• Santé - Sélection, Banque, ADN

Random priming

En cours, notre prof nous a présenté ça comme étant une technique de sélection par hybridation de gènes d'intérêts à partir d'une banque d'ADN (par exemple).  [...] du coup si l'on souhait sélectionner spécifiquement un gène de séquence non-connue dans un banque d'ADN, la seule méthode serait une sélection par la fonction, non.  [...]

[Biotechnologie] Problèmes sur les notions/calculs de plasmide

Il choisit de faire pousser un certain nombre de colonoes bactériennes sélectionnées afin d'amplifier son plasmide et ainsi disposer d'une grosse quantité de son insert NIACUSE pour le séquencer et vérifier son intégrité. Il récolte les plasmides après lyse alcaline des bactéries et extraction de l'ADN au phénol/chloroforme.  [...] Donc, ici, j'obtiens 14842 pb pour plasmide + insert de la banque ADN génomique et 13361 pb pour plasmide + insert de la banque d'ADNc. Ce qui change mon résultat de la taille de l'insert génomique comparé à ton calcul.  [...]

[Biologie Moléculaire] aide sur la recherche d'amorce (primer) sur genbank (ncbi)

je doit commander des séquence d'ADN en vue de réalisé une reverse transcription RT-PCR sur virus de la vigne. j'ai trouvé la séquense spécifique sur la banque de gene ncbi mais le probleme est comment est ce que je doit selection les deux séquences pour faire la pcr (downstream et upstream) sachant que pour certains virus je trouve la réference du gene dans les articles qui me renvoi vers ncbi mais ne me donne pas les deux séquences.  [...] ben pour faire la RT tu n'as besoin que d'un primer, le second uniquement pour la PCR. Le choix des amorces dépend de ce que tu veux faire ensuite. de la quantification, du clonage, du séquençage, du génotypage.   [...]

[Biologie Moléculaire] Construction d'une banque d'ADNc

La méthode que Delirium m'a gentiement indiqué permet directement une sélection spécifique de l'Adnc avant clonage puisqu'on utilise des amorces spécifiques lors de l'amplification mais la sélection des clones d'intérêt au sein d'une banque d'adn na se fait-elle pas ensuite (une fois la banque construite) par criblage (hybridation avec une sonde specifique) où bien quel est l'intérêt de la banque.  [...] la Banque peut également etre transfecté puis la sélection se fait sur la base des critères des cellueles transformées Expression d'un oncogène rendant les cellules immortelles ou poussanrt sur des milieux sélectifs et autres.  [...]

[Biotechnologie] Concrètement c'est quoi une banque d'ADN

Une banque d'ADN est exactement ce que tu dis, un enorme mélange de fragments d'ADN aléatoire représentant un génome d'un organisme donné. En general on suppose qu'il y a tous les genes de l'organismes concerné quand la taille cumulée des fragments de la banques est egal a au moins 5 fois la taille du génome.  [...] Sinon cribler une banque ca reviens a ouvrir 10000 boites d'allumettes (les alumettes etant les fragments d'ADN constituant la banque) et de chercher parmi toutes ces allumettes celle qui est differentes des autres.  [...]

[Génétique] puces à ADN

J'ai cru comprendre que l'on doit tout d'abord fixer sur la lame de la puce des fragments d'ADN des gènes d'interets (mais je ne comprends pas bien comment on fait.. doit-on connaitre le génome de la cellule pour pouvoir ainsi sélectionner les gènes recherchés).  [...] Mais dans le cas d'une espèce bizarre non séquencée... Y'a pas trop le choix, il faut bien fabriquer une puce à partir de ce que l'on a (banque d'ADNc, ou d'ADN génomique,...).  [...]

[Biochimie] banque d'ADN

comment fait on une banque d'ADN à partir de phage alors que ceux ci lysent la bactérie pourtant n'est ce pas les bactéries recombinantes qui forment la banque.  [...] Le phage lambda sert de vecteur. Ils portent l'ADN recombinant, vont infectés les bactéries hôtes et se multiplier. Cela permet de constituer une banque de phages clonés.  [...]

[Génétique] msg pout tous

slt j'ai besoin d'informations pour mon mini projet est-ce-que vous pouvez m'aider.   [...] donc c'est quoi une banque d'ADN,vecteurs de clonage et comment construire une banque d'ADN.  [...]

[Génétique] Manipulation génétique chez procaryote

Une banque genomique de la souche sauvage (WT) E.Coli est prepare dans un plasmide pBR322 qui confere la resistance a l'ampiciline(Amp R). Les plasmides recombinants de la banque sont transforme dans la souche L3 de E.Coli dont le genotype est polA. Trois clones L3 Amp R sont ainsi selectionés.  [...] L'analyse de restriction des fragments chromosomiques inseres dans chacun des plasmides recombinants laisse penser que la meme region chromosomique a ete a chaque fois cloné. Un de ces plasmides, nommée pL31 est gardé pour une étude plus detaillée.   [...]

[Biologie Moléculaire] Protéines se liant à l'ADN???

je recherche un site qui offre une banque de données qui permet de rechercher les proteines qui se lient à l'ADN, que ça soient des facteurs de transcription (FT) ou autres... Il y a Consite mais il offre que des FT, je recherche autre chose du meme style.  [...] Les promoteurs étant des régions de l'ADN fortement modulées par des facteurs trans, cette banque de données te fournira déjà pas mal d'informations sur ce que tu recherche. Promoter database. Cette banque de données est vaste. En plus si tu veux fouiller un promoteur, tu peux aller chercher des régions à -10000 ou plus, c'est énorme.  [...]