• Santé - Techniques, Clones, Préparation

[Biologie Moléculaire] criblage des clones

j'aimerais savoir qu'elles sont les avantages et les inconvenients des techniques de criblage de clones positifs par mini-preparation et par pcrET qu'elle est la difference entre les deux.  [...] bonsoir, le criblage par pcr est beaucoup plus rapide en terme de nombre de clones analysé par rapport au mini prep qui sont plus lourdes.  [...]

mini prep ou Qiagen

La kit Qiagen ( QiaPrep ) est plus pratique et plus rapide à utiliser. buffer déjà prêt, colonne adaptées pour isoler les plasmides... Mais la technique de miniprep reste la même sauf que le kit facilite son utilisation.  [...] les miniprep classiques servent à screener les clones obtenu aprés transfo. c'est rapide, efficace et bien moins cher qu'un kit utilisant des colonnes pour purifier le plasmide. La qualité de la préparation est largement suffisante pour faire les restrictions necessaires pour vérifier tes transformants.  [...]

[Biologie Moléculaire] aide sur le séquençage de l'ADN

Tu peux le cloner dans un vecteur à bouts francs tels que le pGemT-Easy puis envoyer à séquencer l'ADN plasmidique de quelques clones recombinants (vérifiés par PCR) accompagné d'une préparation d'un oligo qui s'hybride sur le vecteur. Le tout selon les conditions requises par le prestataire de services.  [...] Pas nécessairement si vous avez déjà un vecteur ayant des sites uniques de restrictions compatibles avec ceux éventuellement présents au bout de vos amorces.   [...]

[Biochimie] OGM, Amflora pomme de terre

Plus sérieusement, c'est une des techniques qui était utilisée au début dans la mutagénèse dirigée par recombinaison homologue. On introduisait un gène de résistance à la néomycine dans la séquence codante pour casser la phase de lecture et permettre un moyen de sélection des clones.  [...] Si aucunes de ces techniques ne semblent appropriées, on essayera de travailler avec des protoplastes pour lesquels les techniques de génétiques courantes fonctionnent plutôt bien.  [...]

[Microbiologie] évaluer la diversité

je suis en train d'analyser un échantillon médical quant a sa composition bactérienne. Donc sur un nombre donné de clones analysés, j'ai tant de clones de différentes espèces. Pour certaines espèces, je ne détecte qu'un clone. Il est donc fort probable qu'il existe des espèces que je ne détecte pas, même si elle sont présentes.  [...] J'ai identifié 21 espèces au total, certaines par les deux techniques, d'autres seulement par culture ou par la méthode moléculaire. Le nombre d'isolats ou de clones pour une espèce varie de 19 à 1 (moyenne=9.4).  [...]

Médecine régénératrice et cellules souches embryonnaires | Dossier

La question de l'incompatibilité immunologique pourrait naturellement être réglée si les cellules souches embryonnaires étaient dérivées d' embryons clonés par transfert du noyau d'une cellule de la personne à traiter dans un ovocyte receveur énuclé(5). Compte tenu des obstacles techniques et des questions éthiques qui persistent quant à la création par clonage d'embryons humains à des fins de thérapie cellulaire, abordées plus loin, on pourrait également envisager de personnaliser des cellules ES humaines en lignée grâce à l'échange de leur noyau contre celui d'une cellule du malade que l'on désire soigner.  [...] Il est aussi concevable de constituer des banques de cellules souches embryonnaires humaines préparées à partir des dizaines de milliers d'embryons surnuméraires, congelés après fécondation in vitro, non utilisés à des fins procréatives et voués à la destruction.   [...]

Star teck, l'attaque des clones

Dans les années 1990, le département Forêts du Cirad a développé des techniques de clonage industrielles de tecks sélectionnés âgés dans le cadre de son partenariat avec la société malaisienne Innoprise Corporation Sdn Bhd (Icsb). Ces travaux ont permis la mise en place des premières plantations clonales sous forme de boutures en tirant profit des travaux de sélection et d'amélioration génétique effectués conjointement.  [...] Cette dernière a notamment produit l'an passé 180 000 miniboutures clonées de tecks, dont 40 000 ont été vendues localement. Mais la nécessité d'enrichir la base génétique locale - seed source Trinidad - reste une priorité. Des contacts ont été pris dans ce sens avec la société malaisienne Icsb qui dispose d'origines génétiques très diversifiées diffusables sous forme de graines ou de clones, grâce aux techniques in vitro développées, entre autres, dans le cadre du partenariat avec le département Forêts du Cirad.  [...]

[Biologie Moléculaire] Banques d'ADNc

Pour ce qui est des banques d'ADNg, le principe est quasiment le même. Sauf que cette fois c'est la totalité d'un génome qui est cloné et qu'on ne part pas de l'ARNm comme matérile de départ mais de l'ADN contenu dans n'importe quel tissu. Ce qui veut dire que tous les introns, exons, pseudogènes, ADN intercalaires, séquences promotrices, sont aussi clonés.  [...] Aprés, si tu veux utiliser les clones de ta banque pour un clonage, tu sélectionnes un virus de ta banque ( il existe plusieurs techniques dont celle de criblage de banque) pour faire une transduction sur tes bactéries. Ainsi tu amplifies ton vecteur et par la suite tu peux isoler les vecteurs amplifiés pour tes clonages.  [...]

[Biotechnologie] [biotechnologie] 1er mouton cloné

En fait pour les moutons, je ne sais pas s'il a été réalisé beaucoup d'autres clones, mais depuis Dolly on a effectivement cloné (avec la même technique) plein d'autres espèces animales.  [...] Si je me rappelle bien ils souhaitaient faire un clonage par la méthode habituelle à l'époque, c'est-à-dire non pas utiliser le noyau d'une cellule d'un oeuf ou un jeune embryon pour le transférer dans une autre cellule-oeuf (on pouvait avec cette technique obtenir des clones mais des clones ayant un âge proche les uns des autres, et non un clone d'un parent déjà adulte).  [...]

[Biologie Cellulaire] Test statistique sur petits échantillons

Dans mon cas, je ne peux pas avoir plus de deux échantillons par clone (dû à la technique de clonage). Par contre je devrais obtenir d'avantage de données prochainement (plus de contrôles et plus de clones). Mais je n'en aurai pas non plus 200, au mieux une cinquantaine de contrôle et une cinquantaine d'individus clonés.  [...] Dans le cas du trois, je n'ai pas vraiment n=2 si Le but n'est pas de montrer que les clones A sont différents, et pas le B par exemple, mais plutôt de montrer si les clones de manière générale sont identiques en taille ou non&.  [...]