• Santé - Train, Marquage, Couleurs, Observation

[Divers] Niveau thèse: choisir ses Ac pour marquage 4 couleurs au confocal

je suis en thèse d'immuno et en train de mettre au point un marquage 4 couleurs sur coupes congelées murines pour observation au confocal. Je maitrise la technique du marquage... J'aurais besoin d'un coup de main pour savoir comment choisir mes fluorochromes et mes anticorps, mais pas en terme de spectres d'excitation et d'émission.  [...] 4 couleurs en marquage indirect ca va vraiment être chiant (je me demande même si c'est possible). Vous n'avez pas vraiment le choix, c'est marquage direct avec les problèmes que vous avez cités.  [...]

[Biologie Cellulaire] Déterminer la colocalisation (IF)

J'ai fais un double marquage immunofluorescent mais en traitant mes images j'ai du mal à trancher quant à la colocalisation. En fait, quand j'attribue les couleurs vert pour fitc et rouge pour cy5, je trouve que ce n'est plutôt pas co-localisé mais lorsque j'inverse les couleurs c'est colocalisé (couleur orange).  [...] Oui c'est de la microscopie confocale. Comme j'utilise des fausses couleurs, selon si j'attribue la couleur verte au fitc et rouge au cy5 ou l'inverse rouge au fitc vert au cy5, je perçois une co-localisation ou pas.  [...]

apoptose

bjr,vous savez quoi je ss come vous càd 3eme année génie biologie et j'ai jamais entendu parler exposé d'apoptose bon moi je fais un expo sur le clonage ca c en BMGG si vous connaissez ce module,j'aimerai bien en savoir plus avec vous donc je vais suivre les réponses envoyées peut etre que ca va me servir plutard.   [...] salut, mon exposé est aussi en BMGG, pour nous le clonage est programmé comme cours, je pense que chaque université suit un programme particulier. j'espere que cette discussion va te servir.   [...]

[Divers] Quels tests statistiques pour ce jeu de données?

Par exemple, si je je veux tester le gène 2 (dans le tableau cidessous), est-ce que je dois moyenner ses valeurs dans les 3 conditions les comparer ou les laisser telles quelles sinon, quels sont les cellules à sélectionner comme plage d'entrée dans excel pour effectuer proprement et correctement un test d'ANOVA ou Student pour ce gène En fait, j'ai essayé dans excel, mais je ne suis pas sûr d'avoir fait la bonne manip.   [...] - Par ailleurs, j'ai lu qu'il faudrait transformer les valeurs en log2 (c'était surtout pour les puces où on utilise 2 couleurs, Cy3 et Cy5 pour le marquage, ce qui n'est pas le cas ici), alors pourquoi la transformation en log et est-ce que cette transformation indispensable, sachant que j'ai un seul type de marquage (donc pas de Cy3 et Cy5 à la fois).  [...]

[Biologie Cellulaire] Immunofluoresence

Et si les cellules sont en train d'endocyter le AAV via les puits de clathrine, ils devraient y avoir une colocalisation du marquage vert (AAV) et rouge (clathrine) au niveau sous membranaire voire membranaire.  [...] En effet la visualisation se fait avec un microscope à fluorescence. Généralement il s'agit d'un microscope confocale. Tu peux trouver cette information dans le matériel et méthode de l'article. Je pense que dans le cadre de l'expérience que tu as décrite, le confocale est particulièrement adapté car il permet de générer des images de tranches de la cellule (comme si l'on rentre à l'intérieur de la cellule).   [...]

Chroms propose une véritable visite virtuelle en haute résolution du cerveau

Vue d'un détail d'un volume de 4.8 mm3 de cortex de souris dans lequel les astrocytes sont marqués avec des protéines fluorescentes de couleurs différentes. Lamiae Abdeladim, LOB, École Polytechnique, CNRS, Inserm. marquage transgénique. Solène Clavreul, Institut de la Vision, Sorbonne Université, Inserm, CNRS.  [...] (C) Reconstruction 3D et vue à différentes échelles d'un volume de 4.8 mm3 de cortex de souris dans lequel les astrocytes sont marqués avec des protéines fluorescentes de couleurs différentes. (D) Vue 3D de neurones marqués en couleur dans le cortex de souris. Abdeladim et al, Nat Commun 2019.  [...]

Anticorps qui marque les S3T3 irradiés ?

Présentement, je suis en train d'étudier l'effet de quelques produits sur le cycle cellulaire des kératinocytes cultivés sur une couche nourricière de S3T3 irradiés. Je fais un marquage à l'iodure de propidium, mais je constate que j'ai des cellules multi nucléés qui font un bruit.  [...] J'aimerais trouver un anticorps spécifique qui puisse marquer les S3T3 irradiés, mais pas les kératinocytes humains. Est- ce que vous pourrez m'aider S.V.P.  [...]

Les nanocristaux appliqués à l'étude du vivant

Les développements récents de la biologie impliquent l'observation des protéines en temps réel dans les cellules vivantes. Le suivi des protéines est rendu possible suite à leur marquage par un composé fluorescent. Le challenge réside dans le développement de composés qui soient non toxiques et suffisamment fluorescents pour permettre des observations dans de bonnes conditions.  [...] D'autre part, ces particules n'émettent pas de lumière ce qui fait que leur observation est basée sur leur pouvoir de dispersion de la lumière. Des fluorophores de petites tailles (1 à 4 nm) sont aussi utilisés, mais leur grande photosensibilité ne permet que des analyses de courte durée (de l'ordre de quelques secondes).  [...]

Un bras qui sécrète de l'insuline !

L'image de gauche correspond à la photographie du bras gauche de la patiente. L'image de droite correspond à l'observation des deux bras (R = bras droit. L = bras gauche) de la patiente par scintigraphie. La flèche indique la position du marquage et donc des cellules &beta.  [...] En plus de cette réussite, les chercheurs ont pu mettre au point une méthode de détection des cellules &beta. de sécrétion de l'insuline par une méthode non invasive. Ils ont utilisé un marqueur du récepteur du Glucagon-like peptide 1 (une protéine très exprimée dans ces cellules) pour révéler spécifiquement les cellules &beta.  [...]

[Biologie Cellulaire] La cellule mystère.... - Page 21

bon... c'est une observation en microscopie confocale par immunofluorescence, en rouge, c'est bien de la tubuline. La légende de la photo ne parle pas de marquage PE mais d'un anticorps dirigé contre la ß-tubuline. Il y a les points verts le long des microtubules.  [...] Je suis quand même dégouté. je mets dans la barre de recherche de google image observation en microscopie confocale par immunofluorescence et je tombe dessus direct, la première, et même en double.  [...]