• Santé - Vecteur, Génétique, Site

[Biochimie] Clonages avec un vecteur phage lambda

comment utilise-t-on le phage lambda comme vecteur en genie genetique et quand est-ce-que il se dirige vers le site lytique ou vers la lysogenie mais toujours sous un aspect genie genetique.  [...] et aussi avez-vous le genome detaille du phage lambda avec les differents genes CI, N, O,... avec les poromotrurs les Tr et anti Tr.   [...]

[Biologie Moléculaire] Phage et clonage

je serais reconnaissant à ceux qui pouront m'indiquer des sites relatifs au génie génétique, au phage Lambda, M13, la fabrication de vecteur phagique pour le clonage.  [...] Ce que j'ai trouvé jusqu'a présent est assez sommaire, je voudrais aller plus loin dans les explications.   [...]

transgénèse végétale

Dois-je prendre des primers qui ont un site de restriction bien spécifique pour pouvoir mettre l'ADN amplifié dans le vecteur ti désarmé après Quel doit être la longueur du primer environ.  [...] Le promoteur 35S faut-il que je le clone aussi dans le vecteur ou est il généralement déjà dans les plasmide ti désarmé avec un site polylinker Si quelqu'un connait un site ou il y a un schéma ce serait super.  [...]

[Biologie Cellulaire] enzyme de restriction

On prélève l'insert (le gène à cloner) grace a une enzyme de restriction qui va cliver l'ADN sur des sites de restriction spécifique (c'est une séquence palindromique). On peut ensuite amplifier l'insert par PCR. puis l'insérer dans le polylinker avec une ligase.  [...] Si on utilise la même enzyme de restriction pour le vecteur et l'insert, on aura le site de restriction du vecteur qui va correspondre aux extrèmités débordantes de l'insert, donc celui-ci pourra s'hybrider facilement avec le vecteur.  [...]

[Génétique] les vecteurs

s'il vous plait est ce que le site de restriction (au niveau du vecteur) = site d'insertion d'une séquence d'un gene (resistant à l'antibiotique par expl).  [...]

[Génétique] Questions à propos de la thérapie génique

C'est un cycle viral au départ classique en fait, l'enveloppe/membrane fusionne avec la membrane plasmique de la cellule hôte, donc déjà une partie du vecteur se retrouve ici. Après, les différentes protéines contenues dans le vecteur agissent pour transférer le matériel génétique dans le noyau et puis il y a (ou non) intégration du transgène.  [...] Or, les virus, pour rester sur cet exemple de vecteur, ont une capacité limitée en terme de taille de matériel génétique à encapsider. Cette taille correspond à la taille naturelle de leur matériel génétique et est donc propre à chaque virus.  [...]

Vecteur viral suicide

Concernant, le clonage génétique et les méthodes de transferts de gènes pour la création d'OGM, qu'est ce qu'un vecteur viral suicide.  [...] Est un vecteur viral.. désarmé.. ne possédant pas les gènes lui permettant de réaliser un cycle infectieux complet et qui ne peut pas s'intégrer dans le génome de la cellule Ou est ce que son information génétique peut s'intégrer dans le génome de la cellule mais il ne peut pas être produit de nouvelles particules virales.  [...]

[Biologie Moléculaire] Sites de restrictions proches sur vecteur

Piwi, technique élégante, petite question. le vecteur avec le MCS modifié, tu l'amplifie en bactérie avant de refaire la digestion par XhoI, ou bien tu enchaines les différentes étapes, car si tu amplifies en bactérie, comment fais tu pour discréminer un clone avec un MCS modifié d'un clone avec le MCS normal La différence de taille après digestion par d'autres enzymes ne me semblant pas vraiment jouable, je pencherai plus sur l'introduction d'un nouveau site de clivage non présent dans le vecteur, ce qui facilitera le screening pour trouver les clones modifiés.  [...] Prendre un des oligos que l'on a introduit dans le vecteur pour faire du colonie lift (une sorte de southern blot in situ). Ca marche assez bien mais en général on le fait quand on a du mal à trouver des clones recombinants. C'est un peu l'artillerie lourde pour pas grand chose.  [...]

[Biologie Moléculaire] "Vectorologie" : le cPPT ?

Dans le vecteur permettant l'expression du plasmide dans les cellules eucaryotes (alternativement il sert aussi à la production des particules), il y a juste après le site d'insertion du shRNA un site appelé cPPT pour central Polypurine Tract.  [...] A retroviral RNA genome contains short stretches of purines, called polypurine tracts (PPTs), near the 32-end. These PPTs function as RNA primers for plus-strand DNA synthesis during reverse transcription. Complex retroviruses (including HIV-1) contain a second, more centrally located PPT that provides a second site for initiation of DNA synthesis.  [...]

Définition | AAV - Virus adéno-associé - Adeno-associated virus | Futura Santé

Le virus AAV a été utilisé comme vecteur pour réaliser des transferts de gènes in vivo, dans des modèles animaux, mais aussi lors d' essais cliniques. C'est un vecteur pour la thérapie génique. Par exemple, il a été utilisé pour injecter un gène fonctionnel visant à soigner une maladie génétique de la rétine, l' amaurose de Leber.  [...] L'AAV possède une capside de 20 nm de diamètre, non-enveloppée, contenant un ADN simple brin de 4,7 kb. Le génome comprend deux gènes, rep et cap, entourés de séquences palindromiques appelées ITR ( Inverted Terminal repeats ).   [...]