• Santé - Solution, ADN, Extraits

[Biologie Moléculaire] reactifs utilisés pour l'éxtraction de l'ADN et la PCR

Le TE c'est du Tampon d'Elution. Une solution saline isotonique qui sert à rediluer et conserver vos ADN une fois que vous les avez extraits. Il est souvent simplement remplacé par de l'eau.  [...] Alors pour les 94° pendant 5 minutes ça a deux fonctions. bien dénaturer tout l'ADN, et activer la Taq polymérase qui est rendue inactive artificiellement. Ca permet qu'elle commence a etre active uniquement au début du programme.  [...]

La digestion des lipides

10mL de lait, 1mL de solution de tournesol (indicateur de pH), 2 gouttes de soude et 3mL de solution d'extraits pancréatiques préalablement boullis.  [...] On a la présence de l'enzyme ( solution d'extraits pancreatiques) et de son substrat qui est le lipide constituant le lait. On est dans un milieu neutre car la soude est basique et la solution d'extraits pancreatiques est acide d'où un équilibre (je ne suis pas sûr de ça et je voudrais des explications).  [...]

[Biologie Moléculaire] Révélation des extraits d'ADN

je crois que je me suis trop précipitée avant de me poser des questions, les bandes bleues ont finalement révélées une fluorescence bien nette pour les premiers puits qui correspondaient à des ADN extraits avec un kit tout prêt.  [...] par contre la seconde série de puits correspondait à des ADN extraits à l'ancienne avec toute l'armada de solutions que j'avais eu tant de mal à préparer.  [...]

[Biologie Moléculaire] problèmes de PCR , à l' aide!!!

mon extraction a été faite avec instagene matrix, je ne sais pas si vous en avez entendu parler. mon PCR des fois cela marche et des fois non,je veux dire les échantillons, pourtant le témoin positif marche toujours donc je pense que le problème viendrait de mes extraits d'ADN et de leur pureté.  [...] l' amorce que j'utilise est une portion de gène Cytochrome oxydase de 710pb standard pour tous les invertébrés. je m'en sers pour vérifier la présence d'adn dans mes extraits. j'ai faits beaucoup d'essais avant de me lancer dans une série de 900 extractions avec cette méthode.  [...]

[Biochimie] Conservation ADN

Ma question concerne la conservation d'extraits d'ADN suspendus dans du TE, est il possible de les conserver à 4°C (frigo) durant une période de 3 mois environs pour une utilisation ultérieure. si ce n'est pas le cas, comment procéder.  [...] Que les choses soient quand même bien claires. Quand je parle de conserver à 4°C des extraits d'ADN, c'est pour faire des PCR simples type génotypage (c'est à dire en général moins de 500 pb). Pour toute autre application, j'emets quand même des réserves. Les extraits dont je parle sont des extraits propres.  [...]

[Biologie Moléculaire] qPCR sur espèces proches mais différentes

tu pourrais relativiser tes qPCR en utilisant l'ADN des mouches dont tu as extraits les RNA. Tu amplifies l'ADN du gène que tu cherches (2 copies par cellules) et tu exprimes la quantité d'ARN en % d'ADN.  [...] Idealement tu utilises les memes amplicons. en traitant les ARN extraits a la DNase avant la RT et en faisant un controles RT- tu t'assures de ne pas amplifier de contaminants ADN a la place de tes ARN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème génotypage souris mutées

Sinon, votre ADN est il bien dilué, la solution n'est pas visqueuse Dans les PCR la dilution de l'ADN peut être très importante.  [...] Pour le trizol reprenez la fiche technique fournie avec (ou disponible sur le site d'invitrogen), tout est expliqué clairement dedans. On c'est d'ailleurs déjà amusé au labo à l'utiliser pour extraire de l'ADN et ça fonctionne. C'est un peu lourd en revanche.  [...]

Asthme allergique : bientôt un vaccin intramusculaire efficace ?

Les chercheurs ont donc imaginé une technique de vaccination basée sur l' ADN de la substance allergisante. Plutôt que d'administrer des extraits d'allergènes de manière répétée afin de diminuer la sensibilité, nous avons travaillé à partir de séquences d' ADN spécifiques (de l'allergène) responsables de l' allergie.  [...] Quelques études ont montré le potentiel thérapeutique de cette stratégie mais il fallait trouver des techniques s'assurant de la faisabilité chez l'Homme, explique Bruno Pitard, directeur de l'équipe Innovations en Biothérapie de l'Institut du thorax. Le passage à l'Homme exige effectivement que le traitement soit efficace à partir d'une faible dose d'ADN injectée.  [...]

Pb sur un exercice sur l'ADN

Par des méthodes chimiques, on extraits des souris S un acide nucléique,l'ADN. Cet ADN est mis en contact in vitro, avec des bactéries R.Ces dernières sont injectés à des souris. chaque souris meurt de pneumonie et on retrouve dans son corps des bactéries S.  [...] je vais essayé de t'aider. à la question 1 c'est effectivement de l'adn et plus précisément un plasmide (morceau d'adn bicaténaire circulaire).les bactéries s'en servent pour la transformation. ce plasmide contien le gène s/r de virulence.  [...]

ARN en PCR

les enzymes utilisés pour la PCR (ex. Taq polymerase) sont des enzymes ADN dépendante qui ont pour fonction de synthétiser un nouveau brin à partir d'un brin existant (fonction dans la réplication de l'ADN). Le fait qu'elles soient ADN dépendante signifie qu'elle ne peuvent reconnaitre qu'une matrice d'ADN. L'ADN est double brins.  [...] Afin d'effectuer une PCR sur un extraits d'ARN (et observer une amplification) il faut d'abord effectuer une Reverse-Transcription qui permet d'obtenir de l'ADNc (ADN complémentaire) à partir du brin d'ARN.  [...]