H (élimine les ARN des Hybrides ARN.ADN), j'utilise des oligo DT pour que ma RT soit spécifique des ARNm...alors dans mon tube de RT j'ai de l'ARN total, donc quand je depose moin cDNA sur puce, j'ai de L'ARNt, l'ARNr l'ARNm et du cDNA...alors ou sont passés mes ARNr.  [...] 2/ une puce (c une toute petit plaque avec 16 mini puits) dans chaque puits tu dépose un gel qui contient un Dye spécifique de ton ARN (contrairement au BET) tu ajoutes ensuite un tampon et un ladder de poids moléculaire. L'appareil analyse tes échantillons 1/1 en commençant par le marqueur qui sert de PM et d'étalon.  [...]

mise en evidence de l'ADN et l'ARN

Bonsoir, je suis étudiante en médecine et j'ai un exposé sur la mise en évidence de l'ADN et l'ARN et j'ai rien trouver sur le net et je sais même ce que je dois cherché. Svp vous pouvez m'aider et me donné une idée sur sa. Sachant que c'est mon 1er exposé a la fac vue que je suis en 1ere année. Merci.  [...] Pour moi une technique toute bête pour savoir si ce que tu as dans ton tube est de l'ADN ou de l'ARN tu traites soit avec une DNase soit avec une RNase, tu fais migrer sur gel en présence d'un intercalant (BET par exemple). Si la bande persiste après traitement à la RNase tu as de l'ADN et inversement.  [...]

pourquoi on dit que l'ARN est dense?

je voudrais savoir pourquoi l'ARN est plus dense que l'ADN double brun et mono-brun, et pourquoi le monocaténaire et plus danse que le bi et pourquoi le bi est plus dense que les protéines.  [...] La mesure de densité de ce genre de macromolécules (ADN, ARN) s'effectue par centrifugation sur Chlorure de Césium (CsCl). Lorsqu'on centrifuge une solution de CsCl dans un tube, elle produit un gradient de densité (haut du tube. faible densité et bas du tube.  [...]

[Biologie Moléculaire] Technique d'hybridation

On peut volontairement synthétiser un brin d'ADN à partir d'un ARN en particulier de l'ARNm eucaryotique de façon à avoir un brin d'ADNc (ADN complémentaire) que l'on peut introduire dans un vecteur en vue d'un clonage. Cet ADNc une fois traduit dans des cellules procaryotiques donne un ARNm sans introns qui peut être traduit sans trops de problèmes.  [...] Je pense qu'il pourrait s'agir de la transcription inverse cependant un détail m'intrigue. l'hybridation de la sonde d'ADN monocaténaire sur des ARNm séparés par électrophorèse. La transcription inverse s'effectue dans un tube sans que les ARN aient été séparés auparavant.  [...]

[Génétique] PCR ou RT-PCR

La RT est donc utilisée pour obtentir des ADNc complémentaires des ARN que tu as utilisés comme matrice. Ces ADNc peuvent ensuite être utilisés comme matrice dans d'autres types de PCR pour par exemple quantifier un certain ARN.  [...] La RT n'est pas forcément spécifique. par exemple, tu veux quantifier un ARN particulier dans un tissu. Pour ça, tu fais une RT avec les ARN extraits de ce tissu avec des amorces aléatoires, tu obtiens donc des ADNc correspondant à tous tes ARN. Ensuite tu peux amplifier par PCR une région spécifique en utilisant des amorces spécifiques.  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

Je précise également que la pelote d'ADN (séché au fond du tube, on peut la voir facilement), il s'agit en fait de l'ADN de millier de cellules. Même si c'est fragile dans ce cas (il agitation trop forte risque de casser l'ADN aléatoirement), le nombre de copie permet généralement de compenser ces problèmes.  [...] Ce qui amène également un autre problème. Si on rajoute un échantillon F dans le tube Z, on ne pourra pas identifier son ADN au complet (tout les micro-satellites) à cause de ces bandes identiques. Mais je cherche la petite bête.  [...]

[Biologie Moléculaire] Rt-pcr

Alors en effet ça à l'air d'être des ARN dégradés. Tes ARN tu les vérifies avant ou après le traitement DNAse moi j'avais l'habitude de faire les 2 pour être sûr de la qualité.  [...] si les ARN sont susceptibles de dégradation, ce que je fais c'est mettre 1µl de RNAsin dans un tube vide, puis d'éluer les ARN de ma colonne dans ce tube. Bien agiter.  [...]

[Biologie Moléculaire] Kits d'extraction d'ARNm

2) passage sur des petites colonnes de purification, qui permettent de séparer l'ARN du reste des contaminants (fibres végétales...). Ces colonnes contiennent une petite membrane de silice auxquelles les ARN se fixent spécifiquement. Les autres composés passent à travers la membrane et sont collectés dans un tube collecteur.  [...] J'ai une question bête suite à ça, comment la colonne fait-elle la différence entre les ADN et les ARN (qui ne doivent pas avoir des propriétés chimiques radicalement différentes).  [...]

isolation d'un plasmide

Tout agit avec tout. L'ADN plasmidique, plus petit et plus compact peut retrouver lui sa forme native et reste exclu du précipité. Dés lors, un étape de centrigugation permet de séparer le plasmide (et les petites protéines et des ARNs) restés en solution, du reste précipité au fond du tube.  [...] Les bactéries compétentes utilisées pour la transformation et l'amplification ne possédent pas de plasmides... pour t'en rendre compte, fait, à partir d'une colonie, une culture de bactéries non transformées d'une part et transformées d'autre part... fait ensuite une miniprep d'ADN plasmidique.  [...]