• Santé - Température, Séparation, Résolution

maîtrise de la température d'HPLC

Si tu n'as pas de four il faut que tu travailles dans une pièce climatisée ou, au pire, dans une pièce peu soumise aux variations de température, mais il va falloir adapter les conditions de séparation.  [...] Jouer sur la température pour une séparation en HPLC permet uniquement d'augmenter la résolution (et donc la sensibilité en FID) pour certaine matrice et ce gain de résolution est molécule dépendant.  [...]

[Biochimie] Questions sur l'HPLC

Bonjour à tous, j'ai quelques questions sur l'HPLC. Je dois faire une courte présentation sur l'optimisation d'une séparation par HPLC. Je vais donc traiter.la colonne.  [...] Pour ce qui est de la température j'ai dis que si on augmentait la température on obtenait une hauteur des pics plus élevées, une meilleurs résolution, et un temps de rétention plus court.  [...]

[Biochimie] differencier deux gel d'agarose de concentration différente

l'utilisation de gel d'agarose à forte concentration (3 à 4%) est nécessaire pour des fragments inférieurs à 150 pb, car elle permet une meilleure séparation et résolution des différentes bandes en fonction de leur différence de taille.  [...] Concernant la fin du message, utiliser une concentration forte permet de mieux retenir les petits fragments, c'est donc indiqué lorsq'on a des fragments de taille inférieure à 150 pb. On perdra alors les plus gros, qui migreront très peu (voire pas du tout) et ne seront pas séparés.   [...]

[Biochimie] séparation de protéines

La qualité des gels est pas top, en effet les bandes sont assez épaisses et étalées. Je pense que ça vient d'une forte concentration ou pas... comment affiner la résolution ou encore le pouvoir de séparation.  [...] quel agent utiliser (autre que le béta-mercapto) pour être sur d'avoir une structure linéaire et qu'il n'y est aucun problème polymérisation des protéine lors de la migration.   [...]

[Biologie Moléculaire] Page sds

Voilà je voudrais savoir quel est le voltage adéquat pour séparer de protéines de 280 et 290 kDa, sachant que jusqu'à maintenant je n'ai pas pu le faire en utilisant des gel de 4-12% et 3-8% à 200V. Je sais qu'avec un SDS-PAGE la charge des protéines n'a pas de roles sur mobilité mais le voltage peut-il jouer un rôle sur la résolution de la séparation.  [...] plus le voltage est élevé, la séparation des bandes est rapide mais lors de la révélation la séparation des bandes sera moins nette. Pour certains protocoles nous réalisons des migration à faible voltage durant plusieurs heures.  [...]

Mesurer la température d'un milieu aquatique

Une résolution de 0,2°C me suffit bien, j'aimerais en revanche la plus grande précision possible. La plage de température à mesurer est très faible et usuelle, disons de 0 à 40 grand max.  [...] Ceux-ci semblent très rares. De plus quelqu'un a attiré mon attention sur une question. étant complètement immergés, ces thermomètres ne donnent ils pas une valeur moyenne de la température tout le long de l'outil plutôt que la température au point bas.  [...]

Microscope et télescope : des instruments pour voir plus gros et plus loin | Dossier

Le pouvoir de résolution (ou pouvoir séparateur) mesure la distance transversale minimale entre deux points dont les taches de diffraction peuvent être séparées. Or, on sait que les lentilles de verre ne sont pas exemptes de défauts. Elles souffrent en particulier de chromatisme, c'est-à-dire qu'elles focalisent mieux les radiations de plus courte longueur d'onde, ce qui entraîne des effets d' irisation lors de l'utilisation de la lumière blanche.  [...] Le dernier paramètre est son pouvoir de résolution ou résolution angulaire, c'est-à-dire la taille angulaire du plus petit objet mesurable. Par exemple, si deux points distants d'une seconde de degré sont les points les plus proches vus par la lunette ou le télescope comme deux points distincts dans le plan focal, alors le pouvoir de séparation de l'instrument est d'une seconde de degré.  [...]

Purification Séphacryl S-400

Sephacryl S-400 High Resolution to separate polysaccharides, macromolecules with extended structures and even small particles such as plasmids. (fractionation range globular proteins 2 × 104–8 × 106).  [...] J'aurais voulu savoir si le séphacryl S-400 permettait d'éliminer efficacement la Taq pol, car actuellement je voudrais faire du clonage par restriction/ligation. Je sais que la taq pol peut être gênante après digestion des fragments PCR par des enzymes de restriction, puisque les résidus de Taq pol viendraient potentiellement compléter les extrémités collantes.   [...]

[Biologie Moléculaire] Combien d'enzymes différentes dans le vivant ?

Avant la Grande Oxydation et dans les conditions de température (sans doute plus élevée qu'aujourd'hui) et de pH (acide ) de l'époque, on peut par exemple imaginer qu'il y a eu des enzymes à aluminium alors qu'à ma connaissance aucune n'est connue à l'heure actuelle.  [...] J'observe également que la description d'une protéine ne peut pas rentrer dans les bases de données si la résolution structurelle (structure secondaire) est supérieure à 4 angströms. Je pense notamment à la base de données UniProt. Je ne sais pas la part des labos qui possède l'instrumentation nécessaire (diffraction X, RMN, etc...) pour passer cette limite de 4 angströms.  [...]

Définition | Microscope de super-résolution - Nanoscope | Futura Santé

Les microscopes de super-résolution ou nanoscopes permettent de visualiser des objets à une résolution sous le micromètre, passant alors à l'échelle nanométrique. Pourtant, ces microscopes utilisent toujours un faisceau de lumière, dont la diffraction empêche une résolution inférieure à 0,2 micromètre.  [...] Ces microscopes de super-résolution sont optimisés pour l'observation très précise de structures subcellulaires. Les tissus vivants fluorescents peuvent être observés, en particulier ceux dont certaines protéines ont été rendues fluorescentes par fusions avec la GFP ou la RFP ou par immunomarquage.  [...]