• Santé - Solution, ADN, ARN, éthanol

Extraction de l'ADN

Pour compléter la réponse j'ajouterai que l'élimination des ARN est réalisée par des RNase (RNase A) que l'on ajoute au début de l'extraction. Sans ces enzymes tu retrouves des ARN à la fin.  [...] dans le cas de salting out on ajoute du NACL concentré pour précépiter les protéines et on récupère la solution contenant l'ADN + ARN dégradé puis on précipite l'ADN grâce à l'éthanol absolu et on se débarrasse de l'ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN plasmidique

autre question. j'ai aussi trouvé que le phenol à utiliser doit etre saturé. comment doit-on le saturer et avec quelle solutions. et est-que cette saturation permet l'obtention d'un ADN plus pur que celui obtenu en utilisant du phenol non saturé.  [...] Un volume d'éthanol 100% froid est ajouté au surnageant afin de précipiter l'ADN plasmidique pendant 5 minutes à température ambiante. Après 5 minutes de centrifugation à 10000 g, le surnageant est éliminé et le culot est lavé dans une solution Tris 0,1 M / éthanol 70% puis dans l'éthanol 100%.  [...]

Solubilité d'ADN et d'ARN

L'ARN ET l'ADN précipitent lorsque la concentration en ethanol augmente.  [...] Okay. je comprends mieux mtn merci bcp pour votre réponse.   [...]

[Biologie Moléculaire] Questions variées...

A. dans le cadre des pathos à transmission autosomiques dominantes, si un enfant est sain et que l'un de ses parents est atteint il peut s'agir d'une néomutation (je sais bien qu'en général si un de ses parents est atteint c'est lui qui lui aura transmi la maladie dans la plupart des cas mais cependant est-ce possible).   [...] D.L'ADN en solution précipite lorsqu'on augmente la force ionique. (V ou F je ne sais pas le rapport à la force ionique, je pensais qu'on précipitait uniquement l'ADN avec l'ethanol).  [...]

[Identification] Extraction d'ADN

Homogénéiser doucement le contenu de l'Erlenmeyer, puis transférer 10 mL de ce filtrat dans l'éprouvette. Ajuster ensuite le volume jusqu'à 40 mL avec la solution froide d'éthanol à 90° (verser très délicatement et lentement la solution d'éthanol).  [...] Pour la question 3, je ne saurai pas décrire exactement le rôle de chaque produit. Par contre je pense que l'éthanol permet de cristaliser une fois mélanger avec le contenue afin de faire apparaitre l'ADN.().  [...]

[Génétique] Principe de l'extraction d'ARN???

Alors voila pour moi l'ARN en solution n'a pas la même charge selon s'il est en solution aqueuse ou dans de l'alcool par exemple.  [...] L'ADN et les prot résiduelles sont éliminées par les lavages (RW1 et RPE). L'éthanol du tampon permet aussi d'éluer selectivement l'ADN afin de n'obtenir que l'ARN au final.  [...]

[Génétique] Extraction, purification et analyse d'ARN (Nanodrop et bioanalyser)

En fait l'etoh 70% permet a la fois de garder en grande partie l'ARN sous forme non dissoute, mais aussi de le rincer en enlevant une partie des sels qui restent en partie en solution (les 30% d'eau). C'est pour cela qu'on n'utilise pas de l'ethanol pur.  [...] A la fin de cette procédure, qu'est-ce que la solution contient vraiment un double-brin hybride (ADNc et ARN) ou des simples brins d'ADN, mélangés avec tous les autres ARN (messagers, ribosomiques et transfert) Selon moi, il reste des brins hybrides.  [...]

Biochimie : Pourquoi a-t'on besoin d'éthanol pour extraire le fructose du citron?

Je pense que l'éthanol sert à se débarrasser des protéines et des nucléotides (ADN, ARN) qui perdront leur solubilité et précipiteront plus facilement à la centrifugation.  [...] .Mais les électrolytes présents dans la solution vont maintenant pouvoir se lier aux groupements phosphates de l'ADN, ce qu'empêchait l'eau mais pas l'alcool, puisqu'il est moins polaire. Ainsi l'ADN est neutralisé et précipite dans l'éthanol.  [...]

[Biologie Moléculaire] Alcool isoamylique

Là où je ne vous suis plus c'est que l'isopropanol n'aurait pas la même fonction, il remplacerait plutôt l'éthanol absolu qui vient dans l'étape suivante pour précipiter le plasmide.  [...] L'isoporopanol peut effectivemet être remplacé par l'éthanol, mais à 100%et non 70%. L'avantage de l'isopropanol par rapport à l'Ethanol est de pouvoir deshydrater l'ADN avec un volume moindre d'alcool. C'est pour cela que lors d'une précipitation à l'éthanol on rajoute 2 volumes d'Ethanol 100% pour 1 volume de solution contenant l'ADN (ce qui donne 70% env.  [...]

Conservation d'ADN

J'ai cherché un peu sur internet et je suis tombé sur plusieurs site qui me disais de le conservé dans un tampon de tris (trishydroxyméthylaminométhane ) et d'EDTA à un pH=8.  [...] Malheureusement je n'ai trouvé aucune autre information. Combien je dois peser si je veux une solution de 1L et combien mettre d'EDTA (les formules me suffise je peux faire le calcul par la suite) Et aussi j'ai extrait mon adn avec du sel du vinaigre et je l'ai fait précipité avec de l'éthanol, est-ce que ça des risque d'interférer avec mon tampon Et pour finir, je vais le doser par spectrophotométrie UV, est-ce que mon tampon risque de brouiller l'analyse (même si je fais un blanc).  [...]