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[Biochimie] technique d'étude de l'expression des gènes ou des protéines régulatrices

[Biochimie] technique d'étude de l'expression des gènes ou des protéines régulatrices.  [...] je cherche une technique qui nécessite le remplacement de la séquence codante du gène dont on veut étudier l'expression.  [...]

Comment la grippe aviaire pourrait sauter la barrière des espèces

Pour obtenir un échantillon de la protéine, les chercheurs ont mis au point une nouvelle technique de contrôle nommée expression des protéines solubles par troncation incrémentale aléatoire ( expression of soluble proteins by random incremental truncation - ESPRIT ).  [...] Nous avons mis au point un moyen d'utiliser des robots afin de contrôler des dizaines de milliers de conditions expérimentales et avons trouvé un morceau de la polymérase de l'influenza pouvant être utilisé pour nos travaux, explique le Dr Hart. Ce morceau ne représente qu'une petite partie de l'intégralité de la protéine mais offre un aperçu intéressant du fonctionnement de la protéine et des conséquences de la mutation sur une gamme d'hôtes.  [...]

[Divers] Imagerie par fluorescence - Applications

La fluorescence est un formidable en biologie, et en médecine. C'est une technique en plein développement, elle permet la localisation subcellulaire de protéines,de quantifier l'expression des gènes, de déterminer les interactions prot/prot (FRET), ou encore de déterminer avec précision les signature calcique (apoaequorine, sonde caméléon,  [...] * En anatomie pathologique (réalisation d'une biopsie), l'immunofluorescence directe sert à déceler les dépôts d'immunoglobulines ou des protéines du complément dans les tissus. Ensuite en cancérologie, on peut quantifier l'expression d'oncogènes par cytofluorimétrie.  [...]

[Biologie Cellulaire] Validation analyse transcriptomique

à la suite d'une analyse transcriptomique, pourquoi est-il nécessaire de la valider, par exemple en effectuant une cytométrie à flux.   [...] Une analyse transcriptomique ne renseigne que sur l'expression transcriptionnelle du génome. Les fonctions sont établies par les protéines (or cas des miRNA bien sûr), par conséquent si on veut faire un lien entre un transcriptome et une fonction ou un phénotype, il est mieux de faire une analyse plus poussée avec de la cytométrie de flux, du western blot, ou tout autre technique permettant de finaliser la réponse à la question initiale.  [...]

Un cerveau de drosophile en multicouleurs !

Alors comment ont-ils pu réaliser une telle beauté La technique de base, appelée Brainbow (jeu de mot en anglais rassemblant les mots arc-en-ciel et cerveau ) fut pour la première fois utilisée en 2007. Jeff Lichtman et Joshua Sanes du Harvard Brain Center avaient créé des souris transgéniques dont les neurones avaient été rendus multicolores grâce à l'insertion de gènes codant pour des protéines fluorescentes.  [...] D'un autre côté, une équipe du National Institute for Medical Research à Londres, a également développé une technique, Flybow, permettant l'expression aléatoire des protéines colorées en fonction des cellules. Deux paires de gènes sont chacune sur une cassette d' ADN, qui peut se retourner ou être éliminée grâce à l'activité d'une autre recombinase (Flp-FRT).  [...]

[Biologie Moléculaire] Dominant négatif

Cette technique revient donc un peu à empêcher l'expression (même si c'est pas le cas) de la protéine endogène, et tu vas ainsi pouvoir voir ce qui se passe lorsque ta protéine est absente.  [...] L'aspect de dominance n'a rien à voir avec la surexpression qui est un aspect purement technique (tout dépend du type de plasmide et donc du type de promoteur). A ce compte là dès que l'on surexprime un mutant c'est un dominant négatif... Le terme négatif vient au contraire du fait que ce type de mutant induit un phénotype muté à l'état hétérozygote (donc avec une quantité égale de protéines mutées et non mutées).  [...]

DNAchip

Je suis très impressionné par la technique des puces à ADN mais il y a une chose que je n'ai pas comprise dans les cas ou on veut comparer l'expression de gènes chez une personne saine et une personne malade.  [...] Par contre dans la technique que décrit Eska, j'ai l'impression qu'on ne veut comparer l'expression que pour une seule protéine (puisqu'apparemment on ne fixe qu'une seule sonde Oo) or je me demandais si j'avais rien compris au schmilblick ou si il y a avait pas une technique plus simple que le DNAchip à réaliser (dans le cas d'Eska).  [...]

[Biologie Cellulaire] Cytométrie

salut a tous, quelques petits soucis... quelles est la différence entre FACS et cytométrie en flux et quel est l'avantage de cette technique par rapport au western blot quand il s'agit de comparer l'expression d'une protéine entre 2 populations merci de vos réponses.  [...] la cytométrie en flux est une technique, le FACS est un acronyne (Fluorescence Activated Cell Sorter) qui désigne une machine (un trieur de cellules).  [...]

[Biochimie] Quelques questions sur les OGM

-Si tu veux faire exprimer une protéine exogène, par exemple une enzyme qui permet a une bestiole de résister a une toxine, tu insères le gène codant pour ton enzyme dans le génome de la bestiole, permettant ainsi à la protéine d'étre produite par l'individu.  [...] -Si tu veux empêcher l'expression d'un gène, par exemple pour recréer chez l'animal une maladie génétique humaine, tu peux utiliser la technique du knock out. Il s'agit de supprimer le gène d'intérêt pour que la protéine(s) qu'il encode ne soit plus produite.  [...]

[Biologie Moléculaire] Taux d'expression de gènes et fonction des protéines...

Suite à une expérience incluant un traitement A et un traitement B sur des animaux, je travaille sur l'expression de gènes qui codent pour des protéines dont la fonction est connue. Je trouve des différences significatives entre les taux d'expression de gènes des individus ayant subi le traitement A et ceux ayant subi le traitement B.  [...] Ces taux d'expression sont bien plus importants dans une condition que dans l'autre. Or, quand je mesure ce que devrait avoir produit les protéines qui m'intéressent (=synthèse d'une coquille), je ne trouve aucune différence de croissance de la coquille entre les deux traitements.  [...]