• Santé - Séquence, Vecteur, Cellules, Malades

[Génétique] Thérapie génique: synthétiser le gène correcteur

Est-ce que quelqu'un pourrait me fournir un protocole pour obtenir un gène thérapeutique que le vecteur va implanter dans les cellules à guérir svp.  [...] D'accord. Je fais un TPE sur la thérapie génique. Le problème c'est que je ne sais pas exactement comment obtenir la séquence saine qu'un vecteur transportera jusqu'aux cellules malades.  [...]

Une maladie immunitaire rare soignée par thérapie génique

Le traitement consiste à prélever chez les malades des cellules souches sanguines porteuses de l' anomalie génétique, puis à les corriger au laboratoire en introduisant le gène WAS sain grâce à un vecteur lentiviral développé et produit par Généthon. Les cellules corrigées sont ensuite réinjectées aux malades qui sont, au préalable, traités par chimiothérapie afin d'éliminer leurs cellules souches malades ainsi que les cellules auto-immunes et faire la place aux nouvelles cellules corrigées.  [...] Pour Marina Cavazzana et Salima Hacein-Bey Abina. Les résultats obtenus dans cet essai clinique multicentrique constituent une avancée thérapeutique importante car ils concernent une pathologie complexe qui affecte la quasi-totalité des cellules sanguines avec des conséquences cliniques dramatiques.  [...]

Le RV du Dr Cocaul : le meilleur anti-inflammatoire, le moins toxique est dans notre assiette

Chaque fois que notre organisme est agressé par une blessure, par une infection bactérienne, virale, par des perturbateurs endocriniens, il développe une réponse inflammatoire à même de réparer les tissus endommagés. L' inflammation se manifeste par la libération de cellules oxydantes appelées espèces oxygénées réactives (EOR) ou de cytokines inflammatoires.  [...] Cet état inflammatoire, s'il perdure, nécessite le recrutement de nouvelles cellules inflammatoires. Il faut donc agir pour casser cette séquence. l'alimentation peut être un vecteur important de l'amélioration clinique.  [...]

[Génétique] Démonstration du role d'un miRNA in-vivo

Justement, par mutagenèse dirigée, avec la même procédure utilisée pour réaliser des souris KO à partir de cellules ES. Vecteur possédant la séquence à insérer avec partie flanquantes homologues à la partie amont/aval du site de recombinaison, et suivant la séquence mutée un gène codant une résistance pour faciliter la sélection des recombinants (Neomycine utilisée la plupart du temps).  [...] 3. valider ta séquence cible en clonant le 3'UTR de ton gène dans un reporter luciferase que tu transfectes avec ton miRNA d'une part et des miRNAs contrôles d'autre part, et tu valides ta cible dans ton 3'UTR en mesurant l'activité luciferase.  [...]

La thérapie génique testée contre une forme héréditaire de cécité

Les lentivirus forment un genre de rétrovirus. On compte le VIH parmi eux. Ils ont la particularité d'incorporer leur génome dans celui des cellules qu'ils infestent. Ils servent de vecteurs en thérapie génique pour qu'ils insèrent un gène humain d'intérêt, ici ABCA4, pour traiter une maladie. AJC1, Flickr, cc by nc sa 2.0.  [...] Lors du récent congrès de la Société française d' ophtalmologie ( SFO ), le spécialiste de l' oeil est revenu sur ces travaux en cours. L'une des difficultés dans l'élaboration du protocole était de trouver le bon vecteur pour amener une version effective du long gène ABCA4 dans les cellules malades.  [...]

Les traitements du futur : interview du professeur Pierre Miossec | Dossier

Pierre Miossec. Parmi les cibles thérapeutiques, il y a les lymphocytes B. Si on détruit les lymphocytes B, le malade va mieux. Le lymphocyte B est en interaction avec d'autres cellules. Si on supprime ces interactions cellulaires, il n'y a plus de cascade enzymatique.  [...] L'utilisation de la thérapie génique en application locale est envisagée. on pourrait injecter un gène grâce à un vecteur viral, pour induire la mort des cellules. Une autre piste est d'induire la réparation du cartilage articulaire. Chez les malades, il existe une inhibition de la réparation, donc il faut inhiber cette inhibition.  [...]

Thérapie génique : les raisons d'un échec

Le protocole de thérapie génétique consistait à insérer un gène fonctionnel aléatoirement dans les chromosomes des cellules précurseurs des lymphocytes T ex-vivo puis de réinjecter ces cellules modifiées chez l'enfant. L'insertion du gène fonctionnel codant pour un récepteur de l' interleukine 2 s'effectue grâce à un vecteur dérivé d'un rétrovirus.  [...] 3. Réduire la quantité de cellules exposées au vecteur pour l'intégration, puis réinjectées chez le malade. Ainsi en diminuant la quantité de cellules souches manipulées, et en caractérisant le site d'insertion du vecteur avant ré-injection, la sécurité des malades devrait être grandement améliorée.  [...]

[Biotechnologie] RNA interference : siRNA, shRNA

- Dans le cas des shRNA, la séquence codant pour le shRNA est contenu dans un vecteur, comment le vecteur est-il intégré dans l'animal A-t-on une insertion dans le génome (dans ce cas il serait possible de faire un genre de Knock-in), ou le plasmid reste-t-il simplement dans le nucleus, et exprime le shRNA (possibilité de passage à la cellule fille ).  [...] En effet le shRNA a besoin d'un promoteur et d'autres séquences pour s'exprimer (moins ready to use que le si). On peut effectivement l'intégrer dans un vecteur adénoviral (qui ne s'intègre pas. effet transitoire) ou lentiviral (qui s'intègre, donc effet stable si on utilise une sélection des cellules ayant intégré le vecteur) ou AAV.  [...]

[Génétique] myopathie de duchenne

Ils baptisent leur méthode saut d'exon. Pour y parvenir, les chercheurs ont fait appel à de l'ARN qui se collent sur un endroit déterminé de l'ARN prémessager. Ils font alors produire les ARN antisens directement par les cellules malades en y introduisant un vecteur viral porteur du gène de l'antisens.  [...] ESSAI CLINIQUE DANS UN AN. En attendant un nouveau bond technologique qui permettrait de fabriquer le vecteur en quantité astronomique, l'horizon commence à s'ouvrir du côté des malades. Mi-octobre, une équipe de chercheurs néerlandaise à Leyden, a annoncé lors d'un congrès de spécialistes, à Bruges, le résultat d'un premier essai clinique de saut d'exon.  [...]

[Biologie Cellulaire] Toujours problème de vecteurs...

on prend donc des cellules COS transformées par l'antigène T de sv40 et on transfecte par un vecteur d'expression portant l'ADNc de sequence des nls potentiels.  [...] Eh bien il me semble qu'une ORI est toujours nécessaire non Comment veux tu obtenir plusieurs exemplaires de ton vecteur pour ton étude sinon.  [...]