• Santé - Séquence, Intérêt, Mutation

[Biochimie] Empreinte à la DNase+ TAMOXIFENE

Si on place une protéine dans le milieu avant digestion et que celle-ci se fixe sur une séquence d'ADN, on observera disparition de certaines bandes. comme l'ADN n'est marqué qu'aux extrémités, on peut savoir grossièrement où la protéine s'est fixée.  [...] Pour détecter une séquence enhancer ou silencer d'un gène d'intérêt, il faut démontrer que la délétion ou la mutation de la séquence entraîne une modification de l'expression du gène régulé (ou du rapporteur ayant pris la place du gène).  [...]

PSDM (PCR mediated Site-Directed Mutagenesis)

La PCR RFLP est une méthode d'analyse de polymorphismes parmi des séquences d'ADN homologues. C'est à dire qu'on fait une PCR sur chaque et qu'on digère les produits avec des enzymes de restriction. Ces produits digérés sont déposés sur un gel pour les faire migrer et comparer les profils de digestion les uns avec les autres.  [...] La PSDM est un outil de modification de l'ADN, elle est utilisée notamment pour modifier la séquence d'un gène d'intérêt dans un plasmide pour pouvoir étudier les effets d'une mutation donnée. Voir par là.  [...]

Définition | Oligonucléotide | Futura Santé

les oligonucléotides servent de sondes dans les expériences de Southern blot. par exemple, on peut utiliser des oligonucléotides marqués radioactivement avec du 32 P, et complémentaires d'une séquence d'ADN d'un gène d'intérêt. La sonde sert à isoler le gène recherché dans un mélange de fragments d'ADN.  [...] les oligonucléotides de synthèse servent aussi à la mutagenèse dirigée. pour cela, un oligonucléotide contenant une petite séquence modifiée d'un gène est utilisé comme amorce pour répliquer le gène d'intérêt. L'amorce s' hybride au gène normal et permettra l'insertion d'une mutation dans le gène après réplication.  [...]

FISH et mise en évidence de maladies géniques

à votre avis, est-ce que la technique de FISH qui utilise l'hybridation de sondes complémentaires d'une séquence d'intéret permet de mettre en évidence une mutation ponctuelle.  [...] une anomalie génique (et après en +, je ne comprends pas la limite entre les grosses mutations et les petites...ça se chiffre en combien de (kilos de) paires de bases ).  [...]

Utilité de la PCR en médecine ?

Je comprend maintenant que la PCR est avant tout un outil pour amplifier l'ADN. Cependant, il semble évident qu'il soit nécessaire de connaître la séquence de la mutation recherchée pour utiliser des amorces adaptées.  [...] Dans ce cas, à quoi sert concrètement le séquençage par la suite (Méthode de Sanger notamment) Si on connaît déjà la séquence de la mutation lors de la PCR, quel interet de rechercher cette séquence à l'aide des didésoxynucléosides et tout le reste.  [...]

[Biologie Moléculaire] complémentation de mutation chez la levure

quelqu'un voudrai bien m'expliquer le pricipe de la technique, j'ai vraiment du mal à m'ensortir. on dit que le principe est d'isoler un mutant de la levure puis de le modifier avec la séquence cible... si il porte déjà une mutation qu'elle est l'interet de le modifier.  [...] On intègre un gène d'intérêt par transformation génétique chez une levure mutée ayant par exemple perdue une de ses fonctions. Puis, on va regarder au niveau du phénotype de la levure si l'introduction du gène a permis la récupération de la fonction c'est à dire la restitution du phénotype ou encore la complémentation de la mutation initiale ayant entraînée la perte de fonction.  [...]

Mutations silencieuses

Moi je dirais plutôt le contraire. une mutation silencieuse est une mutation (dans ce cas) dans une séquence intronique qui n'est pas traduite car ayant été épissé pendant la maturation de l'ARNm.. Du coup, la protéine ne comporte pas de modif dans sa séquence ni dans sa structure.  [...] stricto sensus une mutation silencieuse est une mutation qui modifie la sequence nucleotidique sans changer la sequence en acide aminé. Maintenant certains acides aminés ont des propriétés physico-chimiques similaires. Donc remplacer une ileu par une leu, peut ne pas avoir de grande consequence physiologiques.  [...]

[Biochimie] diagramme à compléter

Agent mutagène engendre mutation qui entraîne nouvelle séquence, d'où nouvel allèle donc phénotype nouveau et caractère nouveau.  [...] pour moi on a un agent mutagène qui va entrainer une mutation donc la séquence nucléotidique d'un gène va être modifier on aura donc une Nouvelle séquence nucléotidique.  [...]

sequencage du genome humain

Le séquençage d'un génome permet de déterminer les séquences (d'ou séquençage) de nucléotides de l'ADN d'un organisme. Les fins de ce séquencage sont diverses selon la personne qui la réalise. Par exemple, il est interessant de connaître la séquence des gènes impliqués dans la division cellulaire, ou dans le développement etc.  [...] Il existe des phénoménes de mutations interchromosomiques qui vont faire que certaines régions des chromosomes ne vont pas se retrouver sur le bon chromosome. Mais là, il y a fort à parier qu'il s'agira d'une mutation qui entrainera de graves conséquences et la personne affectée par cette mutation ne sera plus saine donc on ne la choisira pas pour nous donner un patron de séquence génotypique.  [...]

Question de QCM sur les mutations

C) un changement de nucléotide(s) provoquant la substitution de l'acide aminé codé dans la séquence initiale par un acide aminé possédant des caractéristiques similaires.  [...] Ce qui fait que je suis complètement elbrouillée... parce que si c'était en aval. la séquence codante est quand même correcte, puisqu'elle n'a pas subi de mutation... ou c'est moi qui n'ai rien compris.  [...]