• Forum - Activité, Concentration, Enzyme

[biochimie] activité spécifique d'un enzyme selon la concentration

J'aimerais qu'on me confirme si j'ai raison ou non de croire que l'activité spécifique d'une enzyme ne varie pas avec la concentration d'enzyme.  [...] Si tu connais l'activité spécifique d'une enzyme particulière. Tu connais donc 100% de la valeur. Or généralement, l'échantillon n'est jamais pure. Tu comprends donc qu'on peut s'en servir pour mesurer la purification d'un enchantillon d'une enzyme donnée.  [...]

[Biochimie] cinétique enzymatique

1. influence de la concentration en enzyme. j'ai tracé la courbe P=f(t) pour chaque concentration, j'ai dédui des courbes les vi (tangente à l'origine c'est bien cela ) et j'ai tracé la courbe vi = f(Ce) que j'ai aussi interprété.  [...] Enfin, désolé avec mes questions, pour déterminer la concentration molaire, dois-je utiliser l'activité spécifique de l'enzyme calculée dans la 1ère partie.  [...]

[Biochimie] Influence de la concentration en enzyme Calcul activité spécifique

Il faudrait connaître l'AS de la ß-galatosidase pure ce qui te permettrait de déterminer le degré de pureté de ta préparation d'enzyme.  [...] Par exemple, si une enzyme a une AS de 1000 µmol/min/mg quand elle est pure, et que tu ne trouves que 10 µmol/min/mg dans une préparation, c'est simplement parce que ton enzyme est pure à 1%.  [...]

[Biochimie] Enzymologie et calcules

Bonsoir, suite à un Tp d'enzymologie effectué avec l'enzyme de la PAL, je me retrouve face à un problème lors du calcule de l'activité moléculaire spécifique de la PAL (µmol/min/mon d'enzyme soit exprimé en min-1) j'ai donc appliqué la formule AMS = (vitesse/ nombre de mol de l'enzyme).  [...] Après avoir effectuer les calcule de la vitesse, de l'activité enzymatique, de l'activité spécifique ainsi que du nombre de mol d'enzyme.  [...]

[Biologie végétale] Activité Carboxylase de la Rubisco

Sur mon cours de physiologie végétale, concernant l'activité de l'enzyme Rubisco, je me heurte a un problème, l'enzyme Rubisco peut avoir une fonction de carboxylase et d'oxygénase en fonction de leur concentration dans l'air ainsi que de leur affinité (Km) avec l'enzyme. cependant à plusieurs reprise il est dit que.  [...] Lorsque tu augmentes la température dans un tissu végétal, la quantité de CO 2 dissous diminue. De ce fait, le rapport O 2 /CO 2 augmente car l'O 2 est présent dans de plus grandes concentrations. Il en résulte un augmentation de l'activité oxygénase.  [...]

Purification d'une enzyme

Lors de la purification d'une enzyme, comment par mesure d'activité peut on s'assurer d'avoir obtenu la préparation la plus pure possible et comment vérifier que l'on a obtenu l'enzyme à l'état pur.  [...] Il faut que l'activité spécifique de l'enzyme pure (AS en u/mg) soit connue. On mesure l'activité de la préparation en unité par mL (u/mL) et on dose la concentration en protéine en mg/mL. Ensuite on fait le rapport activité/mL et mg/mL ce qui donne l'AS de la préparation.  [...]

[Biochimie] Activité de la LDH

J'ai fais un TP pour déterminer l'activité de la lactate déshydrogénase. J'ai trouvé une valeur de l'ordre de 10^-9 pour l'activité enzymatique et de l'ordre de 10^-7 pour l'activité spécifique exprimée en katal/mL. Je dois bien evidemment discuter de ces résultats mais je n'ai aucune valeur théorique.  [...] En même temps cette activité dépend de la concentration de l'enzyme ect...sauf que nous n'avons que le volume prélevé pour la manip. Donc qu'en pensez-vous Peut-on tout de même dire quelque chose Sur l'ordre de grandeur qui me paraît bien.  [...]

[Biochimie] Activité phosphatase alcaline

Les UI sont des micromole de substrat consommé par minute (à vérifier quand même). On peut dire que c'est représentatif d'une quantité d'enzyme. Donc ton activité en UI/L est représentatif d'une concentration d'enzyme.  [...] Donc si tu as ta concentration de départ en PNP et finale et que tu sais combien de temps il y a entre ces deux points tu peux déterminer la vitesse de ton enzyme. Tu me suis.  [...]

La mesure de l’activité enzymatique par spectrophotométrie et sa relation avec l’NAD

Je comprends que lors de l'étude de l'activité enzymatique d'une enzyme, si les substrats et les produits n'ont pas d'absorbance cela implique la mesure de l'absorbance d'un coenzyme impliqué dans la même réaction enzymatique. Mais je n'arrive pas à assimiler le suivant.  [...] Si j'avais bien compris, on utilise 340 nm car à cette longueur d'onde seule l'NADH absorbe alors l'absorbance serait exclusivement proportionnelle à la concentration de NADH dans la solution, tandis que cette concentration d'NADH mesurée serait elle-même proportionnelle à l'activité de l'enzyme. Est-ce correct.  [...]

96-well plates Beer-lambert

Ou alors il faudrait laisser exactement le même temps d'hydrolyse et prévoir des concentration en substrats différents mais ca m'a l'air compliqué (si on arrive dans les conditions limites du substrat pour l'enzyme il va avoir une erreur, non).  [...] La concentration de Bapna finale m est égale (je me suis mis au dessus du Km pour être sur qu'il n'est pas la limitation, il est en excès), je veux juste savoir l'activité spécifique de mon enzyme.  [...]