• Santé - Témoin, Positif, ADN

[Biologie Moléculaire] probléme de migration d'ADN sur gel d'agarose

A son issue, on regarde les résultats sur gel d'agarose(+Bromure d'éthidium).Le témoin négatif(2microlitres d'eau à la place de l'ADN) est bien négatif, le témoin positif(ADN de feuille de tomate dont on est sur qu'il s'hybride) est bien positif.Le problème survient sur notre échantillon.  [...] Essaie aussi de diminuer la quantité d'ADN de ton échantillon Vous l'avez dosé pour vérifier que vous être dans le même ordre de grandeur que le témoin positif.  [...]

[Biologie Moléculaire] Hybridation d'une sonde nucléique plasmidique

Voila j'ai un petit probleme lors d'un TP sur l'hybridation d'une sonde nucléique plasmidique non radioactive sur colonies bactériennes on me demande la nature et le role des dépôts d'ADN génomique et ADN plasmidique.  [...] J'ai répondu que l'ADN plasmidique est le témoin négatif et l'ADN génomique le témoin positif car il contient la séquence cible mais je ne sais pas comment l'expliquer ni comment expliquer leur nature.  [...]

[Biologie Moléculaire] témoin positif pour pcr 16s

[Biologie Moléculaire] témoin positif pour pcr 16s.  [...] J'ai une question concernant le témoin positif utilisé pour électrophorèse des amplifias sur le gel. Je fais des extractions d'ADN génomique du sol et ensuite la PCR 16S. Je ne sais pas avec quel témoin positif je pourrais comparer mes amplifias Est-ce nécessaire dans le cas d'ADN génomique.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR colonie et PCR ADN

Mes oligo sont dans le gène, qui n'est pas censé se trouver dans le génome bactérien. De plus, lors de mes PCR, j'utilise un insert comme témoin positif. La taille de bande correspond.  [...] On pensait que cela pouvait être génomique. Mais nous avons testé 3 inserts différents dans 3 plasmides, les 3 donnent un produit de PCR sur colonie (témoin positif sur insert qui confirme, témoin négatif sans ADN qui confirme). Et les 3 perdent leur insert après Miniprep de la culture liquide.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ARN

Afin de vérifier la présence d'ADN, j'ai fait une PCR avec des primers beta-tubuline. Et là, j'ai eu d'une part des fragments de beta tubuline amplifié dans tous mes échantillons mais d'autre par des fragments bizarres un peu partout sauf dans mon témoin positif.  [...] désolé je repond un peu tard, tu as surement résolu ton probleme. Mais si ce n'est pas le cas, n'hesite pas a poster une photo de ton gel sur le forum, ca sera plus simple pour t'aider.   [...]

[Biologie Moléculaire] problèmes de PCR , à l' aide!!!

10 à 30ng /µL ne se voit pas nécessairement sur gel. En tout cas si la PCR avait fonctionné vous devriez avoir beaucoup plus que ça. Etes vous sur de vos amorces de la composition du mix du programme de la qualité des ADN de départ.  [...] mon extraction a été faite avec instagene matrix, je ne sais pas si vous en avez entendu parler. mon PCR des fois cela marche et des fois non,je veux dire les échantillons, pourtant le témoin positif marche toujours donc je pense que le problème viendrait de mes extraits d'ADN et de leur pureté.  [...]

[Biologie Moléculaire] augmentation du taux d'ARN mais non celui de la protéine

t'as bien compris l'ensemble du pb.j'effectue plusieurs traitements sur mes cellules qui induisent une augmentation du taux d'ARNm d'un gène cible. j'effectue un témoin positif avec 20% SVF (augmentation) et un témoin négatif sans traitement (pas d'augmentation).  [...] ce que je constate c'est une augmentation de ma protéine que dans le témoin positif et non dans les traités. sachant que l'induction de l'ARNm du 20% SVF est moins importante que dans les traitements.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème lors de la transformation avec DH5a E.coli.

J'ajoute toujours un point sans ADN dans ma transfo pour vérifier que rien n'est contaminé par un plasmide ou une bactérie AmpiR. en 25 ans de clonage, ce témoin est sorti positif deux fois. Le risque est faible mais pas nul.  [...] Nous utilisons le SYBRsafe depuis 5 ans (on peut le voir sous un dispositif à lumière bleue qui peut être facilement bricolé, pas besoin d'acheter le transilluminateur hors de prix d'Invitrogen), nous avons mené des clonages en parallele pour comparer BEt vs SYBRsafe et il y a presque deux logs d'écart en efficacité de transfo entre un plasmide religué en présence de BEt et le même en présence de SYBRsafe.  [...]

[Microbiologie] Antibiogramme pour tester l'activité de nouvelles molécules.

Préparer deux tubes stériles de 10 mL à partir du milieu d'incubation pour le témoin positif (= croissance non inhibée) et le témoin négatif (= pas d'ensemencement).  [...] Ensemencer à l'anse (calibrée si on veut être rigoriste à fond de câle) à partir de l'innoculum, le tube témoin positif, puis les dilutions en commençant par la plus grande.  [...]

[Biochimie] Témoin de RT-PCR

Suite à une extraction d'ARN, j'ai fait une PCR,j'ai utilisé de l'ADNc c-fos et ARNr 18s comme témoin positif. (Dans le cadre du controle de c-fos (ARNm)).  [...] 18s peut te servir a normaliser ton expression de c-fos. Il est d'usage, lors de la RT-PCR, de faire un témoin ne contenant pas d'enzyme, et de le passer en PCRq. il permet de s'assurer que l'amplification de PCRq est spécifique de l'ARNm transformé en ADNc et non de l'ADN génomique.  [...]