• Santé - Souche, Intérêt, ADN

[Génétique] Production de souris transgéniques

La transgénèse classique où on injecte de l'ADN dans un pronucleus (le mâle je crois). L'ADN s'insère donc de manière aléatoire dans le génome.  [...] est ce que de l'ADN de BAC y compris le gène d'intérêt va être introduite dans l'ADN de la cellule souche.  [...]

[Biotechnologie] Fragilisation d'une paroi de champignon

en effet ça serais plus simple mais cette souche est difficile à faire germer il faut environ 2 à 3 mois pour qu'elle germe d'où l'intéret de pouvoir récuperer son ADN avant qu'elle germe. Je sais bien que le risque de dégradation de l'ADN est important en utilisant des enzymes mais je pense que c'est une bonne solution.  [...] J'ai travaillé sur des Penicillium il y a quelques années de cela et on utilisait un kit d'extraction d'ADN fongique de chez... Sigma je crois. Mais bon, les rendements avaient l'air ridicule, vous aurez peut être besoin d'optimiser le protocole suivant la paroi de vos spores. Faudrait que je déterre mon rapport.  [...]

[Microbiologie] dégradation de l'ADN

1) j'ai constaté que L'adn de la Mycoplasma se dégrade rapidement, j'ai respecté le protocole d'extraction de l'adn mes réactifs sont en bon état je soupçonne l'interférence de la mutation de la souche dans ça est il possible de considérer que les mutations et/ou la présence d'une activité exonucléasique chez la souche soient impliqués dans la dégradation de l'ADN.  [...] 1) J'ai du mal à voir le lien entre mutation et dégradation d'ADN. Peut être tout simplement un protocole peu efficace. A savoir que les protocoles des kits donnent rarement les résultats espérés, faut souvent adapter en fonction de sa bêbête.  [...]

Composition d'une cellule souche

L'interet d'une telle souche est de permettre d'inserer des fragments d'ADN sans se soucier de la méthylation. On peut donc insérer des framgents d'origine divserses sans qu'ils ne soient dégrader.  [...] L'interet d'une telle souche est de permettre d'inserer des fragments d'ADN sans se soucier de la méthylation. On peut donc insérer des framgents d'origine divserses sans qu'ils ne soient dégradés.  [...]

[Biologie Moléculaire] souche d'expression

Je voudrais savoir comment différencie t-on une souche d'expression d'une souche d'amplification de l'ADN.  [...] mais par exemple pour TOP10 je vois parfois plutôt des amplifications d'ADN, parfois des expressions protéiques, ce n'est pas très clair.  [...]

cellules souches

La réplication n'est pas semi-conservative pour les cellules souches et donc elles gardent le marquage du DNA au Hoechst 33342...mais pas les cellules adjacentes.  [...] Le Hoechst (comme le DAPI) ets un intercalant du DNA (=ADN si c'était ta question) donc si la cellule souche garde toujours les 2 mêmes brins, le marquage va rester au fur et à mesure des divisions de la cellule.  [...]

[Microbiologie] isolement

y'a quelqu'un qui pourrait me donner un protocole d'isolement de souche à intérêt industrielle.  [...] vous parlez sur la recherche de nouvelle souche à intéret industriel,ou juste sur l'isolement des souches connues à partir des substrats. si c la derniére.  [...]

[Biologie Moléculaire] Petites questions autour de l'extraction d'ADN plasmidique !

On nous a fait aussi fait faire une électrophorèse avec dans un puit l'ADN plasmidique de la première souche et dans un autre puit, l'ADN plasmidique de la deuxième souche. On nous demande d'analyser ce résultat.  [...] Pour en avoir déjà fait l'expérience, la transfo ou les PCR avec des ADN purifiés dans lesquels il reste trop de solvant ca marche moyen (le solvant gène voire inactive les enzymes).  [...]

[Biotechnologie] Induction vs. expression

Si j'ai une souche ne portant pas de système d'expression dépendant de l'induction à l'IPTG, c'est mal barré Puis, faut aussi voir que dans la souche d'expression en question l'IPTG doit induire préférentiellement le promoteur dont est dépendant le gène d'intérêt.  [...] Donc, si je comprends, tu as un plasmide recombiné provenant de pET. Le mieux ce serait que tu regardes les différentes cartes de plasmides et que tu dessines une carte de ton plasmide recombiné avec les promoteurs et que tu schématises les différentes interactions dans ta bactos d'expression.  [...]

[Microbiologie] banque génomique

triction Eco RI, Eco RV et Pst I. le plasmide ou vecteur d'expression (pBlueScript) a été également traité par les mêmes enzymes. lig+transformation+criblage par pcr. je suis arrivée au séquençage. mon encadreur qui a vu la sé-.   [...] quence obtenue m'a informé que j'ai effectué une erreur lors de la digestion enzymatique. Je ne suis pas d'accord avec elle parce que je me suis dit que les amorces que j'ai pris sont spécifiqUES DU Gène Mm14 de la souche en question, mais je me suis dit que c'est en rapport avec le clone recombinant que j'ai obtenu (ADN digéré par Eco RV).  [...]