• Santé - Solution, Tampon, Enzyme, Fonction

[Biochimie] Solution tampon

Dans les réactifs on trouve toujours un flacon d'enzymes ou de substrats et un falcon de la solution tampon.  [...] Une enzyme fonctionne de manière optimale a un certain pH, a une certaine concentration et type de sel, avec ou sans ions (Mg2+...)... La solution tampon est juste la solution dans laquelle l'enzyme accomplit sa fonction de manière optimale.  [...]

Dégradation de l'ADN

J'utilise actuellement la DNase I cependant je ne peux utiliser du MgCl2 dans ma solution or le tampon fourni avec l'enzyme et l'enzyme elle-même est activée en présence de MgCl2.  [...] Le truc, c'est que la structure de l'ADN et le fonctionnement des enzymes est très lié à la présence de Mg2+, du coups, il est très difficile d'isoler l'un de l'autre.  [...]

[Biologie Moléculaire] Digestion enzymatique

2- Il existe plusieurs tampons 10X de digestion enzymatique différents. De quelle façon choisit-on celui qui dooit être utilisé dans notre expérience.  [...] Les tampons sont choisis en fonction de leur compatibilité avec l'enzyme choisis, il existe des tableaux reprenant l'efficacité des enzymes (en %) en fonction du tampon utilisé.  [...]

[Biochimie] Détermination d'une concentration et d'un degré de pureté

On a dosé la B-galactosidase par la méthode BCA en utilisant la BSA comme protéine standard (ou étalon). Bref après préparation des diverses solutions étalon de BSA et des deux solutions de B-galactosidase (0.1ml d'enzyme + 1.4ml d'eau pour le tube 1 et 0.  [...] 2ml d'enzyme + 1.3ml d'eau pour le tube 2) on mesure l'absorbance des solutions et on trace le graphique (f(A)= masse BSA), on trouve 0.09µg de BSA donc de B-galactosidase (problème d'absorbance pour le tube 2 du coup on ne garde que le tube 1).  [...]

[Biochimie] TP phosphatase alcaline

Alors voilà en fait le sujet du TP c'est le dosage de l'activité enzymatique de la phosphatase alcaline et voici ce qu'on à notre disposition.  [...] - Solution d'enzyme (phosphatase alcaline) dans tampon Tris HCl 0,1 M pH 9.  [...]

[Biochimie] Volume réactionnel pris en compte dans une réaction enzymatique.

Mieux vaut-il prendre un volume réactionnel avant ajout d'une solution d'arrêt de réaction, ou un volume comprenant également le volume de solution d'arrêt.  [...] Par exemple, j'effectue une réaction avec 0,5 mL de substrat, 0,5 mL d'enzyme et 2 mL de tampon (volume total de 3 mL à cette étape), que j'arrête avec 1 mL de solution d'arrêt (volume passant de 3 à 4 mL). Les absorbances des différentes solutions sont ensuite mesurées.  [...]

réaction Glucose /GOx

On a fait un TP, dans le lequel on a mis en présence du glucose, de la glucose oxydase (dans une solution tampon). On a fait une mesure électrochimique de l'évolution de l'intensité en fonction du temps.  [...] Et pour calculer la quantité d'H202 qui réagit pendant une impulsion, quelle est la démarche (réaction de Cottrell tableau d'avancement en couplant toutes les réactions ).   [...]

[Biochimie] Une question de ph

je pense que la première proposition est fausse parce que l'enzyme va fonctionner aussi bien chez les deux populations du moment qu'elle est à son ph optimum.  [...] Si le pH de cette enzyme en fonction de la population, c'est dù tout simplement à l'adaptation de l'être humain en fonction des besoins (ceux qui sont en montagne auront plus d'hématies que ceux qui sont en plaine) mais leur pH ne va pas varier. Si dans les hépatocytes le pH varie, ça veut dire que ton sang a un pH différent des autres personnes or c'est embêtant d'avoir un pH acide ou basique, le pH du sang doit rester neutre (par son système tampon) et donc je ne pense pas que le pH varie en fonction des populations (c'est pas parce qu'il est chinois que son pH est un peu acide XD petite blagounette ^^).  [...]

[Microbiologie] digestion de plasmide

j'ai digéré mon plasmide pbluescript avec ECOR I le problème c'est que je me suis rendue compte après que le tampon OPA seul avec le plasmide sans Enzyme provoque une digestion de ce dernier donc le tampon contient des endonucléases sachant que je ne peux pas jeter le tampon parce que sinon je dois patienter 3 mois pour recevoir la prochaine commande une dilution de tampon serait elle efficace pour se débarrasser des nucléases Même si je sais que ce n'est pas la bonne solution.  [...] Si dans le tampon que tu as utilisé y a des nucléases, tu peux balancer ta restriction que tu as faites (car ton ADN est coupé dans tous les sens) et la refaire avec un tampon plus adapté. Si je me trompe pas, un bête tampon H fera l'affaire pour une digestion EcoRI de pBluescript (le tampon est fourni avec l'enzyme).  [...]

[Biochimie] PCR: a quoi servent les differents elements

*Le tampon, c'est pour le bon fonctionnement de l'enzyme. il lui faut un pH particulier qui ne doit pas évoluer au court de la réaction. Or, les dNTP et l'ADN n'ont certainement pas les mêmes propriétés acidobasiques. d'où l'utilisation du tampon.  [...] Les brins d'ADN et surtout ceux d'ARN sont très fragile, d'où l'utilisation de solution tampon pour éviter tout changement de pH pouvant ainsi casser la molécule ainsi pour avoir un pH qui sera optimum à l'action de la Taq Polymérase.  [...]