• Santé - Tampon, Sonde, Bon résultat

[Biologie Moléculaire] signal southern blot

Il y a quelques semaines j'ai coupé ma membrane en deux, j'ai hybridé la premiere partie avec un ancien tampon+sonde avec lequel j'avais obtenu de bon résultat.. et la deuxieme moitié avec le tampon et les sondes que j'utilise ces derniers moi.  [...] Cette sonde la je sais qu'elle fonctionne. Si je n'ai pas de bons resultats avec celle qu'ils auront marqué, c'est que ca vient de mon tampon... mais quoi dans le tampon aprés il a aussi ete refait plusieurs foi.  [...]

[Biologie Moléculaire] Remplacer dilution buffer?

au cours d'une determination de l'efficacité d'une réaction de marquage d'une sonde d'ADN je dois utiliser un dilution buffer pour diluer l'ADN mais le quit du DIG-labeling DNA de Roche contient seulement 3ml de ce tampon alors que j'utilise dans chaque manipe prés de 0.  [...] Si tu connais la composition du tampon qu'utlise Roche, tu peux toujours en refaire toi même temps que tu respecte les doses et le pH, y'a pas de raison que celà ne fonctionne pas.  [...]

[Biotechnologie] Temperature d'hybridation pour southern Blot

Je suis entrain de rechercher un gene d'interet par southern Blot. J'utilise comme tampon d'hybridation, le Easy Hyb de ROCHE. J'ai utilise 65 degre comme temperature d'hybridation et apres les differents lavages (utilisant 65 degre de temperature de lavage, quand il le faut pour rester dans la stringeance) de ma membrane jai obtenu de tres beaux signaux.  [...] Mais le hic, cest que on me dit que avec ce tampon d'hybridation, la temperature a utiliser est au maxi 50 degre. Alors du coup sais pas si mes signaux obtenus sont specifiques ou si ma sonde a pris un coup apres hybridation dans une temperature si elevee.  [...]

Maladie de Crohn et RCH - Page 158

(Cela ne vient pas de moi, mais d'une étude faite par des psychologues), cette maladie est en fait le résultat de plusieurs facteurs. génétique, sensibilité au stress, caractère, environnements familiaux etc...En fait, cette étude montre que les malades de crohns ont dans la plupart des cas, de grandes similitudes dans leurs vies affectives et donc au point de vue psychologiques.  [...] Je me suis renseignée pour l'entéroscanner. Effectivement, de nos jours, ils n'utilisent plus la sonde. Il faut simplement boire un liquide (certainement pas bon, beurk...mais bon, c'est toujours mieux qu'une sonde..)avant le scanner, et il y aura ensuite perfusion d'iode (je dois d'ailleurs prendre des anti-histaminiques pour l'iode).  [...]

Température corporelle : comment bien choisir son thermomètre

Thermomètre à infrarouge. voie tympanique (oreille) et temporale (tempe). Muni d'une sonde à infrarouge, il évalue la température à partir des rayonnements du corps. Il effectue une série de mesures en moins d'une seconde et retient le résultat le plus élevé.  [...] Les appareils à insérer dans l'oreille constituent un bon second choix, mais ils doivent être bien positionnés pour donner un résultat fiable. Les appareils à infrarouge temporaux sont, eux, moins précis, tout comme le thermomètre à cristaux liquides. Ces deux derniers sont donc déconseillés.  [...]

optimisation pcr quantitative temps réel

je cherche à optimiser la détection d'OGM par PCR quantitative en temps réel en condition multiplexe sur un rotorgene. je voudrais savoir qu'est ce que je pourrais ajouter dans mon mix pour augmenter la spécificité de mes amorces sachant que j'ai déjà optimiser les concentrations en amorces, en sondes, en MgCl2 et que j'ajoute de la BSA.  [...] Je suis assez étonné que tu veuilles augmenter la spécificité de la réaction. il me semble qu'en faisant un bon design des amorces et si en plus tu utilises une sonde, ça devrait être satisfaisant.  [...]

[Biologie Moléculaire] probleme avec ma PCR

Je dispose d'ADN dans lequel je dois amplifier un gene particulier. Disons A. Apres plusieurs PCR je n'ai aucun resultat. Alors que quand je transfert cet ADN sur membrane et que je fais une hybridation, j'ai des signaux. Ma sonde est le gene que je cherche mais amplifie avec un control positif.  [...] Ensuite tu peux ajuster ta PCR. nb de cycles, faire un gradient de temperature pour l'hybridation, augmenter ou diminuer le temps d'élongation en fonction de la taille de ton fragment à amplifier, modifier ton tampon de reaction.  [...]

[Biologie Moléculaire] marquage à la digoxigènine

JE cherche à savoir la composition du tampon d'hybridation. Sur le site de roche il me conseil d'utiliser le leur ce qui est commercialement normal et il me donne 3 compositions différentes.  [...] Tampon 1. High SDS buffer avec. 7% SDS. 50% formamide deionized. 5x SSC. 2% Blocking Reagent. 0,1% (w/v) N-lauroylsarcosine. 50mM Sodium phosphate, pH 7.0.  [...]

diagnostic prénatal technique

Pour faire les diagnostics grace a la biologie moleculaire on utilise pour quasi toutes les techniques de diagnostic des sondes spécifiques d'une sequences qui serait responsable des pathologies a detecter, mais comment trouve t on que justement c'est cette sequence nucleotidique qui est la source de la pathologie.  [...] Tu ajoutes une sonde pour visualiser l'hybridation et la non hybridation. Et tu as ton résultat. Normalement, si ton sujet est sain, toute ta puce est hybridé (sauf pour une série de contrôle). Avec ton sujet malade, tu vas identifié quelques séquences non ou mal hybridé.  [...]

Run on et run off

Bon, le run-on, tu extrais des nyx, tu les incubes en présence d'héparine ( bloque l'initiation de la transcription), de nucleotides dont l'un marqué au P32, Puis, extraction d'ARN et incubation avec une membrane sur laquelle, est fixée une sonde correspondant au gène d'intéret.  [...] Run-off, c'est faire un système de transcription dans un système acellulaire, dans lequel tu mets un fragment de ton gène, faire une transcription in vitro, et tester l'effets de différents facteurs de transcription.   [...]