• Santé - Solution, Concentration, Coefficient, Absorption

[Biochimie] méthode etude macromolécules

On ne peut pas discriminer des protéines en mesurant l'absorbance à 280nm. La seule information qu'on peut en tirer, c'est la présence ou non de protéines contenant des AA aromatiques dans la solution. On peut éventuellement déterminer la concentration d'une solution contenant une seule protéine si on connaît le coefficient d'absorption de celle-ci.  [...] Pendant ma thèse, j'ai exprimé et purifié une protéine avec une forte affinité pour les ARN, donc des acides nucléiques. En début de manip, le pic d'absorption de mon échantillon se situait à 260 nm, ce qui correspond aux AN. Après 2 colonnes si je me souviens bien (une première Ni-NTA pour isoler ma protéine avec un tag histidine) puis une deuxième selon la charge, UnoQ il me semble, bref, mon pic se situait à 280 nm, ce qui témoignait de l'élimination des AN puisque ce pic d'absorption correspond aux protéines (260 VS 280 nm).  [...]

[Biochimie] Protocole de TP un peu flou

J'ai un tp de biochimie la semaine prochaine,je suis en train de le preparer j'ai compris le but qui est de tracer des spectres d'absorption de 3 acides aminés pour etablir leur coefficient.  [...] et on devra etablir son coefficient d'absorption molaire puis la concentration de la solution.  [...]

[Biochimie] spectrophotométrie

Comme tu peux le voir, il te faut le coefficient d'absorption pour déterminer une concentration inconnue.  [...] Il faut donc réaliser une solution étalon de concentration connue pour déterminer le coefficient d'absorption (ou d'extinction) molaire.  [...]

[Microbiologie] Etalonnage d'une suspension bactérienne par absorbance

Voilà je dois faire un étalonnage d'une suspension bactérienne en utilisant l'absorbance (loi de beer lambert). Je sais que je dois diluer ma suspension pour faire une droite étalon en fonction de la concentration mais ce que je ne sais pas c'est comment déterminer la concentration initiale de ma suspension.  [...] epsilon. coefficient d'absorption molaire, dépend de ta solution.  [...]

[Biochimie] Dosage des protéines???

si tu es certain de la purété de ta protéine et que tu connais sa séquence, tu peux aussi déterminer la concentration de ta protéine en faisant son spectre d'absorbance 220nm-350 nm sur un spectro.  [...] Connaissant le coefficient d'absorption molaire (si tu ne le connais pas, suffit juste de taper la séquence de ta protéine dans un logiciel accessible sur le net tel protein calculator ), tu peux facilement déterminer la concentration.  [...]

[Physiologie] Potentiel osmotique

Contrairement, au milieu aquatique où elle va chercher à baisser sa concentration en soluté pour empêcher l'entrée d'eau et ainsi avoir un potentiel osmotique relativement bas.  [...] Si on ne considère que le potentiel osmotique, comme tu le fais, alors la plante va absorber l'eau du sol lorsqu'elle aura un potentiel osmotique plus faible que celui du sol (le potentiel osmotique est l'opposé de la pression osmotique, qui vaut RTxSomme[Concentration en soluté x coefficient d'ionisation du soluté]), ce qui correspond à une plus forte concentration en solutés dans la plante que dans le sol.  [...]

Calcule vitesse initial d'endocytose chez l'amibe

S'agit il de l'HRP en elle même ou d'un substrat (ou produit) chromogène Si dans les manips précedentes vous avez quantifier l'endo/exocytose par spectrophotométrie et que vous avez déterminé la concentration de produit chromogène, ton coefficient d'extinction doit être quelque part dans le sujet.  [...] Cependant si quelque part tu peux trouver une courbe (ou quelques points) qui te donne l'absorbance en fonction de la concentration, tu peux retrouver ce coefficient en utilisant la loi de beer lambert. Il est difficile de trouver un coeff sur internet car il change en fonction des conditions expérimentales (v'est peut être la raison pour laquelle tu trouve des valeurs différentes).  [...]

[Biochimie] Enzyme immobilisée : vitesses initiales

A partir de d'enzymes immobilisées sur une membrane de 1cm de diamètre dans un milieu de 15 ml de glucose, nous avons prélevé 250 µl du milieu à 3 temps données. Puis nous avons mesuré l'absorbance dans un volume final de 1ml (par le biais d'une enzyme rapportrice) puis nous avons tracé l'absorbance en fonction du temps pour déterminer les vitesses initiales pour chaque concentration de glucose.  [...] Nous connaissont le coefficient d'absorption molaire (en M-1.cm-1), ce qui nous permet de calculer les Vi en (M/min). En divisant par la surface de la membrane nous obtenons des Vi en (M/min/cm²).  [...]

Matériels et méthodes | Dossier

La concentration en anion superoxyde est calculée à partir du coefficient d' extinction molaire du ferricytochrome C (E 550nm =2,1.10 -2 µM -1.cm -1 ).  [...] La quantité d'anions superoxyde est mesurée en utilisant la réduction du ferricytochrome C (FC) par cet anion. Cette réaction s'accompagne d'un changement de coloration du ferricytochrome C détecté à 550 nm au spectrophotomètre. La concentration de l'anion est calculée grâce au coefficient d'extinction molaire du FC réduit.  [...]

[Biochimie] Protéine et Absorbance

A = E * l * c où A est l'absorbance, E le coefficient d'extinction de la protéine, l est la largeur de l'écahntillion et c la concentration de ta protéine.  [...] En effet, le BSA ou la gamma-globuline sont en général des standards utilisés pour des Bradford. On en connait la concentration et on peut donc calculer la fameuse constante, puis utiliser celle-ci pour estimer la concentration d'une autre protéine qui soit suffisamment semblable à ces standards(vu que le coefficient d'extinction dépend de la protéine).  [...]