• Santé - Sens, Enzyme, Restriction

microbiologie (sens anti-sens)

merci pour votre reponse,oui effectivement, mais au fait vous m'avez mal compris, quand j'ai dit sens ou anti sens c'été par rapport a une cartographie de restriction, on a un brin d'ADN qui a été placé dans le plasmide (on sais pas si il a été placé dans le bon sens), on ajoute une enzyme de restriction ((ECOr, bamhI.  [...] on a deux plasmide, on va transplanter pour chacun un fragment d'ADN, on partique l'experience avec des Enzyme de restriction et ensuite on place les fragment dans un gel et on laisse migré(cartographie de restriction).  [...]

[Microbiologie] digestion de plasmide

j'ai digéré mon plasmide pbluescript avec ECOR I le problème c'est que je me suis rendue compte après que le tampon OPA seul avec le plasmide sans Enzyme provoque une digestion de ce dernier donc le tampon contient des endonucléases sachant que je ne peux pas jeter le tampon parce que sinon je dois patienter 3 mois pour recevoir la prochaine commande une dilution de tampon serait elle efficace pour se débarrasser des nucléases Même si je sais que ce n'est pas la bonne solution.  [...] Si dans le tampon que tu as utilisé y a des nucléases, tu peux balancer ta restriction que tu as faites (car ton ADN est coupé dans tous les sens) et la refaire avec un tampon plus adapté. Si je me trompe pas, un bête tampon H fera l'affaire pour une digestion EcoRI de pBluescript (le tampon est fourni avec l'enzyme).  [...]

[Biologie Moléculaire] Comprendre les cartes des plasmides

Salut, avec de la chance dans ta séquence tu as des site de restriction ce qui fait que lorsque tu vas couper une enzyme de restriction en dehors de la séquence et une dedans même si c'est bout francs ou pas tu obtiendras donc un fragment d'une masse connu parce que tu as fais la cartographie de ton plasmide avec le sens A et B, puis par électrophorèse tu détermines lequel des plasmides possèdent le fragement en question avec le bon poid moléculaire.  [...] La si tu veux retaper des sites de restriction, c'est trés utile et tu as également la Taq polymerase qui est une adn polymerase qui te sert a effectuer des PCR avec des amorces dans les deux cotés de chaque brin.  [...]

[Génétique] Pourcentage, fréquence. Besoin de votre aide!

On a 2 souches bactériennes, une résistante et l'autre sensible à la coupure par BamHI (enzyme de restriction).  [...] Un agent mutagene est un compose qui va augmenter les mutations aleatoirement. Il va par exemple modifier les bases (UV) et engendrer une reparation massive de l'ADN par les systemes de reparation, qui vont donc etre moins performants et faire des erreurs.   [...]

[Biochimie] enzyme de digestion-restriction

On parle d'enzyme de restriction. Elle reconnaît spécifiquement des séquences d'ADN appelés site de restriction et induit une digestion de l'ADN.  [...] En PFGE, on peut parler d'enzyme de macro-restriction puisqu'elle génère des macro-fragments d'ADN (de + de 50 kb) résolus par électrophorèse en champs pulsé.  [...]

[Biologie Moléculaire] comment crée un site de restriction pour une enzyme

[Biologie Moléculaire] comment crée un site de restriction pour une enzyme.  [...] s'il vous plait aidez moi à crée un site de restriction de l'enzyme DraI qui coupe dans la région palindromique TTTAAA.  [...]

[Biologie Moléculaire] Marqueurs dominants et codominants

Prenons un exemple simple, une enzyme de restriction qui coupe au site de restriction A.  [...] l'enzyme de restriction coupe au niveu du site de restriction et doit générer 2 fragments de restrictions pour le homozygotes et les hétérozygotes.  [...]

[Biotechnologie] An efficient TALEN mutagenesis system in rice

5. Excise the restriction enzyme-insensitive fragments of the same size as the undigested DNA fragment, and purify them with a DNA gel Extraction kit as described by AXYGEN.  [...] Je suppose que les séquences ciblées par les enzymes de restrictions participent du transgènes, auquel cas on digère la séquence ADN et on regarde ce que ça donne par PCR pour détecter les inserts.  [...]

[Biologie Cellulaire] définition d'une enzyme

voilà mon probleme. en cours notre prof de biocell nous a dit que par définition une enzyme fonctionnait dans les deux sens.  [...] mais c'est bizare parce que les enzymes de restriction et les kinases par exemple... ne fontcionnent pas dans les deux sens non.  [...]

[Biologie Moléculaire] stratégie de clonage.

Je ne comprends pas trop comment choisir les amorces sens et anti sens,trouver la phase ouverte de lecture et les enzymes de restriction.  [...] Merci quand même de m'avoir répondu, je reconnais que ma question est pas très claire mais c'est parce que j'ai un peu de mal a me faire un idée concrète du déroulement du clonage même si je pense avoir plus ou moins compris mon cours, je le relis de plus en plus et ca rentre de mieux en mieux.   [...]