• Santé - Sonde, Technique, Hybridation

[Biologie Moléculaire] Rflp

La technique southern, tu recherche une séquence spécifique, tu utilise une sonde complémentaire (marquée), si tu as ta sequence dans le fragment que tu possède, il y aura hybridation de la sonde.  [...] Par contre pour révéler les fragment de RFLP on peut également utiliser la technique du southern par hybridation des fragment d'adn avec des sondes. Est ce que c'est bien ça.  [...]

[Génétique] primers dans une région répétée

Peut-être en changeant de méthode. une restriction serait-elle plus adaptée (quoique si c'est chromosomique, pas évident).   [...] Sinon, en hybridation avec une sonde dans le gène (et une autre le bordant comme témoin positif de la technique).  [...]

[Génétique] SMEAR qui es tu??

sin0n j'ai une autre question concernant la technique d'hybridation est qu'il faut tjs utiliser une sonde pour trouver le fragment que l'on cherche.  [...] En biologie moléculaire, le terme smear désigne la multitude de bandes observées sur gel d'agarose lorsque par exemple ton ARN est très dégradé, un ADN génomique a été digéré par une enzyme à forte fréquence de coupure, que ta PCR est vraiment très foireuse, etc.   [...]

[Biotechnologie] sonde

bonjour, s'il vous plait je cherche un virus pour l' utiliser comme sonde afin de detecter le carcinome lobulaire ou canalaire du sein pour la technique d'hybridation in situ quelqu'un peut m'aider merci.  [...]

[Divers] révélation d'une sonde couplée à la peroxydase

Cette variante de la technique classique du FISH utilise des sondes couplées à la peroxydase ce qui permet, après la première étape d'hybridation ARNr16S-sonde, de réaliser une amplification du signal en utilisant des tyramides fluorescentes.  [...] Si un de vous a déjà essayé ceci, ou alors un autre système d'amplification du signal à partir de peroxydase (sur sonde ou anticorps), j'aimerais bien avoir votre avec avis avant de me lancer dans cette manip.  [...]

[Microbiologie] Hybridation Southern Blot

je veux savoir le protocole de la technique hybridation..j'ai réalisé la technique Southern blot avec des échantillons des bactéries résistante à la betalactamine,je voulais detecter la localisation du gene de résistance en question, donc je dois procédé a faire une hybridation,je veux savoir de quoi il s'agit exactement,le principe,un protocole classique pour comprendre ce que je devrais savoir(c'est pour mon mèmoire).  [...] Vous parlez d'hybridation avec la sonde C'est le principe clef de cette technique. on crée une sonde taggée (avec un radio-isotope ou un fluorophore) qui cible la séquence d'intérêt. La sonde s'hybride avec la séquence cible, on lave le gel de l'excédent de sondes, puis on redarde où s'est hybrider la sonde relativement sur le gel.  [...]

[Biologie Moléculaire] Technique d'hybridation

Quel est le nom svp de la technique qui utilise l'hybridation d'une sonde d'ADN monocaténaire sur des ARNm séparés par électrophorèse.  [...] je pense que cette technique est le northern blot c'est à dire le transfert d'ARN sur membrane de nitrocelluloseou nylon à partir d'un gel d agarose, par capillarité suivie d'une étape d'hybridation à ADN complémentaire et c'est là qu'intervient la reverse transcriptase car c'est une enzyme qui permet à partir d'un ARN d'obtenir un ADN complémentaire.  [...]

PCR en temps réel

il ya l'autre technique de pcr en temps réel qui me pose problème. en sonde d'hybridation, les sondes ne sont pas hydrolysées par la taq alors que c'est le cas en taqman (enfin si j'ai bien compris) et je me demande pourquoi les sondes d'hybridation émettent de la fluorescence quand elles sont cote à cote, c'est bien ça.  [...] Je ne pense pas que tu ais utilisé uniquement une sonde taq man tu as forcément dû utiliser aussi des primers ( sondes d'hybridation pour que la polymérase commence.).  [...]

[Biologie Moléculaire] détection de gènes multicopies

Tout d'abord j'avais penser faire une digestion de mon adn, puis faire migrer, suivi d'une hybridation avec une sonde radioactive et j'aurais alors pu voir si une ou plusieurs bandes s'allumaient. Malheureusement cette technique nécessite une grande quantité d'adn que je n'ai pas.  [...] Pour le principe de la FISH interphasique et bien déjà on peut la faire sur n'importe quel tissu. On dénature la lame avec le matériel génétique et les sondes puis il y a hybridation des sondes spécifiques du gène en question (locus spécifique) sur l'ADN simple brin (en parallèle on contrôle les conditions dénaturantes et la température).  [...]

[Biologie Moléculaire] Hybridation ADNc / ADNg : besoin de confirmer !

Jusque là tout vas bien. sur notre ADNg. on a bien deux sites de restrictions adjacents HindIII qui donnent un fragment de 0,3Kb et qui hybrident avec ma sonde H.  [...] Or notre sonde N d'ADNc de 1Kb (je rappelle NcoI/NcoI) ne possède pas de site de restriction pour HindIII donc il existe un site de restriction pour HindIII dans l'intron de 0,8Kb.  [...]