• Santé - Séquences, Enzyme, Sites

cre lox et recombinaison homologue

Euuuh, pour moi le système Cre/Lox servait a exprimer/inhiber un gène a un instant t déterminé par l'expérimentateur.. Le gène Cre code pour une enzyme recombinante, qui est flanqué d'un promoteur inductible (Inductible par n'importe quoi, aux choix, température, concentration de glucose, expression d'un facteur particulier...).  [...] Une fois que ce promoteur est activé, l'enzyme est synthétisée et va reconnaître les sites Lox sur le génome. Le gène a réprimer a été préalablement encadré des séquences Lox et l'enzyme Cre nouvellement exprimée va exciser la partie entre les deux sites Lox.  [...]

Pourquoi la cellule ressemble t-elle à une usine ?

Ça explique pour parti l'effet conservateur du froid puisqu'on gèle justement les mouvements erratiques des liquides On parle souvent du cas de figure où l'enzyme se présente bien pour s'attaquer au substrat, mais en réalité c'est un peu au petit bonheur la chance que les deux se rapprochent et se présentent.  [...] Si on prend l'ARN polymérase, il y a beaucoup à dire. Déjà elle reconnaît/s'accroche à des sites de liaison sur l'ADN qu'on appelle séquences promotrices. Ensuite il faut qu'au moins un de ces sites soit disponible, c'est à dire à nu pour ne pas gêner l'arrimage de l'enzyme ou qu'un facteur de transcription fasse la courte échelle pour faciliter ce même arrimage. Plusieurs cas de figure simplifiés.  [...]

[Biochimie] RFLP et application !

Tu as 2 allèles ayant au moins un nucléotide muté dans la séquence et qui se trouve avantageusement dans un site de coupure d'une enzyme de restriction, EcoR I si j'arrive à bien décrypter. Donc dans un cas, l'enzyme peut couper ce site, dans l'autre non.  [...] On distingue les allèles parce que leur séquences sont différente si bien qu'en coupant avec une enzyme qui coupe à certains sites on a toutes les chances d'avoir un nombre variable de coupures, ce qui génèrent des bandes de tailles différentes. Donc hétérozygotes.  [...]

TP biochimie: introduction aux méthodes utilisées en génie génétique

Après pour la carte plasmidique si tu sais par quelle enzyme tu fragmentes tes séquences je penses que tu peux retrouver la taille des fragments. Car si la carte plasmidique est comme une carte de génome généralement tu as des sites de restrictions dessus.  [...] ok alors sur tes 3 plasmides tu as un ou plusieurs sites de restriction à EcoRI c'est un site que va reconnaître ton enzyme EcoRI et va donc couper ton ADN plasmidique à cette endroit précisément. Tu connais la taille de tes plasmides en pb et tu sais sur quel pb se situe le site de restriction.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage avec plasmide

je crois que je confonds les sites de restriction présent sur le plasmide et les enzymes de restriction que l'on ajoute aux amorces pour faire la PCR.  [...] Les sites de restrictions sont en fait des séquences consensus dites palindromiques qui sont donc identiques dans le sens 3'-5' et 5'-3'. Ces séquences soont reconnues par des enzymes particulières très souvent d'origine bactériennes (EcoR1, EcoR5, BamH1...).  [...]

[Biologie Moléculaire] Acide aminé

bonsoir, j'ai une autre petite question. les sites actifs des deux enzymes ont une géométrie différente. comment expliquer que ces 2 enzymes enzyme catalyzent la même reactions mais présentent une spécificité différente au niveaux des substrat.  [...] Donc je suis partit sur le fait qu'un substrat et un site actif on un forme complémentaire, deux enzyme différente avec 2 substrats différentes donnent les deux même produits... ca me laisse perplexe.  [...]

[Divers] la biologie générale

Parmi les séquences suivantes,qui appartient à une molécule d'ADN bicaténaire, laquelle peut etre reconnue comme le site de coupure d'une certaine enzyme de restriction*.  [...] ça me prendrait trop de temps de vous expliquer vos erreurs. je vous conseille de vous documenter sérieusement sur ces bases de biologie.   [...]

[Biochimie] Enzymes de restriction pour détecter les mutations

Il me semble voir la confusion que tu as faite. ATTENTION. il faut que tu prennes en compte la séquence de coupure de l'enzyme EN ENTIER. Ce sont des séquences spécifiques que reconnaissent ces enzymes. Un alignement GAG ou TAG ne suffit pas pour ces enzymes.  [...] enz5. GAGCTC, il y a bien un site de restriction de l'enzyme 5 dans les 2 séquences, mais pas au niveau de la mutation, donc elle ne sert à rien ici.  [...]

[Biologie Moléculaire] Site de restriction

Je vais cloner un gène dans un vecteur (pET21a et pGEX 4-T-2) et je vais ajouter des sites de restrictions dans mes primers avant de lancer la PCR. Quels procédures peut-on suivre pour faire introduire des sites de restrictions dans les séquences de nos oligonucléotides dans le but d'une expression dans Ecoli par exemple le sens de lecture du vecteur/lecture en phase, présence de ces enzymes dans polylinker, enzymes ne coupent notre gène.  [...] Ce n'est pas bien compliqué dans le principe, il s'agit simplement de designer, disons les 20 premières bases de votre séquence et de coller un site de restriction devant. Comme les enzymes de restrictions sont des endonucléases, il faudra aussi bien penser à mettre 6 bases en amont.  [...]

[Biochimie] Preparation et analyse de plasmides

* Les enzymes que tu cites, HindIII et EcoRI, sont appelées enzymes de restriction. Elles vont reconnaître des endroits particuliers au sein de l'ADN. des sites de restriction (des séquences palindromes, il y a une discussion dessus, si je ne m'abuse, donc regarde ).  [...] Ces sites sont connus à l'avance (= on sait donc où ils se trouvent et quelle enzyme les reconnaîtra spécifiquement). Comme tu te doutes, HindIII et EcoRI ne reconnaissent pas les mêmes sites. Donc, en fonction des enzymes que tu utiliseras, tu découperas ton plasmide en morceaux de tailles différentes.  [...]