• Santé - Témoin, Positif, Manipulation

[Microbiologie] Validation de méthode de dénombrements

C'est une expérimentation où on s'attend à un résultat négatif - par exemple pour déduire l'absorption du milieu d'une mesure optique, ou vérifier le comportement standard d'un sujet en dehors des facteurs expérimentés, ou une non contamination lors des manipulations, etc.  [...] Un témoin positif vérifie que pour une manipulation donnée, on a un changement. Donc que la manipulation s'est déroulée correctement.  [...]

[Immunologie] test elisa

La maîtrise du bruit de fond, de la quantité d'antigène à doser (pour éviter l'effet crochet), l'absence d'Ac hétérophiles de souris (ou alors l'utilisation de réactifs adaptés).   [...] - La manipulation de ce test doit être effectuée dans la plus grande précaution notamment pour le témoin positif.  [...]

[Microbiologie] Viabilité d'une bactérie et ARN - Page 2

je pars d'un échantillon de tissu (des fragments d'intestins d'insecte) minuscule (moins que 100 mg) et pas vraiment propre (débrits cellulaires, sang, protéines,...). à la fin de la manip, j'ai trop peu (ou pas) de produit visible au fond du tube (après la dernière centrifugation du protocole, on a théoriquement un culot d'ARN qu'on redissout dans de l'eau), les concentrations lues par le spectro sont, pour la plupart, faibles et les bandes observées sur les gels de cheking à peine visibles.   [...] je dois préciser que je me soucie de la qualité des ARN car je vais les utiliser pour une real time RT-PCR. mais d'abord, je dois réussir des essais de RT-PCR (en deux étapes) avant de m'aventurer avec la real time. et comme ça se voit, je n'ai pas encore de garantie pour la pureté de l'ARN ni sur sa qualité (puisque j'ai pas eu d'ADNc avec l'amorce oligodT, je pense pas que ce soit une faute de manipulation ou dans le protocole car les témoins positif et négatif ont donné le résultat attendu).  [...]

[Biochimie] TP: Cellules chlorophyliennes

Le tout à des concentrations connues, sauf pour les sources atmosphériques évidemment, on peut créer plusieurs milieux avec à chaque fois une source carbonée minérale différente + un témoin glucose - deux utilités.  [...] Parce que si même ce témoin échoue, on peut toujours exploiter les résultats. identifier un problème de température de culture, présence d'un contaminant discret (moisissures, bactéries éventuellement à pigment...), défaut de manipulation.  [...]

Symptômes VIH

je viens de faire dépister et malheureusement mon test s'est révélé positif mais je n'ai jamais eu de rapport à risque car je suis avec mon compagon depuis plus de trois ans et lui s'avère négatif.  [...] Comme il a été dit la sensibilité du test ELISA est relativement forte et la réaction enzymatique qui figure un résultat positif peut se déclencher même avec un patient sain pour des raisons diverses ( manipulation etc ).  [...]

Autotest dépistage sida

En plus savez vous interpréter un test de dépistage du VIH. erreur de manipulation, faux positif, fenêtre de séroconversion... et dans l'hypothèse que vous soyez seropositif il vous faudra confirmer ce test.  [...] Il n'est pas toujours évident d'aller dans une structure de soin pour parler de sujet d'ordre personnel comme peu être toutes les questions ayant un possible lien avec son activité sexuel. Mais ce sont ces structures qui sont les mieux dotées pour vous aidez.   [...]

[Biologie Moléculaire] Ratio 260/230

Avez-vous essayé quand même de faire vos manips avec vos ARN Je ne mesure jamais ce ratio et j'arrive cependant à avoir de très beaux résultats avec mes ARN (bactériens certes).   [...] une petite remarque concernant le ratio. il est très important de le calculer pour connaitre le degré de pureté de votre ARN. c'est une sorte de témoin pour votre manipulation.  [...]

PCR sur pseudomonas aeruginosa

- je travaille à partir d'une plaque-mère d'ADN dans laquelle je ne distribue que 100microlitres de dilutions d'ADN. je ne sort donc à chaque fois que cette plaque et mes dilutions et ADN purifiés restent sagement à -20°C et n'en sortent que très rarement (à moins qu'ils s'organisent des petites soirées quand je ne suis pas là.. lol).   [...] J'ai exactement le même problème que toi même sur le même témoin dans les mêmes conditions la PCR marche une fois sur deux. Je soupconne un problème de manipulation ou de Taq. As-tu trouvé d'ou vient le problème.  [...]

lactococcus

La galerie API 50Ch devrait donner des résultat pour les bactéries du genre Lactococcus. Si tu n'obtiens qu'un seul résultat positif après 48h d'incubation à la température optimum de croissance de ta souche, c'est qu'il y a un problème de manipulation.  [...] Pour info la souche type du genre lactococcus (Lactococcus lactis ssp lactis) devrait fermenter au moins les sucres suivants. arbutine, cellobiose, galactose, B-gentobiose, lactose, maltose, ribose, salicine, tréhalose plus d'autre encore.   [...]

[Biotechnologie] L'ADN mystère !!!

après une PCR pr amplifier le gène codant pr l'ARN 16S chez P. fluorescens nous avons eu sur l'électrophorèse une bande de très forte intensité pour le témoin NEGATIF (et seulement pour celui-ci) correspondant à la même taille que l'ADN test. Nous avons de suite pensé à une erreur de manipulation.  [...] Je suppose que les amorces font 20-30 bases chacunes, ce qui exclue la possibilité de dimères de primers. Peut-être l'un des réactif est contaminé et une fois que tu met ta matrice, alors il y a compétition entre la matrice d'intérêt et la matrice contaminante, ça explique peut-être la perte d'efficacité de la PCR dans les pistes d'intérêt par rapport au témoin.  [...]