• Santé - Technique, Amplification, ARN, Virus

Autres hépatites : D, E, G | Dossier

L' ARN du génome du VHD permet la fabrication de la partie interne du virus, la synthèse de l'enveloppe étant dépendante de la présence du VHB. Lors de la phase aiguë, si le patient a été infecté simultanément par le VHB et le VHD, il est rare que l'hépatite devienne chronique.  [...] En 1995 et 1996, deux nouveaux virus ont été mis en évidence. le virus de l'hépatite G (VHG) et le virus VGB-C, une souche différente du VHG. Ces virus à ARN peuvent être identifiés par amplification de leur génome ( PCR ou réaction de polymérisation en chaîne).  [...]

Révolution dans le domaine de la microscopie ?

Je ne connais pas ce procede (et s'il y a plus d'info, je suis preneur), mais outre le fait que le cout d'utilisation parait exorbitant, il fait encore appel a des traitements important des cellules pouvant toujours aboutir a des artefacts. Peut etre qu'un jour, on pourra connaitre les proprietes des proteines, lipides, complexes proteiques etc dans les cellules vivantes ainsi que leurs modifications en temps reel sans meme a avoir a les toucher si ce n'est les poser sous un microscope.   [...] Je crois effectivement qu'esperer voir un ARN en AFM ou microscopie electronique est illusoire, surtout si on souhaite le voir dans le virus. Je ne parle meme pas de le voir sortir d'une particule virale par ces techniques Pour le moment, en imaginant un systeme assez ingenieux d'amplification de signal in vivo (comme ce que suggerait Steph, un couplage a une proteine fluorescente ou inserer des bases modifiees pour une detection ulterieure) couple a la microscopie confocale ou mieux, 2 photons, on pourrait peut etre esperer detecter quelque chose.  [...]

[Biochimie] Lac IQ et Tac promoteur

J'ai compris l'histoire du promoteur, de l'expression dans une bactérie,mais là je te parle du test NASBA,test de détection des ARN rétroviraux qui utilise la T7pol comme aplificatuer.Mais comment se fait-il qu'une T7pol de bactériophage puisse amplifier des ARN de virus comme HIV.  [...] Pour le système NASBA, l'avantage en synthétisant de l'ADN à partir d'ARN puis de l'ARN à partir de l'ADN est qu'on a une boucle qui permet ainsi l'amplification du matériel initial. Je ne me suis pas penché sur la technique en profondeur et il se peut qu'il y ait d'autres avantages de l'utilisation de la T7 RNA polymérase.  [...]

[Microbiologie] Viabilité d'une bactérie et ARN

En fait je ne suis pas rentré dans les détails. la bactérie étudiée est Chlamydia trachomatis (bactérie à multiplication intracellulaire...d'où culture cellulaire), et un des buts du travail est de comparer plusieurs techniques (dont la RT-PCR).  [...] Ils m'ont dit également que le but premier de son amplification (et de sa quantification) est de calibrer une manip au cours de laquelle on a extrait de l'ARN…..en gros pour voir si la technique d'extraction a bien marché (et pas pour apprécier la capacité réplicative d'une bactérie).  [...]

création de bactéries artificielles

mais des infos concernant la technique de modofication du génome bactérien m'intéressent aussi (j'ai lu récement que des chercheurs Américains avaient inséré un gène à E.coli afin de dégrader le mercure présent dans l'eau ainsi qu'un autre pour produire une molécule qui éviterai que le mercure soit toxique pour cette souche).  [...] Moi j'ai simplement entendu parler de la fabrication artificielle d'un virus par une nouvelle technique d'amplification et de lagation des fragments d'ADN. Une fois synthétisé ce génome virale etait injecté dans une cellule et il a permi la synthèse de nouveaux virions. C'etait aussi craig venter.  [...]

[Biologie Moléculaire] Tma

svp, je demande si vous pouvez m'aider, j'ai besoin d'une explication de la TMA(transcription mediated amplification), je sais que c'est une sorte de PCR et qu'elle produit plus l'ARN, mais le principe est un peu flou.  [...] TMA est une méthode d'amplification qui s'inspire du process transcriptionnel observé chez les virus. Elle consiste à une sucetion de cycle de transcription inverse et de transcription générant beaucoup d'ARN. 3 enzymes agissent sur un simple brin d'ARN. La RT la RNAse H et la RNApol.  [...]

Le diagnostic de la grippe aviaire | Dossier

Technique de RT-PCR ou technique d'amplification en chaîne par polymérisation après transcription inverse. Elle permet d'amplifier le génome viral, de détecter spécifiquement un ARN viral et donc d'identifier le type et le sous-type viral (Coiras, Aguilar et al.  [...] La culture virale est considérée comme le gold standard car elle permet à la fois l'identification du virus, sa caractérisation et l'étude de sa variabilité antigénique et génétique, notamment par technique de RT-PCR, la réalisation des tests de sensibilité médicamenteuse et la préparation de vaccins (Collins, Ko et al. 2002 26 ).  [...]

[Biologie Moléculaire] inverse PCR

le PCR temps réelle est une technique qui permet d'intégrer un dosage et donc un aspect quantitatif au processus d'amplification.  [...] et Real-time PCR c'est encore autre chose... C'est une technique de quantification que l'on peut réaliser pour mesurer l'amplification de l'ADN... Cette technique peut être utilisée sur la plupart des PCR.  [...]

[Biologie Moléculaire] contrôle interne en RTqPCR

Si il y a amplification du témoin interne, on a bien extrait de l'ARN non lysée de notre échantilon et la PCR n'est pas inhibée, donc un résultat négatif indique bien que l'échantillon ne contient pas ton ARN cible (donc qu'il est bien négatif).  [...] Il y a aussi une autre façon de le faire, c'est de rajouter l'ADN de notre contrôle interne dans notre mix PCR (ou l'ARN avant la RT dans ton cas) et de l'amplifier, cela permet d'être sur de son amplification (et de sa RT) mais pas de son extraction.  [...]

[Divers] révélation d'une sonde couplée à la peroxydase

Cette variante de la technique classique du FISH utilise des sondes couplées à la peroxydase ce qui permet, après la première étape d'hybridation ARNr16S-sonde, de réaliser une amplification du signal en utilisant des tyramides fluorescentes.  [...] Si un de vous a déjà essayé ceci, ou alors un autre système d'amplification du signal à partir de peroxydase (sur sonde ou anticorps), j'aimerais bien avoir votre avec avis avant de me lancer dans cette manip.  [...]