• Santé - Spots, Hybridation, Sondes, Patient

[Biologie Moléculaire] Dot Blot

°si on a un juste un spot avec l'hybridation de la sonde normale et aucun avec la mutée, le patient ne portera pas la mutation (il sera homozygote sain).  [...] °si on un 2 spots apres hybridation avec les 2 sondes on pourra dire que ce patient est hétérozygote.  [...]

Fabrication d'une puce à ADN

Cela offre des donnés qualitatives ( quels sont les genes exprimés dans telle situation ) et quantitatifs (à quel niveau sont ils exprimés).   [...] Ensuite on hybride ces sondes avec le support solide et on detecte les spots allumés ( gènes qui se sont exprimés ) leur intensité dépends de la quantité d'ARNm présent dans l'échantillon.  [...]

Expression de gène

Ils pourront par complémentarité des bases azotées, se lier à l'ADN qu'on a fixé au début, mais seulement si les gènes sont présents. Pour détecter ces hybridations il faudra au préalable marquer par un colorant les ADNc. On pourra donc savoir si la cellule dont on a prélevé les ARN totaux expriment ou pas les gènes qu'on a fixé et amplifié au début.  [...] Et étant donné qu'on a un amplification proportionnelle des ARNm l'intensité de la couleur des spots suite à l'hybridation nous renseignera sur la forte ou faible expression de ceux-ci dans la cellule en comparant avec des témoins.  [...]

DNAchip

-Puis on ajoute les cDNA sur les sondes afin qu'ils s'hybrident avec leur sonde complémentaire. c'est à cette étape que j'ai un problème (en supposant dejà que les étapes que j'ai décrites précédemment soient bonnes). Faut-il faire une puce pour le malade et le sujet sain puis superposition des résultats par traitement info pour avoir des spots jaunes et de ttes les couleurs ou bien on ajoute sur la même puce les cDNA des 2 personnes.  [...] Et dans les techniques où une seule puce suffit, comment être sûr lorsqu'on obtient un spot rouge par exemple que c'est bien parce qu'on a une surexpresion d'un gène dans une condition par rapport à l'autre et non pas parce qu'il y a eu plus d'hybridation avec l' ADNc marqué avec la Cy3.  [...]

Les puces à protéines

Du coup, pour les cancers, si on fait une comparaison entre les spots protéiques extirpés d'une cellule cancéreuse avec ceux d'une cellule saine, on pourra comparer les quantités des protéines présentes et celles qui st surexprimés ou sous-exprimés par la coloration seront celles à étudier pour le cancer.  [...] Mais là ou je comprend pas c'est que si je suis ce raisonnement alors il y a des spots protéiques initiaux identiques alors que moi je crois que tous les spots correspondent à des protéines différents (autrement dit 1 protéine spécifique à 1 spot).  [...]

[Immunologie] Test Elispot

Biensur nous obtenons différentes absorbances qui nous paraissent correctes cependant, la courbe A=f(c) n'est pas conseillée par notre prof alors que notre seule idée d'interprétation était celle-ci.   [...] Non, plus il y a de spots, plus il y a de cytokines produites par tes lymphocytes. Ici, tu as mis un Ac anti-IL2 donc la cytokine en question est l'IL2.  [...]

danger des leds pour les yeux

euh, désolé si je post, un sujet qui a déjà était traité, vis-a-vis du titre, mais c'est pour parler d'un problème qui m'angoisse un peu. En gros j'avais regarder brièvement quelque lampes Led en ignorant d'abord les dangers, puis quand j'ai apprit les risques pour la rétine via les information sur internet, j'ai peur que maintenant que ma rétine est endommager.   [...] Je connais la norme EN 62471 pour avoir déjà fait des mesures sur des spots et comparé les valeurs d'exposition aux seuils définis dans la norme, à la demande de clients fabriquant des spots à LEDs (pour usages professionnels).  [...]

[Biochimie] coloration nitrate d'argent

Résultat intriguant aujourd'hui sur un gel de polyacrylamide... Apres coloration au nitrate d'argent, les protéines sont bien révélées et prennent une teinte marron, par contre une bande très particulière prends au contraire une coloration grise... je n'avais jamais vu ca avant.   [...] Comment se fait-il que ces spots (ou bandes) prennent une coloration grise ça je ne sais pas. Le nitrate se fixe sur les groupements carboxyliques et soufrés des chaines latérales. Peut être une histoire de composition en acides aminés et de concentration.  [...]

Le SIDA, un sujet encore trop tabou

Merci de ta réponse miniju. Alors concernant Philadelphia, c'est un superbe film bien sûr, mais bon il est un peu accentué par rapport à la réalité des séropos aujourd'hui, notamment parce que la prise en charge médicale des patients a bien évoluée et qu'on peut bien maitriser l'évolution du virus.  [...] Disons qu'en France le soucis ne se situe pas tant au niveau médical (il suffit pour les patients de ne pas faire l'autruche et de bien se rendre à leurs rendez-vous de bilan), mais plutôt au niveau psychologique et/ou social.  [...]

[Biotechnologie] quantification des protéines

ils ont fait une electrophorese en 2D, ensuite ils ont autoradiographié le gel, ensuite ils disent qu'ils ont excisé les spots et qu'ils ont fait une scintillation liquide puis denombrement. d'autre part, ils disent qu'ils ont excisé d'autres spots et qu'ils ont analysé les acides aminés.  [...] L'autoradiographie permet de reveler les spots sur le gel 2D. Ils decoupent les spot et ils font une scintillation liquide pour quantifier (la radiactivite est proportionelle a la quantite de proteine), puis ils envoient la bande en MS ou edman pour avoir la sequence en AA.  [...]