• Santé - Stage, Cellules, ADN

[Biochimie] Analyse cycle celluaire cytometrie de flux sur l'automate cyan

Bonjour à tous et à toutes, je suis nouvelle sur ce forum et j'espère que je trouverais des âmes bien veillantes pour m'aider avec ce petit soucis.   [...] J'ai réalisé lors de mon stage plusiurs manipulations de marquage avec Ac fluorescent pour la technique de cytométrie de flux.Seulement j'ai également effectué à la fin de mon stage un cycle cellulaire sur des cellules en utilisant comme intercalant ADN le vybrant violet.  [...]

[Biologie Moléculaire] Quantification de l'ADN

Je suis étudiant en spécialisation de biologie moléculaire et culture cellulaire et je suis actuellement à stage à Evry. On travail avec de la fluorescence pour la quantrification de l'ADN (et en estimer sa qualité). Seulement lorsque l'on utilise du tampon PBS (10.  [...] De plus je dois rédiger un mémoire de stage. On m'a conseiller de s'inspirer d'un article scientifique... Q'uelqu'un aurait-il déjà rédiger ce type de travaux.  [...]

[Biologie Moléculaire] Calcul pour avoir une solution d'ADN à 10ng/microlitre à partir d'une solution d'ADN à 50 nM

Ce que je ne comprend pas c'est le passage des nM au ng/microlitre. Ce n'est pas la même unité il me semble, pourtant nous avons fait une dilution comme s'il s'agissait justement d'une même unité. Est ce correct.   [...] Non ce n'est pas du tout correct. La correspondance entre la masse (en ng) et la quantité (en nM) dépend de la taille des ADN en question, plus précisément de la masse molaire des fragments considérés.  [...]

Co-immunoprécipitation: à quoi sert le flowthrough?

Bonjour, j'ai récemment effectué un stage où j'ai fais une co-immunoprécipitation avec des billes magnétiques, sur des cellules lysées. Avant d'éluer les complexes billes -anticorps-antigènes, on a placé les tubes sur le support aimanté pour récupérer le surnageant que mon maître de stage a appelé flow through.  [...] Le flow through est censé ne contenir que les autres protéines cellulaires dont je n'ai pas besoin Si la co-pi a fonctionné je ne devrais rien avoir dessus au WB (ou montrerait les restes de protéines d'intérêt n'ayant pas lié) Cela sert à savoir si la liaison entre l'anticorps et la protéine est bonne ou mauvaise.  [...]

[Biologie Moléculaire] Origine, transformation de cellules CHO

Ma requête est la suivante. je suis à la recherche d'informations sur les cellules ovariennes de hamster chinois (Chinese Hamster Ovary). Car mon projet a pour but de déterminer le nbre de gènes transfectés par cellules par PCR quantitative. C'est pourquoi j'ai besoin d'informations sur ces cellules afin de rédiger un rapport.  [...] je suis désolée de ne pas pouvoir répondre à votre question. J'ai 15 ans et je suis en classe de seconde. Sauriez-vous quelles sont les molécules contenues dans la cellule CHO.  [...]

[Biologie Moléculaire] Il y a quoi dans un kit d'extraction d'ADN?

Le deuxième procédé fonctionne avec des billes magnétiques qui retiennent l'ADN ce qui permet d'éliminer le milieu et de laver l'ADN.  [...] tu devrais trouver toutes les informations dans les notices techniques de ces kits. Tous présentent le fonctionnement de leur kit.   [...]

[Biochimie] estimation de le concentration d'ADN aprés spectrophotometrie

Bonsoir, au cours de mon stage à la faculté, j'ai fais des extractions d'ADN à partir de sang humain, et aujourd'hui j'ai dosé mes echantillon par spectrophotometrie (ADN dilué au 1/100 dans du TE). Je voudrais calculer la concentration de mon ADN dans chaque echantillon, comment puis je faire à part la regle de. 1 DO correspond à 50 µg/ml.  [...] Dans mon cours de Biologie Moleculaire on utilise cette formule. [ADN]= Absorbance à 260 nm* facteur de dilution* 50ug/ml ( pour l'ARN c'est 40ug/ml).  [...]

[Biologie Moléculaire] Kit Miniprep NucleoSpin Plasmid

Bonjour a tous, je suis en stage, et j'ai récemment utilisé le kit NucleoSpin Plasmid qui permet d'extraire de l'ADN plasmidique de bactéries.  [...] Super je vais regarder ça, mais je voudrait pas connaitre exactement la composition, juste savoir quel type de solution c'est, pour savoir comment elle agit sur la colonne, par exemple le tampon d'élution, par quel moyen décroche-t-il l'ADN de la colonne, etc.  [...]

[Biologie Cellulaire] Problème test MTT et différenciation

Je suis acutellement en stage dans un laboratoire de toxicologie cellulaire, dans lequel je test des molécules sur des cellules hépatiques. lignée HepG2, et sur des cellules neuronales non différenciées. lignée SK-N-BE(2).  [...] Avez-vous déjà travaillez sur ce type de cellules Avez-vous rencontrez des problèmes similaires Comment améliorer ce protocole.  [...]

[Biologie Moléculaire] Plasmide

Normalement oui tu mettre des plasmides dans des cellules eucaryotes puisque quand j'étais en stage on avait transplanté des plasmide à l'intérieur de cellules cancéreuse. Il s'uffit de faire une électroporation ou autre manipulation du genre pour qu'il soit intégré.  [...] Dans ta dernière question, je suppose que tu suggère d'intégrer un plasmide dans une cellule eucaryote et de le garder en tant que tel, c'est à dire qu'il ne s'intègre pas au génome. Je pense que c'est possible de façon spontanée chez S. Cerevisiae. Pour des cellules de mammifères, cela nécessite qu'elles soient au préalable transformées avec l'antigène T de SV40, comme c'est le cas pour les cellules Cos-7.  [...]