• Santé - Solubilisation, Membrane, Détergent

[Biochimie] Dialyse

Mon cours dit que l'on doit placer les extraits de membrane solubilisées dans un sac semi perméable. lorsque ce sac est placé dans un milieu dépourvu de détergent, celui ci sort du sac de dialyse par diffusion.  [...] mes questions sont, qu'est ce que exactement la solubilisation de la membrane le détergent est nécessaire pour la solubilisation de la membrane, c'est pourquoi on cherche a s'en débarrasser après.  [...]

[Biochimie] extraction protéines membranaires à partir de tissu cérébral congelé (pour étude de co-IPP)

Puis on utilise un détergent pour ouvrir la membrane cellulaire (triton-x, la concentration dépend de la solubilité de ta proteéine).  [...] 100% d'accord. Après comme tu le dis, délicat dosage extraction - solubilisation - protection. Tu devrais essayer sur des échantillons qui ne sont pas précieux à quelle limite de détergent tu arrives à solubiser ton récepteur.  [...]

[Biochimie] Triton X 100

le triton est utilisé comme détergent et permet la solubilisation des protéines (notamment les protéines ancrées).  [...] Pour les dosages BCA à faible concentration il n'interfère pas, mais souvent des tableaux sont vendus avec le kit de dosage reprenant les interactions éventuelles avec les principaux détergents. Tu trouveras à coup sur le triton x-100. Si tu l'utilise attention aux mains et aux yeux c'est très très agressif même si ça n'en n'a pas l'air.  [...]

[Biochimie] Lysis buffer

Mon buffer de lyse est à base de CSH (Tris 250mM, NaCl 1.25M et EDTA 5mM), le tout dilué 5x avant utilisation, on y ajoute du triton X-100 et un protéase cocktail inhibitor.   [...] Pareil pour moi. Le triton étant un détergent, pas de problème de conservation. A la limite, on ne met pas les détergents dans les solutions stocks sur-concentrées (5X, 10X,...) à cause de problème de solubilisation.  [...]

Vaccins antigrippaux : les virosomes et les ISCOM | Dossier

Les virosomes sont des pseudo-particules virales, constituées de l'enveloppe virale, sans aucun matériel génétique où l' hémagglutinine et la neuraminidase du virus grippal sont intercalées entre deux couches de phospholipides. Ils sont obtenus après solubilisation à l'aide d'un détergent et reconstruction.  [...] Ils ont une morphologie et des capacités de pénétration cellulaire identiques au virus original, et conservent leurs propriétés de fixation au récepteur cellulaire et de fusion membranaire qui sont propres à l'hémagglutinine virale. En raison de l'absence de l' ARN viral, les virosomes n'infectent pas les cellules avec lesquelles ils fusionnent.  [...]

ARNm

Ensuite on me dit que des microsomes rugueux sont traités avec un détergent.Les produits de solubilisation sont déposés sur une colonne d'affinité,contenant un support sur lequel de la SRP a été gréffée.Cette colonne retient sélectivement un polypeptide de 72kDa.A quoi peut correspondre ce polypeptide.  [...] Et puisque cela m'a été demandé.SRP=protéine qui reconnait le peptide signal sur une protéine,pour l'adresser au RER.Elle reconnait aussi une protéine du complexe de translocation sur la membrane du RER.  [...]

[Biochimie] protéine de microdomaines lipidiques

Pour ma part, j'ai passé les congés de Noël au labo car je voudrais a tout pris caractériser la présence de ma petite protéine préférée dans des microdomaines lipidiques membranaires résistants aux détergents (DRM). ces domaines sont très riches en cardiolipine mais très pauvres en cholestérol, contrairement aux rafts classiques.  [...] Je ne peux donc pas utiliser les agents de dispersion classiquement utilisés pour la solubilisation des protéines des rafts tels que le MßCD ou la filipine. Connaissez vous un moyen de modifier la teneur en cardiolipine d'une membrane in situ, de provoquer sa dégradation ou toute modification susceptinle de disperser ce type de DRM.  [...]

[Biologie Cellulaire] Détergent pour cellule humaine

je suis confrontée à un problème. je travaille sur l'expression d'une proteine virale dans des cellules humaines que je ne parviens pas à solubiliser après extraction des protéines cellulaires. Un protocole est déjà au point pour l'expression chez la bactérie et la levure et cette étape de solubilisation permettant d'extraire la protéine des membranes fonctionne et pour cela nous utilisons du Chaps.  [...] ce sont des cellules HeLa qui sont adhérentes, pour répondre à vinc j'ai déjà essayé le laemli qui est compatible avec la spectro mais la solubilisation est mauvaise. Je me demande plutot s'il y a des détergents vraiment spécifiques des cellules humaines.  [...]

RNases et REG

Ne serait-ce pas tout simplement pour la solubilisation Les microsomes étant des fragments de membranes du RE, les RNases vont digérer ces fragments.  [...] généralement dans ce genre d'expérience la RNAse est utilisée à une concentration insuffisante pour dégrader les ribosomes.   [...]

[Biochimie] Electrophorèse SDS page

Je met SDS et urée justement pour ne pas avoir une concentration trop élevée en urée à mettre ce qui pose déjà problème dans mon dosage de protéine que j'effectue avant de déposer mes échantillons, juste après la solubilisation.  [...] J'ai également penser au sels, je fais essayer de résuire encore mes concentrations en urée/SDS/TrisHCl pour ma solubilisation mais ça va être coton.  [...]