• Santé - Tissus, Protéines, ARN

[Biologie Moléculaire] Promoteurs altérnatifs

Le prof nous a dit au cours qu'un gène pouvait avoir plusieurs promoteurs et donc plusieurs départ de transcription possibles. Du coup pour un gène donné nous obtiendrons plusieurs ARN messager. Ma question est. Est ce que ces ARNm coderont pour la même protéine ou on obtiendra différentes protéines.  [...] Ca peut-être la même protéine mais avec des petities subtilités. Par exemple selon l'épissage de l'ARN mess tu peux avoir des protéines qui n'auront pas le même tissus cible ( foie, rein, poumon,...). L'épissage alternatif peut jouer sur les fonctions des protéines.  [...]

[Biologie Cellulaire] Endoduplication

je viens de lire que la quantité d'ADN peut varier dans une même plante, selon les différents organes, tissus...cela par des mécanismes d'endoduplication. J'aimerais savoir pourquoi les cellules nécessiteraient d'endodupliquer leur génome est-ce possible que cela soit une nécessité d'avoir plus d'ARN, plus de certaines protéines.  [...] Mais la tendance actuelle est plutôt de parler de réplication de l'ADN et de duplication de gène, les deux ayant des mécanismes bien différents.   [...]

[Biologie Moléculaire] Conservation de tissus à -80°C

Avez-vous une idée de la stabilité des ARNs (et des protéines même si je me fais moins de souci pour elles) dans des tissus non fixés, stockés à -80°C.  [...] Dans les fait j'ai prélevé des tissus il y a 4 mois en vue d'une extraction simultanée protéines/ARN. J'ai eu à bosser sur autre chose entre temps et je commence à m'inquiéter un peu quand à l'intégrité de mes ARNs.  [...]

[Divers] fixation de coupe de tissu sur lame de verre pour un microdissecteur laser

j'utilise un microdissecteur laser. Cet appareil permet de récupérer spécifiquement les cellules qui nous interessent sur des coupes de tissus. Je travaille sur des coupes de tissus provenant du colorectal. Mon problème est que je n'arrive pas à décoller les cellules car elles sont trop fixées à la lame de verre.  [...] je veux récupérer la totalité du contenu intracellulaire, ADN,ARN protéines. Les tissus proviennent d'une tumorothèque. je prends mes tumeurs du colon ensuite je fais des coupe de 10µm d'épaisseur et je les mets sur une lame de verre. Mon problème est la. Je veux que ma coupe de tissu du colon se fixe sur la lame de verre mais pas très fort car sinon au microdissecteur laser les cellules ne peuvent pas se coller au film.  [...]

[Génétique] meilleur conservateur d'ADN

Je dois conserver des tissus de différentes espèces d'octopodes afin de faire des analyses d'ADN ultérieurement. Et j'aimerais savoir quel est le meilleur conservateur tissulaire afin que l ADN que je veut prélever plus tard ne soit pas abîmé. (Ex alcool, paraffine, -80ºC).  [...] (j 'utilise actuellement des tissus ages de 1 an pour faire des analyses d'ARN, ADN, proteines... et apres confirmation de la qualite, rien n'a bouge...).  [...]

[Biologie Moléculaire] Gène polycistronique??

L'epissage différentiel se situe lui au niveau du pré-ARNm, donc, en amont de la traduction ou différentes combinaison d'exon/introns peuvent exister, générant alors à partir d'une seul pré-ARNm plusieurs protéines différentes. Uniquement chez les eucaryotes.  [...] Chez les eucaryotes, le processus d'épissages différentiels permet la synthèse à partir d'un pré-ARNm (monocistronique. une protéine) de plusieurs protéines par excition d'un exon ou d'un autre et cela de façon tissus spécifiques.  [...]

[Biologie Moléculaire] Q-CPCR encore !

Et c'est là que ca me pose problème. SI tu prends un gène qui est est autant exprimé dans 500 ng d'ARN dans deux tissus différents (avec les répétitions qui vont avec..), tu dis que c'est un gène de référence, mais si tu ramènes ca à la quantité d'ARN total celui n'est plus un gène de référence bien qu'on soit à la meme quantité de matière.  [...] Mais, si tu t'intéresses au niveau d'ARN dans une cellule donnée, tu vas exprimer le niveau de transcription de ton gène par rapport à R. Comme tu ne connais pas R, tu vas utiliser un multiple de R (le même pour les 2 tissus pour que cela soit comparable), par exemple la quantité d'ARN que tu as utilisé pour faire ta RT.  [...]

[Biochimie] Aggrégation des échantillons de SDS-PAGE

Je souhaite mettre en évidence la présence de protéines dans des échantillons de récifs carbonatées. Ce sont des protéines de biominéralisation (processus par lequel les organismes vivants produisent des minéraux pour renforcer leur tissus, ex. coquille). J'ai entre autre réalisé un test BCA qui m'a prouvé la présence de ces protéines (en faible quantité mais présentes).  [...] Je souhaite mettre en évidence la présence de protéines dans des échantillons de récifs carbonatées. Ce sont des protéines de biominéralisation (processus par lequel les organismes vivants produisent des minéraux pour renforcer leur tissus, ex. coquille).  [...]

[Biologie Moléculaire] Epissage alternatif

il me semble que l'épissage est désigné comme alternatif puisqu'il peut différer selon les tissus. selon les tissus, sur un même preARNm, les sites donneurs et accepteurs seront plus ou moins forts et tu n'auras pas les mêmes exons mis bout à bout dans les diffézrents tissus où le gène est exprimé, donc à partir d'un preARNm issu d'un même gène, tu aboutit à plusieurs ARNm matures qui vont donner des proteines différentes.  [...] Bakish, j'avoue que tu es la première à parler d'épissage différent selon les tissus. Je n'avais pas encore vu ça en bouquinant ni par mon professeur - cependant je ne veux pas dire que tu as tord.. - au contraire, ce serait même un bonus appréciable de connaissances.  [...]

Rôle de l'EDTA dans dans l'isolement de l'ADN

De l'EDTA dans une solution de solubilisation cellulaire va permettre, en chélatant les cations bivalents (Mg2+. Ca2+), de rompre les jonctions entre les cellules à dissocier d'un tissus (ici les tissus du thymus). En éffet, Les protéines permettant la jonction cellulaire (ex.  [...] cadhérines) fonctionnent en présente de ces cations. Le faite de les chélater (les cations) entraîne donc une inefficience des protéines de jonctions, et donc une séparation des cellules d'un tissus.  [...]