• Santé - Séparation, Fonction, Poids

[Biologie Moléculaire] SDS page

Salut, le SDS a pour fonction dans une electrophorese de supprimer le facteur charge dans la migration et de faire en sorte que les composants les plus legers migrent le plus haut et les plus lourds migrent le moins.Sa permet de pouvoir determiner le poids momeculaire des composants identifiés si on en connait un.  [...] SDS (Dodecyl Sulfate de Sodium) dénature la macromolécule et la charge négativement, permetant donc la séparation en fonction du poids moleculaire.  [...]

[Biologie Cellulaire] Interêt d'une réduction et d'une alkylation pour un gel bidimensionnel

Dans le protocole du gel 2D, juste avant de lancer la migration de la deuxième dimension (séparation en fonction du poids moléculaire) deux étapes de réduction et d'alkylation sont necessaires.  [...] Ma question est simple. quel est l'intêret de ces opérations Est-ce pour rendre les protéines le plus neutre possible et les faire ainsi migrer seulement en fonction de leur poids.  [...]

[Biochimie] Electrophorèse en condition dénaturante et native

1°) la première va se faire alors que la protéine a été chauffé et n'est plus en condition native, fonctionnel. celle-ci va dépendre seulement de la masse de la protéine.  [...] Je pense que lors de l'électrophorèse en conditions natives, la protéine est séparée en fonction de sa charge et de son poids moléculaire(PM) d'où la migration en deux bandes A et B. Quant à son électrophorèse en présence de SDS, la séparation de la protéine est en fonction de son PM seulement, je me trompe.  [...]

Électrophorèse : l'analyse de l'EPO | Dossier

Méthode analytique de séparation développée en 1937 par le biochimiste suédois Arne Wilhelm Kaurin Tiselius, l'électrophorèse consiste à séparer les éléments d'un mélange en fonction de leurs charges électriques et, pour des charges électriques identiques, en fonction de leurs tailles.  [...] Au cours d'une analyse par électrophorèse, des espèces chargées migrent à travers une solution d'électrolyte, sous l'effet d'un champ électrique appliqué entre l'anode et la cathode. Elles sont séparées en fonction de leur charge et de leur masse. En combinant deux techniques électrophorétiques, il est possible d'obtenir une séparation en deux dimensions. DR.  [...]

[Biochimie] éléctrophorèse bidimentionnelle et Phi

La réponse est simple. en pratique ce sont deux gels différents, le SDS PAGE est fait ) partir d'une bande issue de la migration e fonction des pHi. Suis assez clair.  [...] Le gel 1, séparation en fonction du point isoélectrique, comporte un gradient de pH fixé sur l'acrylamide du gel, par exemple pH 3-10. Le gel (4X d'acrylamide/bis acrylamide) ne permet pas la séparation des protéines en fonction de leur taille du fait de la faible concentration en acrylamide.  [...]

[Biologie Cellulaire] Ultracentrifugation

Bonjour, j'aimerais une petite précision sur l'ultracentrifugation. Je voudrais savoir sur quel paramètre s'appuie cette méthode C'est-à-dire qu'il y a séparation en fonction de la masse, ou de la densité, ou quel paramètre.  [...] C'est une séparation en fonction de la densité. C'est un genre de décantation accélérée en quelque sorte. Le fait de centrifuger exacerbe les différence de densité des différents constituants d'un mélange et permet leur séparation rapide. Par exemple, lorsque dans un tube tu mets un liquide qui formera un gradient de densité, du plus dense au fond au moins dense en surface, tu pourras séparer par exemple les constituants d'une cellule qui iront se placer au cours de la centrifugation à l'endroit ou leur densité est égale à celle de ton support.  [...]

[Biotechnologie] proteine recombinante d'interet médical

la protéine sera enfin récupérée puis purifiée (séparation, extraction, purification d'ou l interet de connaitre sa masse moleculaire face à des marqueurs de poids).  [...] Et oui, l'insuline à bien été produite dans E.Coli, le principal problème est la formation des ponts disulfures (6 Cys en tout). Les deux chaînes de l'insuline sont produites séparément, et dans les bonnes conditions, les ponts SS se forment aux bons endroit et mène à la formation d'une insuline active.   [...]

Un grand pas en avant vers un séquençage ultra-rapide de l'ADN

La séparation de l'ADN, qui n'est pas le séquençage, est souvent utilisée en biologie moléculaire pour identifier des fragments particuliers. Pour séparer des séquences, les chercheurs réalisent habituellement une électrophorèse avec un gel d' agarose. soumis à un champ électrique, les fragments d'ADN les plus petits migrent le plus vite, d'où leur séparation en fonction de leur taille.  [...] Kezako. comment faire une analyse ADN L'ADN, cette molécule présente dans toutes les cellules vivantes renferme les clés du développement et du fonctionnement d'un organisme. Nous avons actuellement les moyens de la séquencer, pour mieux la comprendre. Unisciel et l'Université de Lille 1 nous expliquent, avec le programme Kézako, comment percer les mystères de cette molécule.  [...]

[Biotechnologie] Electrophorèse capillaire

Le pH du tampon utlisé est de 8 donc d'après ce que j'ai lu le flux électro-osmotique est maximal et entraîne tout vers la cathode. Je pensais avoir une séparation en fonction du temps mais l'électrophorégramme que j'obiens m'indique l'intensité des pics en fonction des paires de bases.  [...] En fait, selon si elles sont plus ou moins grande, elles sont plus ou moins freinées par le maillage de ton gel d'électrophorèse, du coup elles ne vont pas a la même vitesse vers la cathode et elles se séparent.   [...]

[Biochimie] maldi-tof

Un long tube dans lequel vont voler tes ions. Ces derniers vont être séparés en fonction de leur temps de vol. les lourds iront plus lentement que les légers. Les ions sont donc séparés en fonction de leur masse.  [...] Plus précisément, la séparation se fait en fonction du rapport masse/charge. les doublement chargés iront 2 fois plus vite que les monochargés.  [...]