• Santé - Souris, Cellules, Transgénèse, Séquence, Protéine, Intérêt

Une expérience de transgénèse chez la souris

On injecte dans le noyau des cellules oeufs de souris (mammifères) le gène GFP, quelques cellules oeufs se développent et donnent des souris transgéniques capables d'émettre une fluorescence verte en présence d'ultra violets.  [...] ca me parait un peu surprenant il manque des info selon moi, ou sinon c'est pour avoir un schéma de protocole général j'ai envie de dire. en gros une des possibilité c'est que tu prélève des blastomères de souris tu réalise sur ces cellules une transgenèse de remplacement c'est à dire que tu remplace la séquence codant pour ta protéine d'interet par une séquence codant pour la GFP (par recombinaison homologue).  [...]

marqueurs genetiques

Le gène marqueur doit entraîner un phénotype facilement repérable. Au hasard, si on obtient une certaine coloration chez le mutant, c'est que le gène d'interêt a bien été intégré.  [...] Et effectivement en transgenese on appelle marqueur une sequence introduite avec la sequence d'interet qui permet de detecter sa presence.  [...]

Mutagenèse dirigée : un Nobel pour des souris mutantes

Un exemple très intéressant est celui des souris non plus KO mais knock-in. Le gène est toujours inactivé mais il l'est par l'insertion de la séquence codant pour la GFP ( green fluorescent protein ) dans la séquence codant pour la protéine. Comme on peut l'imaginer ceci a pour effet de suivre le devenir des cellules dans l'organisme.  [...] Ceci est rendu possible par de la transgénèse classique (insertion aléatoire d'un fragment d'ADN exogène dans un génome). Le transgène utilisé est alors la séquence codante de la Cre sous le contrôle du promoteur d'une protéine spécifiquement exprimée dans le tissu qui nous intéresse.  [...]

[Génétique] manipulation génétique

Le code génétique est éffectivement universel. Le gène de l'insuline humaine, combiné avec un promoteur efficace, sera effectivement transcrit dans des cellules végétales pour produire des ARNm puis ces ARNm seront traduits par les ribosomes de la plante pour produire des protéines.  [...] Il y a toutes les chances pour que ces modifications se passent mal dans une cellule végétale et qu'on aboutisse à une protéine non fonctionnelle. Mais dans certains cas, ça marche. C'est ce qu'on appelle la transgénèse, du maïs avec un gène de bactérie, des drosophiles avec un gène de méduse, des souris avec un gène humain.  [...]

Antigène

càd synthétiser des protéines recombinantes, dans le cas où l'antigène est protéique et je pense que c'est le cas le plus souvent.  [...] Du coup, j'ai fait exprimer ma protéine d'intérêt à une bactérie (E. coli). elle se cultive très facilement et je peux lui faire produire ma protéine en très grande quantité. C'est ce qu'on appelle le clonage moléculaire. Grâce à la transgenèse. Après expression de la protéine, je dois la purifier pour me débarrasser de tout ce qui appartient à la bactérie et me retrouver avec un taux idéalement avoisinant 100% de ma protéine d'intérêt.  [...]

séquence kozak

je souhaite faire une transgénèse chez la drosophile, je dispose d'un vecteur possédant le promoteur qui m'intéresse. De plus, j'ai également l'ADNc d'interet avec les séquence 5' et 3' UTR mais je clone directement à l'ATG. Je vais créer un site de restriction avant cet ATG afin de pouvoir le cloner faut il aussi que j'ajoute une séquence Kozak pour avoir une bonne expression de ma prot ou n'est ce pas nécessaire.  [...]

En vidéo : un embryon de poule nous ouvre son coeur

Le système circulatoire joue un rôle crucial pour la survie d'un grand nombre d'organismes. Il établit une connexion fonctionnelle entre les cellules vivant en milieu aqueux et les organes intervenant dans les échanges gazeux, l' absorption des nutriments ou l'évacuation des déchets métaboliques.  [...] Robert Markus, de l'Académie hongroise des sciences et de l'université de Stockholm, a reçu une mention honorable pour cette séquence. Il est parvenu à rendre les cellules sanguines fluorescentes par transgenèse. Elles peuvent alors être suivies au sein d'un organisme vivant, ici une larve de drosophile Drosophila melanogaster.  [...]

[Génétique] La transgenèse

voilà je suis en seconde et on travaille sur la transgenèse, et plus exactement sur le transfert des gènes de méduses (GFP) dans les cellules des drosophiles. Cependant, je ne comprends pas pourquoi on injecte le gène d'intérêt dans l'embryon et non pas directement chez l'adulte, et pourquoi certaines drosophiles de la génération suivante sont entièrement fluorescentes. Merci d'avance.  [...] - si l'injection et le transgène de la GFP touche une cellule qui est à l'origine de la lignée germinale, une partie de la descendance sera entièrement fluorescente puisque l'oeuf aura le gène de la GFP.  [...]

[Biologie Moléculaire] Séquences de transgenes

s'il vous plait je veut savoir les sequences importantes de transgene pour effectué une transgenese,avoir une proteine recombinante.  [...]

[Biotechnologie] Plasmide recombinant

Pour les cellules de mammifères, on peut également ajouter le Flag ainsi qu'une séquence signal d'excretion, permettant donc l'exportation de la protéine dans le milieu extracellulaire.  [...] 6) On doit tenir compte de séquences introns (tel UTR5') nécessaire pour la régulation lorsqu'on produit une protéine dans une cellulemammifères. Ces séquences doivent elles aussi être prises en compte pour les levures et bactéries Les séquence de régulation EUC seront elles donc prises en compte chez le PROCARYOTES.  [...]