• Santé - Témoin, Positif, Réponse, échantillon

[Immunologie] TP BH : Diagnostic de la leucose bovine enzootique (LBE) - Méthode d'ouchterlony

Ton sérum positif te permet à la fois de voir quelle est la nature de l'agglutination, et également de t'assurer que ton extrait d'anticorps fonctionne (par exemple, éviter de passer à côté d'une dénaturation de l'anticorps qui donnerait un risque de faux négatif).  [...] un témoin positif te permet de savoir qu'une réponse négative est due à ton échantillon testé.  [...]

[Biologie Moléculaire] probléme de migration d'ADN sur gel d'agarose

A son issue, on regarde les résultats sur gel d'agarose(+Bromure d'éthidium).Le témoin négatif(2microlitres d'eau à la place de l'ADN) est bien négatif, le témoin positif(ADN de feuille de tomate dont on est sur qu'il s'hybride) est bien positif.Le problème survient sur notre échantillon.  [...] Essaie aussi de diminuer la quantité d'ADN de ton échantillon Vous l'avez dosé pour vérifier que vous être dans le même ordre de grandeur que le témoin positif.  [...]

[Identification] Témoins positifs-négatifs

Un témoin négatif te permet de prouver qu'une réaction positive est due à ton échantillon et pas à une contamination de tes réactifs. Pour cela tu ne mets pas d'échantillon, et tu fais la réaction normalement.  [...] Un témoin positif te permet de prouver qu'une réaction négative est due à ton échantillon et pas à un problème de ton mix. Pour cela on met un échantillon dont on est sur qu'il doit entrainer la réaction attendue.  [...]

[Biologie Moléculaire] question sur la QPCR

Pour l'eau... ça dépend. Personnellement on m'a toujours appris qu'un Ct supérieur à 30 pouvait être considéré nul et dans mes manips c'est le cas. Si tu as un témoin positif (tu peux considérer ton échantillon de gamme étalon non diluée comme tel) qui sort à 20 et ton témoin négatif sort à 30, ça fait quand même une grosse différence, 2^10.  [...] Ben parce que seules les bactéries (enfin bon, sujet à polémique, c'est pas totalement vrai mais bon) ont des séquences 16S. Donc si y a une amplification (et que l'amplicon est de la bonne taille), c'est donc qu'il y a au moins une espèce bactérienne dans votre échantillon.  [...]

[Divers] Différence Blanc/Témoin/Contrôle

Un témoin négatif consiste en un blanc auquel on ajoute un échantillon dont on est sur qu'il ne doit pas induire de réponse positive. Si il y a quand même réponse, c'est donc que la réponse n'est pas spécifique.  [...] Ce que tu définis est typiquement un témoin négatif, il faut qu'il reste négatif sinon la réponse est due à autre chose qu'à l'échantillon.  [...]

[Biologie Moléculaire] contrôle interne en RTqPCR

Je dois rendre un rapport concernant une étude portant sur la détection du virus de la FCO (en médecine vétérinaire). Pour cela, on utilise deux RT-q-PCR en parallèle, chacune spécifique d'un segment d'ARN (le virus est un virus à ARN). Mais on utilise également une RTqPCR pour la détection de la béta actine en tant que contrôle interne, et ceci dans des échantillons négatifs ou positifs pour le virus.  [...] Pour ces raisons (et quelques autres), on utilise un témoin interne, c'est à dire on amplifie un ARN qui se trouve normalement à concentration constante dans notre échantillon (du moins tout le temps exprimé à un niveau détectable). Ca en fait ainsi un témoin positif à l'intérieur même du puits.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème PCR : Besoin d'aide

quand j'utilise l'ARN synthétique que l'on ma fourni comme Témoin Positif, j'ai une bande, mais quand j'utilise mes échantillons de terrains, je n'ia pas de bande... mais je ne l'ai encore fait que sur un seul échantillon... je vais réessayer. merci beaucoup en tout cas.  [...] 2) Faire une PCR sur plusieurs fois le même échantillon mais avec un gradien de température au niveau de la t° d'hybridation de façon à peut être optimiser celle ci (c'est en effet l'étape là plus critique de la PCR).  [...]

Problème de PCRs

Peut être certaine personne ont rencontré le même problème que moi et pourront m'aider. Je travaille sur de l'ADN environnemental extrait avec le kit DNA plant mini kit de Qiagen. Sur cet ADN je voudrais amplifider le 16s/18s et ITS. Pour le 16s j'ai utilisé les amorces 16s8f (5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3') et 16s1541r (5'-AAGGAGGTGATCCAGCCGCA*-3') et pour ITS.   [...] Au niveau de concentrations de produits et du thermostat je pense qu'il n'y a pas de problèmes. Le problème que je rencontre est que mes PCRs marche une fois sur deux sans que je sache pourquoi. Mon témoin positif également ne marche pas donc ce ne viendrait pas d'inhibiteur dans mon échantillon.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de migration électrophorèse (produits bloqués dans les puits)

Notre dernière hypothèse concerne le thermocycleur qui pourrait avoir une défaillance. En effet, en utilisant exactement le même cycle, les mêmes composants pour le mix PCR (sauf bien sûr les échantillons) j'arrive à deux PCR faites en 24h de délai, et une PCR a marché et l'autre non.  [...] .. De plus, en utilisant le même témoin positif (même tube) sur les deux PCR, dans un cas il y a un signal sur le gel, dans l'autre cas non... Enfin, cela ne vient pas du gel, ni du tampon, ni du loading dye vu que sur ma dernière PCR, le ladder a correctement migré tout comme un échantillon issu d'une PCR précédente ayant marché.  [...]

induction IPTG

Echantillon purifié. témoin positif de production protéique (permettant de confirmer qu'on détecte la protéine d'intérêt et pouvoir la localiser sur le gel).  [...] Pour la technique de purification de ta protéine, avec si peu d'informations, on ne peut pas te répondre. D'autant plus si l'échantillon utilisé est de la protéine recombinante commerciale.  [...]