• Santé - Tampon, Solution, ADN

[Biologie Moléculaire] biologie moléculaire

1) quel est la nécessité du sel dans une solution qui contient. un tampon GET, une solution NaOH et SDSet une solution de K-acétate 5M Ph 5.2 tout afin d'extraire l'ADN plasmidique le quantifier.  [...] Faut pas déconner, si tu veux plus d'infos à propos de la même question, il suffit de le dire dans le même sujet accessible via le tableau de bord en haut).   [...]

[Biochimie] pH de l'ADN

Un pH est le logarithme d'une concentration en H+. Et une concentration, c'est un nombre de mol par unité de volume de solvant. Le pH est une notion qui n'existe donc qu'en solution. et usuellement en solution acqueuse.  [...] Tu as peut-être mal entendu... Il n'a peut-être dit que dans une manip on placait l'ADN dans un tampon (= solution au pH fixé) basique.  [...]

[Biologie Moléculaire] reactifs utilisés pour l'éxtraction de l'ADN et la PCR

Le TE c'est du Tampon d'Elution. Une solution saline isotonique qui sert à rediluer et conserver vos ADN une fois que vous les avez extraits. Il est souvent simplement remplacé par de l'eau.  [...] Alors pour les 94° pendant 5 minutes ça a deux fonctions. bien dénaturer tout l'ADN, et activer la Taq polymérase qui est rendue inactive artificiellement. Ca permet qu'elle commence a etre active uniquement au début du programme.  [...]

[Biologie Moléculaire] probléme de migration d'ADN sur gel d'agarose

De l'ADN a été extrait à partir de pulpe de tomate et ensuite stocké au congélateur.Je pars donc ensuite de cette extraction (2microlitres) que j'ajoute à 48 microlitres d'une solution contenant de l'eau, un tampon, des bases nucléotidiques, les primers REVERSES et FORWARD ainsi que la TAQ polymérase.Ensuite on lance la PCR pour 40 cycles.  [...] Peut etre que tu n'a tout simplement rien amplifié et que c'est l'ADN génomique n'est pas sorti du puit... Essaye d'autres primers sur ta solution d'ADN pour voir si autre chose peu etre amplifié et ainsi migrer correctement dans ton gel.  [...]

[Génétique] Extraction plasmidique rôle des buffers

ainsi que le rôle du tampon QC, QT et TE pourquoi autant de tampons différents.  [...] voilà ce que j'ai fais en tp. j'équilibre une colonne d'affinité avec du QBT, je mets ma solution avec mes plasmides dedans, je rajoute du QC, puis j'élue l'ADN avec un tampon QT, je fais précipiter l'ADN en y ajoutant de l'isopropanol, on passe à la centri, on récupère le culot qu'on redissout dans du tampon TE.  [...]

[Biochimie] PCR: a quoi servent les differents elements

Les brins d'ADN et surtout ceux d'ARN sont très fragile, d'où l'utilisation de solution tampon pour éviter tout changement de pH pouvant ainsi casser la molécule ainsi pour avoir un pH qui sera optimum à l'action de la Taq Polymérase.  [...] Dans le type de PCR que je décris, on a aussi le moyen de déterminer la taille de l'amplicon, on chauffe progressivement la solution, une molécule d'ADN double brin se séparera à une température donnée (le Tm) suivant sa longueur. QUand la molécule s'ouvre, les fluorophores n'émettent plus de lumière.  [...]

Extraction du plasmide

La composition exact des kits n'est jamais totalement donnée (ils vont pas couler leur fond de commerce en révélant leurs secret de fabrication ), mais par exemple la solution de resuspension est une solution, ou plutôt un tampon qui permet la conservation des éléments souhaités,  [...] Par contre normalement ton tampon d'élution est une solution qui va lier l'ADN avec plus d'affinité que la colonne ne retiens ton ADN (puisque tu as fait plusieurs rincage, il fallait que la colonne retienne l'ADN mais laisse passer les solvant, sur des principes d'affinité, et comme la tu veux récupérer ton ADN, il faut le décrocher de cette colonne avec quelque chose qui a encore pluss d'affinité pour l'ADN que la colonne).  [...]

Conservation d'ADN

Malheureusement je n'ai trouvé aucune autre information. Combien je dois peser si je veux une solution de 1L et combien mettre d'EDTA (les formules me suffise je peux faire le calcul par la suite) Et aussi j'ai extrait mon adn avec du sel du vinaigre et je l'ai fait précipité avec de l'éthanol, est-ce que ça des risque d'interférer avec mon tampon Et pour finir, je vais le doser par spectrophotométrie UV, est-ce que mon tampon risque de brouiller l'analyse (même si je fais un blanc).  [...] Normalement pour le dosage on fait un blanc avec le tampon qui contient l'ADN (donc du TE dans votre cas) même si la différence ne sera pas enorme.  [...]

[Biochimie] Protocole de TP un peu flou

A partir de cette solution stock,preparer 5ml d'une solution de Phe 2mM dans le tampon phosphate.  [...] je pensais qu'il fallais mélanger la solution de Phe avec celle du tampon et apres réaliser la dilution.  [...]

[Biologie Moléculaire] Kit Miniprep NucleoSpin Plasmid

Super je vais regarder ça, mais je voudrait pas connaitre exactement la composition, juste savoir quel type de solution c'est, pour savoir comment elle agit sur la colonne, par exemple le tampon d'élution, par quel moyen décroche-t-il l'ADN de la colonne, etc.  [...] QIAGEN plasmid purification protocols are based on a modified alkaline lysis procedure, followed by binding of plasmid DNA to QIAGEN resin under appropriate low-salt and pH conditions. RNA, proteins, dyes, and low-molecularweight impurities are removed by a medium-salt wash.   [...]