• Santé - Utilisation, Enzymes, Restriction

[Biochimie] Petite interrogation sur les enzymes de restrictions

Note. les enzymes de restriction sont excessivement nombreuses et, bien que je ne connaisse par leur utilisation lors d'une PCR (plutôt sur les étapes amont/aval, non ), je ne pense pas qu'on en utilise 36 pour une même manip.  [...] Excuse moi si je n'est pas utilisé le bon terme, j'ai écris ce message un peu rapidement, c'est vrai que c'est LA PCR et, vous avez raison, il n'y a pas d'enzyme de restriction mais ce sont les enzymes polymérase dont je parlais (ou TAQ polymérase). Voilà après cette correction pouvez vous répondre à ma question précedemment posé.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage Gateway...intérêt ?

- un premier intérêt est celui que tu dis. tu n'utilises pas d'enzymes, pas besoin de choisir 2 enzymes différentes, de déphosphoryler le plasmide, phosphoryler les primers...ect... une simple PCR suffit pour l'obtention de ton gène avec les séquences nécessaires à l'introduction dans le plasmide.  [...] ça revient au même qu'avec les enzymes pour l'insertion dans ton second vecteur sauf que là encore, tu n'a pas besoin de rédigérer ton fragment à partir de ton premier plasmide pour le mettre dans un plasmide d'expression. Ici, avec le système gateway, ton plasmide d'entré va directement servir à la recombinaison avec ton second plasmide.  [...]

enzymes de restriction

quelles sont les differentes utilisations pratiques en medecine ou en science par exemple des enzymes de restriction et quelles sont les methodes qui se fondent sur ces derniers.  [...] toute la génétique moléculaire moderne à partir du milieu des années 70 est basée sur l'utilisation des enzymes de restriction (vrai nom = restriction endonuclease),  [...]

[Génétique] protocole experimental?

3) cultiver en milieu.mutagene.de.sorte.que les. Alleles ou se situent les genes les plus importants soient alteres durablement (cassage de plusieurs codons par l utilisation peut etre d enzymes de restriction appropriees).autremment dit on rendraient les alleles sur ces eucariotes diploides recessifs.  [...] la transcriptase inverse - qui permet au VIH de se répliquer - est une enzyme ne possédant pas de mécanisme de détection des erreurs de transcription. Les erreurs sont donc fréquentes et ont été estimées à une tous les 1 700 à 10 000 nucléotides produits. Comme le génome du VIH est composé d'un peu moins de 10 000 nucléotides, il y a approximativement entre une et 10 mutations à chaque cycle viral.  [...]

[Biochimie] Preparation et analyse de plasmides

Apres on a utiliser les des enzymes de restriction HINd3 et ECOR1, si j'ai bien compris ces enzymes vont decouper l'ADN plasmidique en plusieurs parties, je me trompe.  [...] est ce que les enzymes de restriction vont decouper les plasmides de HRPN, PGAG, etc... de la meme facon Mais je ne pense pas en fait avec ce que vous m'avez expliqué avant, ca depend de la carte de restriction.Elles sont trouvables sur internet ces fameuses cartes Il parait qu'on connait parfaitement E.coli aujourd'hui.  [...]

[Génétique] Clonage animal (question)

utilise-t-on des enzymes de restriction ou des plasmides pour cloner un animal ou encore pour faire du clonage thérapeutique.  [...] Pour moi, à partir du moment où on parle de clonage (tout court) il n'y a pas d'utilisation d'enzyme de restriction. la technique de clonage, qu'il soit reproductif ou thérapeutique, est de transférer directement un noyau d'une cellule quelconque dans un ovule.  [...]

[Biochimie] Enzymes de restriction pour détecter les mutations

Dans la correction seule l'enzyme 4 (CTAG) est valable.. comment ca se fait... normalement l'enz 1, 3, 4 et 5 peuvent etre utilisé (selon moi ) etant donné qu'on a GAG ou TAG dans la sequence de l'enzyme.  [...] Il faut retrouver, par exemple pour l'enzyme 1, la séquence ACTAGT en entier dans le gène (normal ou muté), or ici elle n'y est pas.  [...]

[Biotechnologie] Construction plasmidique

Premièrement je digère un fragment d'ADN génomique avec les enzymes de restriction afin de récupérer le gène à intégrer.  [...] Tu récupère ton gène à intégrer dans ton plasmide en l'amplifiant par PCR, c'est ensuite que tu digére t'es amplifiants en utilisant les mêmes enzymes de restriction que tu utilise pour digérer ton plasmide.  [...]

Enzymes de restriction

bonjour. nous faisons un tpe et nous aurions besoin de savoir ou nous pourrions trouver des enzymes de restriction pas cher de préférence. site internet ou catalogue.  [...] ça grâce à l'activité des enzymes de modifications qui fait la méthylation au nivaux de ces sites de restriction c'est une mécanisme de protection contre l'autorestriction qu'il possèdent les microorganismes.  [...]

mode action enzymes de restriction dans une cellule

Bonjour à tous, mon prof a dit en cours que certains polymorphisme se situaient dans des endroits où les enzymes de restriction coupaient. mais dans une cellule, quel est l'intêret du mode d'action d'une enzyme de restriction.  [...] c'est un moyen de défense pour les bactéries. les enzymes de restriction permettent de dégrader de l'ADN étranger. par exemple, on peut supposer qu'E.coli n'a pas de séquence cible à EcoRI dans son génome (EcoRI est une enzyme provenant d'E coli).  [...]