• Santé - Substrat, Synthèse, Beta

[Microbiologie] Opéron lactose, Molécules mystéres.

Je connais bien la réaction de l'ONPG, mais je ne savais pas que celui ci, qui à la base est surtout utilisé comme substrat chromogène, pouvait servir d'inducteur. Pourtant sa structure s'éloigne beaucoup de l'allolactose, peut-il réellement se fixer sur le répresseur de l'opéron lactose, et ainsi induire la synthèse de Béta-gal.  [...] Je suis d'accord avec toi sur le clivage de L'ONPG par la B-gal, mais moi je demandais, non pas un substrat, mais bien un inducteur, s'il n'y a pas d'inducteur, il n'y aura pas de Béta-gal (enfin, si, mais en quantité infime, le 0 physiologique si on peut dire).  [...]

[Génétique] Help! tp génétique, analyse clonage

Le gène LacZ code une protéine permettant de convertir le X Gal en un substrat de couleur bleue. Si ton clonage (insertion du gène) ne permet plus la synthèse de cette protéine, et ben tes bactos sont blanches.  [...] Quelles en seront les conséquences (Tu dis plus bas avoir bien compris le système béta-gal/substrat chromogène, donc vas-y, explicite ).  [...]

[Biochimie] métabolisme

- couplages chimio-chimiques. synthèse par phosphorylation de l'ADP liée au substrat (dans le cycle de Krebs, la glycolyse...).  [...] - couplages chimio-chimiques. phosphorylation d'un substrat, synthèse d'aminoacylARNt.  [...]

[Biochimie] enzymes et substrat biolux

Mais j'ai trouvé par ailleurs que les scientifiques utilisent d'autres genes. Lac Z(enzyme beta gal),GUS(enzyme beta gluc) en plus du LUC. Serait-il possible de me donner le rapport avec luciférine/luciférase et de me les intégrer tous les deux dans les principaux systèmes lumineux.  [...] Il m'est arrivé de mesurer l'activité beta-galactosidase avec un luminomètre. Dans ce cas là, le substrat employé ne doit pas être du X-Gal comme il est coutume d'employer pour des tests de sous-clonage, mais un substrat luminescent.  [...]

operon

La synthèse de la beta gal peut être induite par l'IPTG (isopropylthiogalactoside), en effet l'IPTG est un inducteur de l'opéron lactose. L'IPTG permet la complémentation alpha intra allélique d'une forme déficiente de la beta galactosidase, il induit donc la production de beta gal.  [...] On met en contact les cellules exprimant la beta galactosidase et un substrat chromogène de la beta galactosidase ici le Xgal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D-galactoside) en effet le galactoside devient bleu quand il est clivé par la galactosidase.  [...]

[Microbiologie] Organismes vivant qui utilise du dioxyde de carbone pour vivre

En 2001, deux spécialistes ont essayé d'établir une liste exhaustive des métabolismes de base utilisés par les procaryotes thermophiles et hyperthermophiles connus à l'époque ( Amend & Shock, 2001 ). Et rien qu'avec eux, ils en étaient arrivés à bien plus d'une centaine de respirations différentes.   [...] (Au passage, mais cela devrait être un autre sujet, quelle idée a-t-on sur l'ordre d'apparition entre les deux principaux modes de génération d'ATP, ceux par substrat et celui par gradient et l'ATP-synthase Autrement dit, si on suppose que le métabolisme cité amène à une synthèse par gradient, peut-on penser qu'il est primitif, ou qu'il est postérieur à l'ATP-synthase, elle-même postérieure à des mécanismes plus primitifs de type synthèse par substrat).  [...]

Résultats | Dossier

Les conditions décrites précédemment sont valables pour une synthèse efficace et constante de COX-2 sans que celle-ci n'interfère avec l'activité de COX-1. Mais notre but étant de mesurer l'activité enzymatique de chaque isoenzyme, nous devons nous assurer que le substrat de la réaction enzymatique, l' acide arachidonique, ne soit pas en quantité limitante.  [...] Mais, il faut aussi vérifier que ce composé n'a pas d'influence sur les milieux cellulaires, notamment sur la synthèse de COX-2 et de COX-1. La concentration en acide arachidonique doit être comprise entre 10 et 100µM pour que le substrat ne soit pas en quantité limitante.  [...]

[Biochimie] électrophorèse-Gel-Activité?

l'electrophorese ne permet pas de determiner l'activité d'une enzyme (sauf cas particulier ou le substrat est mélangé au gel) elle permet en revanche de s'assurer de la presence de l'enzyme (apres cette derniere peut etre inactive).  [...] le gel qu'on a utilisé ne contient pas le substrat de la béta-gal, mais dans l'étape de la révélation on à utilisé un substrat chromogène qui vas s'associer à la béta-gal,  [...]

[Biotechnologie] beta galactosidase

Quand on utilise le gène de la beta gal comme gène rapporteur in vivo chez l'animal par exemple, quel est le substrat qui donne la couleur bleueEst-il endogène et peut visualiser la coloration in vivo ou faut-il faire une biopsie et mettre les cellules en contact avec le substrat ex vivo pour visualier les cellules transduites... Merci d'avance.  [...] Merci. Alors ce doit être sur des biopsies qu'ils ont fait ça car c'est pour évaluer l'inocuité d'un vecteur de thérapie génique avec le gène rapporteur de la beta Gal, et ils nous montrent de jolis images de cellules colorées en bleues après traitement.  [...]

[Biologie Moléculaire] Plasmide génie génétique

Le gène LacZ est souvent présent dans le plasmide pour sélectionner les plasmides contenant un insert. Dans ces cas là, le polylinker est présent dans le gène LacZ. L'intégration d'un insert au niveau du polylinker a donc pour effet d'invalider la beta-galactosidase.  [...] Dans le milieu nutritif on ajoute du X-Gal qui est un substrat de la beta-Galactosidase et qui devient bleu lorsqu'elle le transforme.  [...]