• Santé - Sonde, Hybride, ADN

biologie moléculaire

si ta sonde hybride les ARN (les duplex ARN/ADN ca existe ), ca vient juste représenter la différence d'expression des gènes dans les différentes celulles,  [...] si ta sonde n'hybride que les ADN, ca pourrait représenter la différence d'accessibilité des gènes spottés, dans les cellules ou le signal est le plus fort on aurait un gène plus accessible qui suppose une plus forte expression.  [...]

[Biologie Moléculaire] Marqueurs dominants et codominants

quelque que soit la forme allélique tous les allèles sont visible pour que la sonde s'hybride à l'ADN de l'individu étudié on pourra donc distinguer l'hétérozygote de l'homozygote ce type de marqueur est dit codominant.  [...] on sait qu'une sonde s'hybride avec le fragment d'ADN possédant une séquence complémentaire à la sienne, par établissement des ponts hydrogène. (dans le cas des RFLP par exemple) comment est ce que certains allèles sont visible et d'autre non.  [...]

Sos....rflp

Sandwich. L'ADN cible est fixé sur une membrane de nitrocellulose puis hybridé avec une sonde.  [...] RFLP sont les initiales de restriction fragment length PCR. C'est une technique qui consiste à amplifier un fragment d'ADN par PCR, puis de le soumettre à l'action d'une enzyme de restriction qui va couper les fragments amplifiés. Selon la présence et la position des sites de restriction, des amplicons qui semblaient identiques à première vue peuvent se révéler différents.  [...]

sonde et enzyme de restriction

ca dépend ou s'hybride la sonde, précisément. Si la sonde recouvre tout le fragment et que le site de restriction le coupe en deux, il y a des chances pour que la sonde s'hybride avec chacun des deux fragments. En electrophorèse, vous aurez deux bandes si les deux fragments sont de taille différentes, sinon il n'y aura qu'une bande (mais deux fragments quand même).  [...] Si on coupe au milieu du fragment on a 2 ADN de même taille donc 1 seul bande après electrophorese et la sonde ne s'hybride à rien. Par contre si après l'electrophorese on fait un Southern, là la sonde intervient, elle s'hybride et allume les 2 fragments de même taille (donc 1 seule bande).  [...]

[Biologie Moléculaire] technique d'hybridation moléculaire

Pour hybrider des sondes, il a fallu que tu mette un produit pour perforer les membranes afin de laisser passer ta sonde non Si tel est le cas, peut être que cette étape n'a pas fonctionné et que ta sonde à hybridé un bout d'ADN d'une bactérie lysée.  [...] .En fait y'a pas eu de conjugaison,j'ai réalisé une digestion d'ADN avec cette enzyme et une migration PFGE,ensuite j'ai hybridé mes fragments avec les sondes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Sperme de saumon

En biologie moléculaire, il est très courant d'utiliser le sperme de saumon dans les techniques d'hybridation des acides nucléiques pour saturer les membranes. Je me demande comment et quel est le principe de cette saturation Est-ce de l'ADN pur qui est dans le sperme qui sert à s'hybrider aux sites vides de la membrane.  [...] Cependant, et je peux facilement me tromper, je ne suis vraiment pas sur, je ne suis pas sur que ce soit de l'ADN qui s'hybride, imagine, si ta sonde se fixe sur l'adn du saumon... mais c'est à verifié.  [...]

Sequence 5' pour un ADNc en Southern Blot

salut, je ne suis pas sure mais le probleme me parrait beaucoup plus simple que ca. quoique c'est pas trés clair..quand tu dit une sonde 5'.qui s'hybride avec l'extrémité 5' de l'adn c ou g...ou bien tu parle de sonde marqué à son extrémité 5'...parceque si c'est le cas ca change tout.  [...] j'explique si la deuxiéme sonde utilisée est marqué à son extrémité 5' et puisqu'elle s'hybride avec le fragment 1.1 adnc et 4.1 dans l'adng.....je pense que la séquence du fragment 1.1 est comprise dans le frg 4.1 et donc ce dernier contient une partie exonique de 1.  [...]

PCR en temps réel

Dans la méthode Taq man il ya a deux molécules à chaque extrémité de la sonde qui fait en moyenne un dizaine de nucléotides, les deux molécules sont donc trés proches mais pas accolées.. lorsque les deux molécules sont trés proches aucune fluorescence n'est possible car l'une empéche l'autre de fluorescer c'est le phénoméne de quenching cependant lorsque la sonde s'hybride elle est dégradée par la polymérase ( qui polymérise a partir des primers) les deux molécules sont donc libérées l'une de l'autre et il y a donc émission de fluorescence dont l'intensité est proportionelle à la quantité d'ADN.  [...] Les sondes ne sont pas hydrolysées d'aprés ce que l'on m'a expliqué les sondes s'hybrident en même temps que les primers (étape de lecture de la fluorecence) puis lors de la polymérisation la température augmente ce qui permet aux sondes de se deshybrider ( c'est étudié pour.  [...]

[Biochimie] La Replication de l'ADN durant l'Interphase

- Après le temps de deux cycles cellulaires, la bande d'ADN c'est divisé en deux. une bande de densitée égale à 1.710, et une autre bande de densitée égale à 1.717. on observe donc la présence d'ADN hybride et léger, l'ADN lourd à disparu.  [...] Il est faut de dire que l'ADN lourd a disparu lors de cette seconde étape. il a été remplacé par de l'ADN hybride dès la première étape.  [...]

[Biologie Moléculaire] Pcr

Je ne comprend pas vraiment...une sonde est complémentaire et antiparallèle de la séquence à étudier donc comment rajouter une séquence à l'extrémité 5' Celle-ci ne s'hybride pas Et puis une enzyme de restriction ne coupe que sur un ADN double brin donc je ne vois vraiment pas comment tout cel s'organise.  [...] C'est simple. l'amorce s'hybride partiellement, la partie qui contient le site de restriction et qui est donc indépendant de la région à amplifier dépasse.  [...]