• Santé - Température, Séquence, ADN

[Biologie Moléculaire] Beaucoup de question

PCR-SSO (Sequence Specific Ologonucleotide).en gros, tu identifies ton fragment amplifié à l'aide d'une sonde marquée spécifique d'un allèle donné. Ca m'a pris même pas 2 min pour trouver une explication sous google.  [...] Tm. Température de fusion (melting en anglais). C'est la température à laquelle une séquence d'ADN est à 50% double brin, 50% simple brin (les brins ne sont plus appariés). De quoi ca dépend Sachant que l'ADN est double brin a cause d'interaction entre les bases (liaisons H), a ton avis.  [...]

[Biologie Cellulaire] Le Génie génétique

Il faut connaître la séquence d'ADN que l'on cherche à localiser, car on utilise des oligonucléotides complémentaires de cette séquence.  [...] On mélange ensuite l'ADN à examiner et la séquence d'oligonucléotides pour que les séquences complémentaires s'hybrident (il faut le faire à une température moins importante), puis on effectue un lavage.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage par PCR taille des amorces

En général les oligos font 20-30pb et on essaye d'avoir un ratio équilibré entre les G+C et les A+T (dans ces conditions, une PCR aux température d'hybdridation classiques 51-58°C doit fonctionner). La restriction coupe ton ADN proprement, pas besoin d'ajouter des bases pour protéger ta séquence codante.  [...] Ce que je fait en général, c'est de cloner la séquence amplifié avec la présence des sites de restriction dans un vecteur de clonage pour fragment PCR. Ceci permet d'avoir des morceau d'ADN de part et d'autre des sites de restriction. Je clone ensuite le fragment dans mon vecteur d'expression.  [...]

amplification de l'ADN

Il est stipule que l'ADN-polymerase a besoin d'amorces en bout de sequence pour pouvoir la dupliquer. Cette amorce doit correspondre exactement avec le debut (ou fin) du brin d'ADN que l'on veut dupliquer.  [...] Il me semble que dans certaines conditions (Température, pH, enzymes...), les nucléotides se lient spontanément entre eux. Donc il est possible de fabriquer de courtes chaines d'ADN sans matrice de référence. Pour obtenir l'alignement souhaité on fait défiler dans la solution la séquence que l'on souhaite.  [...]

Dénaturation de l'ADN

Ben mis a part le fait que le code n'existe plus du fait de l'inexistence de l'une des proprietes de l'ADN (double helice), oui, c'est tout. Ca veut aussi dire que dans des milieux dont la temperature est trop eleve l'Adn ne peut exister. C'est tout.  [...] Les histones sont liés a l'adn il me semble par des liaisons ioniques et hydrogene, mais elle sont nombreuses (les liasons) donc les interactions diminueront mais il faudra un temperature importante pour les disociés totalement. (je ne suis plus tout a fait sur de la facon dont les histones se lient à l'adn donc j'ai peut etre faux sur ce dernier point).  [...]

le régime alimentaire des insectes et leur biochimie

par exemple lorsque vous avez le codon d'un acide aminé A qui se répète souvent dans leur génome il est fort probable qu'ils disposent des enzymes nécessaires à sa fabrication, par contre il est moins probable qu'ils possèdent le gène d'une enzyme qui fabrique un acide aminé dont ils ont besoin en faible quantité.   [...] ..c'est leur épigénétique qui détermine quel gène s'exprime et quel gène se tait...c'est pas une réponse à ma question, ça car ce que je veux savoir c'est qu'est ce qui contrôle l'acétylation et la méthylation des séquences ADN chez les insectes je sais que c'est l'environnement et ces changements mais comment exactement par exemple le froid provoque l'hibernation chez beaucoup d'animaux dont les insectes, sur quoi la faible température agit existe t il des structures qui font office de thermostat qui lorsque la température est trop basse sécrètes les hormones nécessaires à l'entrée en hibernation, et ces hormones une fois ils arrivent à toutes les cellules de l'insecte provoquent la chute aux niveau d'activité minimale ou chaque cellule a son thermomètre et a une matière protéique au sein de chaque noyau qui est influencée par la température.  [...]

[Biochimie] Conservation ADN à température ambiante

Sachant qu'il ne fait pas très chaud ces derniers jours, je voulais savoir s'il était possible que mon ADN ne soit pas complètement foutu.  [...] Si la PCR n'est pas trop grande (disons. 1-1.5Kb) oui, cela est tout à fait envisageable. Au delà il y a peut être un risque que les coupures soient trop nombreuses. Cela dit je le tenterais quand même (mettons jusqu'a 2kb.   [...]

[Biochimie] spectre d'absorption et ADN

je sais que la présence des bases azotées dans l'ADN fait qu'il absorbe les rayonnements UV et donc pic d'absorption vers 260 nm.  [...] Du coup si on prend par exemple un pic de 1 pour l'ADN, l'ARN devrait être à 0.5, mais avec l'effet hyperchrome, une partie se retrouve avec +40% donc 0.7. Or tu as 30% de ton ARN enroulé donc à 0.5 et 70% simple brin donc à 0.7. Ce qui donne au final. DO du pic ARN= (30%*0.5)+(70%*0.7)= 0.64.  [...]

adn des jumeaux est il l mem?

Les séquences de leur ADN sont identiques. De manière imagée on peut voir l'information génétique comme une partition de musique et bien une même partition de musique peut s'interpréter différemment. En effet un même génome peut produire plusieurs corps (phénotypes) selon les conditions environnementales (différences de température, exposition à des rayonnements, à certaines molécules etc..). On parle de plasticité phénotypique.  [...] - Modification de la structure de l'ADN (pas des séquences) par un marquage biochimique du génome (ajout de groupements méthyles, acétyles etc...) ce qui va influencer l'expression des gènes.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR en temps réel

C'est le coté quantitatif. Autre avantage, ce signal est réversible. en chauffant, on dénature l'ADN double brin et le signal s'effondre. Par ce moyen, on peut connaitre la température de fusion des produits amplifiés.  [...] Commençons par cela. l'image du milieu présente justement l'abondance relative de l'ADN en fonction de la température de fusion. Elle a été obtenue à la FIN du run, une fois que l'amplification est terminée, lorsque l'appareil effectue une rampe de température tout en mesurant le signal.  [...]