• Santé - Vecteur, Clonage, Bactéries

[Biotechnologie] vecteur de clonage et vecteur d'expression

donc si j'ai bien compris, le vecteur de clonage s'utilise in vitro alors que le vecteur d'expression est inséré dans une bactérie pour exprimer le gène d'intérêt.  [...] Un vecteur de clonage permet, comme son nom l'indique, de faire un clonage, c'est à dire de placer un insert dans le vecteur d'intérêt (ligation) puis après transfection/conjugaison/infection/... de multiplier la quantité d'ADN au cours des divisions bactériennes/des infections virales/... selon le type de vecteur utilisé.  [...]

[Biologie Moléculaire] démarches expermentales

- clonage du produit de PCR grâce a un vecteur d'expression dans des bactéries contrepentes.  [...] mais je ne sais pas quoi proposer après comme expérience après le clonage tjr pour mettre en évidence la mutation attendue dans le gene X.  [...]

[Biologie Moléculaire] Banques d'ADNc

Les banques d'ADNc permettent de créer un image moléculaire de tous les ARNm exprimés dans un tissu ou à stade du développement donné. Par une série de manip, les ARNm seront sucessivement copiés en ADNc et insérés dans des vecteurs. Ces banques pourront être utilisés pour isoler les ADNc de génes particuliers qui seront identifiés selon les propriétés recherchés.  [...] Aprés, si tu veux utiliser les clones de ta banque pour un clonage, tu sélectionnes un virus de ta banque ( il existe plusieurs techniques dont celle de criblage de banque) pour faire une transduction sur tes bactéries. Ainsi tu amplifies ton vecteur et par la suite tu peux isoler les vecteurs amplifiés pour tes clonages.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clone sans ADN

oui, effectivement. Nous faisons tous nos clonage dans les bactéries E. Coli Dh5 alpha ou BL21. Ce vecteur a également déjà été utilisé dans d'autres clonages.  [...] Vous sélectionnez avec de la kanamycine ou de la spectinomycine La carte de chez stratagene (qui produit le plasmide que vous utilisez) indique qu'il y a dedans un gène de résistance neo/kana. On peut se demander si vos bactéries résistent à la spectinomycine.  [...]

ADN recombinant et plasmide

Bonsoir, je n'ai pas d'exemple de bactéries, mais j'ai une image où l'on montre une bactérie avec ses propres chromosomes, et on lui introduit un plasmide. Voici l'image diapo numéro 7. http.//www.dil.univ-mrs.fr/~vancan/o...ours2003_4.pdf.  [...] Lorsqu'on fait une expérience de clonage comme celle que tu vois sur la diapo, le plasmide n'est pas retiré d'une bactérie. C'est un vecteur que l'on a en stock dans nos labos (et que l'on achète à des sociétés qui les produisent souvent) et qui permet d'insérer le fragment d'ADN qui nous intéresse pour le multiplier en grande quantité dans des bactéries (généralement des Escherichia coli ).  [...]

clonage

donc je suis vraiment dzl de vs déranger mais je veux juste savoir prk passé par le clonage dans des bactéries alors que le le produit de PCR va être déjà amplifié avec des amorces spécifiques du gène d'intérêt ciblé par les TALEN, un gel d'agarose suffit d'après mon raisonnement.  [...] J'imagine que la mutagénèse par cette technique des TALENs (c'est un produit commercial, regarde sa notice) se fait in vivo donc en utilisant la machinerie de la bactérie (ou d'un autre organisme), le clonage du produit de PCR dans le vecteur permet de travailler avec le produit in vivo.  [...]

transgenèse

- Vecteur désarmé. vecteur de gènes auquel on a enlevé son pouvoir pathogène (ex. plasmide de la bactérie Agrobacterium tumefacies dont les gènes de virulence responsables de la galle du collet ont été retirés).  [...] Ben j'ai répondu pourtant. C'est un vecteur, donc un système porteur d'une séquence d'adn destinée à être transférée dans un autre organisme. Mais ce même vecteur peut-être utilisé pour le clonage, c'est-à-dire qu'il est capable de se répliquer dans une bactérie E.  [...]

PCR et vecteur de clonage

PCR et vecteur de clonage sont deux technique qui permettent d'amplifier un gène d'intérêt et je sais que l'amplification par PCR est de l'ordre d'un million de copies en quelques heures mais quel est l'ordre de grandeur pour le vecteur de clonage (inséré dans une bactérie E.coli BL21).  [...] Les vecteurs de clonage permettent d'obtenir un vecteur (plasmide, phagemide, cosmide etc...) quand on parle d'amplification de l'ADN, c'est alors que tu as une molécule qui va se répliquer dans la bacterie (comme les chromosomes) ceci va permettre d'obtenir un grand nombre de copie du plasmide.  [...]

[Biologie Moléculaire] vecteur de clonage et le vecteur d'expression

svp quelle est la difference entre le vecteur de clonage et le vecteur d'expression à part que l'un a un promoteur et pas l'autre.  [...] Vecteur de clonage. Destiné à isoler physiquement un fragment d'ADN et à amplifier le nombre.  [...]

[Biologie Moléculaire] Gène0 AOX1!!

En effet je n'ai pas très bien compris les mécanismes qui menenet à la multiplication des plasmides vecteur de clonage qu'on insère dans une bactérie.  [...] Pour répondre à Log, en complément à ce qu'a dit piwi, dans une bactérie,on peut trouvé une centaine de plasmides...et ce ne sont pas toutes les bactéries qui vont assimiler le vecteurs, pour les sélectionner,il existe ce qu'on appelle le Criblage...je peux m'étaler si tu veux.  [...]