• Santé - Sondes, ARN, Complémentaires, Cible

[Identification] taxonomie moléculaire

De toute façon, c'est un peu l'artillerie lourde pour classifier. un Gram ou des test de culture dans certains milieu permettent de bien s'en tirer, mais tout dépend de ce que l'on veut. classification médicale (diagnostic) ou classification phylogénétique (et donc biomol à un moment ou l'autre).   [...] moi j'ai trouver.l'hybridation ADN-ADN,ADN-ARN,mesure de GCp.cent,etudes des ARNr,des méthodes sans amplification de la cible (utilisation des sondes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transcription in vitro de sondes ARN marquées

j'aurai bien besoin de l'avis d'un expert en biologie moléculaire. Je cherche à synthétiser des sondes ARN marquées à la DIG ou à la biotine pour faire de l'hybridation in situ.  [...] Enfin bon, je lance ma transcription et j'ai des super rendements, les DO sont impeccables. Par contre à la migration de ces ARN après purification (lithium/ethanol) je vois des smears, et quelques bandes secondaires apparaitre. Le poids moléculaire de mes transcrits est aussi plus haut qu'attendu (peut-être à cause de la DIG ou de la biotine ).  [...]

[Biotechnologie] sonde ARN hybridation

- les sondes ARN anti sens directement radioactives par un phosphate 32 par exemple.  [...] De +, pour marquer in vivo on utilise quelle sonde il doit bien y en avoir une pour pas tuer notre souris.. surement la sonde froide je sais pas, aidez moi svp.  [...]

[Biologie Cellulaire] transcription comment mettre en évidence la non présence d'intron

Je pensais prendre une collection de trois ou quatre sondes chaudes plus courte, complémentaire à des parties différentes de l'ARN de ce gène. Hybridé, puis faire un blot, et autoradiographie.  [...] Si effectivement il n'y a pas d'introns alors pour chaque piste on aura une seule bande, toujours à 2,6 kb. (si il y a un ou des introns, on aurait plusieurs bandes, ou peut être même aucune, si une des sondes est complémentaire d'une partie intronique).  [...]

[Biologie Moléculaire] intensification du signal en hybridation in situ

[Biologie Moléculaire] intensification du signal en hybridation in situ.   [...] J'ai certaines sondes en S35 très pâle en hybridation (ARN-ARN) et j'aimerais intensifié le signal. Avez-vous des trucs.  [...]

Questions urgentes de biocell

- si un gene GAP subit une perte de fonction, cela entraine une perte de fonction également des genes pair-rule, genes de polarité de segmentation, genes homéotiques et genes maitres dont l'expression est placée sous le controle du dit gene GAP, non.   [...] - le complexe II de la chaine respiratoire n'envoie pas de H+ dans l'espace intermembranaire, donc il ne participe pas à la mise en place du gradient de H+ qui est seulement du aux complexes I, III et IV. correct.   [...]

FISH et mise en évidence de maladies géniques

à votre avis, est-ce que la technique de FISH qui utilise l'hybridation de sondes complémentaires d'une séquence d'intéret permet de mettre en évidence une mutation ponctuelle.  [...] une anomalie génique (et après en +, je ne comprends pas la limite entre les grosses mutations et les petites...ça se chiffre en combien de (kilos de) paires de bases ).   [...]

selection de cellules par la technique de l'hybridation in situ

Ensuite tu détectes tes sondes dans ta cellules pour savoir si ton mRNA cible est présent et donc si le gène correspondant est exprimé ou pas.  [...] On incorpore dans la sonde des UTP-dig. On revele ensuite avec un anticorps primaire anti-dig puis un anticorps secondaire couplé à la peroxydase. Enfin on ajoute au milieu deux reactifs (dont je vous eparge les noms complets) NBT et BCIP. Le produit de réaction est bleu/violet.  [...]

[Microbiologie] Hybridation Southern Blot

Vous parlez d'hybridation avec la sonde C'est le principe clef de cette technique. on crée une sonde taggée (avec un radio-isotope ou un fluorophore) qui cible la séquence d'intérêt. La sonde s'hybride avec la séquence cible, on lave le gel de l'excédent de sondes, puis on redarde où s'est hybrider la sonde relativement sur le gel.  [...] et la sonde specifique a ce gene,comment je la choisie.. une sequence complèmentaire a la sequence de gene(que je cherche) ses specificitè.  [...]

[Biologie Moléculaire] Hybridation in situ

Le design de sonde n'est pas évident. Il vaut mieux ne pas prendre trop gros (500-800/1000 pb). Faire attention aux zones d'homologie. Donc bien étudier la protéine pour voir les domaines spécifiques et taper dans la région d'ARN correspondante.  [...] As-tu un schéma de ta construction car je dois savoir comment tu as orienté ton ADNc et ou se trouve tes promoteurs pour les ARN polymérase. Car ta sonde doit être antisens, pour pouvoir par la suite s'hybrider de façon complémentaire avec l'ARNm du gène que tu recherche.  [...]