• Santé - Suspension, Mère, Concentration, Solution

[Biologie Cellulaire] aide pour un petit calcul

j'ai un exercice ou je dois trouver un volume d'une suspension bactérienne mère. Comme information nous avons le volume fille (qui correspond au volume du milieu de culture plus celui de la suspension mère ) quiest de 30mL et l'absorbance qui est de 0,4.  [...] vous cherchez le volume d'une suspension bactérienne mère ou la concentration bactérienne initiale dans la solution mère.  [...]

[Microbiologie] Question sur un protocole de dilution.

[*] Au bout de 24h ou plus, procéder à la détermination de la concentration de la suspension de bactéries, en préparant des dilutions décimales croissantes allant de 10-1 à 10-8 à l'aide de tube à essai contenant 9 ml d'eau physiologique stérile (1 ml de la suspension mère dans 9 ml d'eau physiologique stérile, homogénéiser puis reprendre 1 ml de cette dilution à 10-1, le verser dans 9 ml d'eau physiologique stérile, homogénéiser, et ainsi de suite jusqu'à la dilution finale 10-8. Rejeter 1 ml de cette dernière dilution ).  [...] C'est peut-être pour donner une habitude pour des futures gammes de dilutions en tube, que tu incubera directement, le même volume de milieu permettra une comparaison plus correcte, comme les dilutions pour déterminer les concentrations en bactéries avec les bouillons VLBL.  [...]

[Biologie Moléculaire] Tampon d'extraction

Plutôt que de préparer ce genre de solution à partir de poudres je vous conseille de vous faire des solutions stock concentrées d'EDTA (500mM c'est pas mal) et de SDS (10-20%). Une fois celles ci prêtes il sera bien plus simple de réaliser le tampon de lyse.  [...] Si vous avez une solution de SDS 20% et qu'il vous faut une solution à concentration finale 2% il suffit de diluer 10 fois votre stock. Je ne vois pas bien le problème. Si vous ne faites pas comme cela il va vous falloir repeser les poudres à chaque fois (avec les variations que cela engendre), remettre tout cela en suspension (avec le temps que cela prend).  [...]

Matériels et méthodes | Dossier

La cytotoxicité de la molécule à tester est évaluée par le dosage de l'activité enzymatique de la lactate déshydrogénase (LDH) du surnageant cellulaire d'une suspension de granulocytes neutrophiles ou de lymphocytes, monocytes (5.10 6 cellules/ml) incubée à 37°C avec l'inhibiteur à différentes concentrations.  [...] Les cellules sont remises en suspension dans le tampon de lyse pour western blot (cf. annexe 2) à la concentration de 50.10 6 cellules /ml. Elles sont soniquées 6 fois 5 secondes, en prenant garde de bien refroidir les tubes entre chaque passage. Tous les échantillons sont dilués au tiers par une solution échantillon (cf.  [...]

[Microbiologie] Préparation suspension à 10^6 bactéries/mL

J'aimerai préparer une suspension bactérienne à une concentration d'environ 10^6 ou 7 bactéries/mL, à partir d'une culture solide sur boîte de pétri. Pour cela, je n'aurai pas de solution de McFarland à disposition, ni de bouillon nutritif. Est-ce possible de le faire dans de l'eau physiologique à partir d'une suspension dense.  [...] Pour ce faire il vous faudra une cellule de comptage afin d'estimer la concentration bactérienne. Ces cellules vous permettent d' estimer (et c'est bien une estimation) la concentration bactérienne après comptage du nombre de cellules sur une surface donnée.  [...]

[Biochimie] Chromatographie d'acides aminés

2°) mettre un nombre conséquent de colonies en suspension dans une solution H2O, NaCl super-hyper-concentrée (les cellules exsuderont).  [...] 3°) (centrifuger puis) analyser le surnageant par chromatographie - attention à la concentration en NaCl. si ça dissout les protéines et les acides aminés, est-ce que ça ne gêne pas les réactions avec le révélateur choisi Dans ce cas une dilution ne serait pas mal.  [...]

[Biologie Moléculaire] solutions d'ARN trop diluée

a la fin de la purification des ARN, on espère obtenir des solutions d'ARN a une concentration supérieure a 1ug/ul.  [...] j'ai trouvé qu'on peut sécher la suspension d'ARN au speedvac pour pouvoir concentrer la solution.  [...]

Matériels et méthodes | Dossier

Après une centrifugation à 400 g pendant 10 minutes à 4°C, les granulocytes sont remis en suspension dans le tampon de lyse de chromatographie (cf. annexe 1) à la concentration de 50.10 6 cellules/ml et à raison de 25.10 6 cellules par tube. Les cellules sont lysées par sonication, à raison 6 fois 5 secondes en prenant garde à bien refroidir les tubes entre chacune des phases de sonication pour éviter une dénaturation trop importante de l'enzyme.  [...] Les cellules sont remises en suspension dans le tampon de lyse pour western blot (cf. annexe 1) à la concentration de 50.10 6 cellules /ml. Elles sont soniquées 6 fois 5 secondes, en refroidissant les tubes entre chaque passage. Les milieux sont centrifugés à 8000 g pendant 5 minutes à 4°C pour éliminer les noyaux et les cellules non lysées.  [...]

Concentrer

Typiquement, pour de l'ADN, il existe des protocoles visant à le faire précipiter, puis après re-suspension dans un volume moins élevé, on obtient une solution plus concentrée.  [...] Généralement un ADN plus concentré est plus facile à manipuler, pour le diluer à la concentration voulue, pour faire des PCR plus efficaces.  [...]

[Microbiologie] Analyse de prélèvement de surface

Sinon, pour analyser de la mayonnaise il faut d'abord faire une suspension mère. Pour cela tu prends 10g de ton produit prélevé stérilement et précisement dans un sac pour stomacker et tu ajoutes 90 mL d'eau Phi (ou Eau peptoné je ne sais plus trop.).  [...] Avec ta suspension mère tu peux préparer un gamme de dilution, avec la technique des dilutions succécive. (1 mL de la suspension mère dans 9 mL de la 10-1. 1 mL de la 10-1 dans 9 mL du tube 10-2...).  [...]