• Santé - Résultats, Dosage, Protéines

extraction et dosage des protéines totales

Je voudrais savoir quelle quantité de protéine on peut s'attendre à obtenir après extraction à partir de neurones. 1µg/million de cellules 1mg/million de cellules.  [...] J'ai ensuite trouvé que 40% d'une cellule est constituée de protéines. Mais bon il me manque encore le poids d'une cellule et le rendement d'un extraction... hin hin... je sais pas si c'est la bonne direction pour répondre à ma question.  [...]

[Divers] Problème de comparaison de résultats dosage protéique

[Divers] Problème de comparaison de résultats dosage protéique.  [...] Lors du dosage BCA (dosage colorimétrique avec une gamme étalon) j'ai des mg/mL de solution ressolubilisé tandis que pour le Kjeldahl, j'ai des % de protéine du produit fini.  [...]

[Biochimie] Dosage spectrophotométrique des protéines

Il y a le nanodrop pour doser les protéines. Dans le principe, cela reste de la spectrophotométrie puisqu'on dose l'absorbance d'une goutte d'échantillon déposée sur une lentille qui émet un faisceau de lumière à 280 nm. L'avantage est qu'il n'y a pas besoin de cuve en quartz pour le dosage (à la différence des spectrophotomètres classiques pour le dosage de protéines sans coloration), il n'y a pas besoin de coloration, et surtout très peu de matériel biologique est utilisé pour le dosage puisque le volume de la goutte déposée pour le dosage est de l'ordre de 1 à 3 µl.  [...] Ton nanodrop a-t-il une longueur d'onde réglable Car dosant les protéines recombinantes, ARN et ADN, je pensais que cet appareil ne fonctionnait qu'à 260 et 280 nm. Le dosage de Bradford se faisant plutôt à 600 nm, si ton nanodrop ne peux pas se régler à cette longueur d'onde, ces résultats ne m'étonnent pas.  [...]

[Biochimie] Dosage des protéines totales méthode de Bradford.

Nous avons réalisé avec le sérum d'albumine bovine SBA comme protéine standard, une courbe étalon à six points de concentrations croissantes ( 0. 0,25. 0,5. 1. 1,4. 2 mg SBA/ml).  [...] j'ai une question à vous poser, lors de la préparation de la gamme étalon SBA est ce qu'on utilise pour la dilution l'eau distillée ou le tampon avec lequel on a fait l'extraction des protéines.  [...]

[Biologie Cellulaire] Western blot + extraction proteine

Je suis d'accord avec Vinc, mais si je me trompe il est impossible de doser ces protéines dans le laemlli... Alors si on veut faire un dépot avec une quantité précise, je préconiserai le RIPA-N, puis un dosage protéique, et enfin la reprise du volume nécessaire de protéines avec un volume équivalent de laemlli 2X.  [...] Oui le dosage dans le Laemli n'est pas possible en effet, mais il n'est pas forcément necessaire de doser les protéines. L'expérience du manipulateur ainsi qu'un contrôle adapté en western permettent d'obtenir un résultat impeccable (je ne fais que des western et j'ai arrêté de doser mes protéines assez rapidement).  [...]

ELISA courbe d'etalonnage

moi aussi je rencontre beaucoups de problèmes la dessus,on a fait récemment un TP sur caractérisation biochimique et immunologique des protéines,alrs on a commencé par un dosage des protéines par la methode de BRADFORD ou on doit utiliser un témoin,4 tubes essay et deux autre de dilution de l'immun serum 1/10 et 1/100 respéctivement,on a procédé par la suite à une lecture sur spectophotometre à 595nm(pourquoi plus exactement 595nm en sachant que le bradford est a 428 si je me trompe pas) on a obtenus ls absorbances des c tubes avec lesquels on doit tracer une droite qui ne passera pas par le zero (pourquoi),avec tous ces petits soucis je ne sais méme pas comment interpreter mes resultats.  [...] cher micha,fais ton 2eme graphe a l'ancienne sur le papier,avec les resultats que la prof a donner, Do=f(1/dilution) et tu l'obtiendra,quand au 595nm,c la longeure d'onde a la quelle absorbe le reactif de bradford une foi lier a la proteine (il devient bleu) car c quand il est libre quil absorbe a 428 (il est normalement rouge),voila,bonne chance.  [...]

[Biochimie] Dosage acide lactique d'un yaourt

Nous avons réaliser un dosage d'acide lactique d'un yaourt industriel et d'un yaourt maison. Nos résultats ne sont pas cohérents.  [...] Mettons que le pK A de l'acide lactique soit supérieur au pK i des protéines du yaourt - ce que je suspecte - alors le premier saut de pH correspondra uniquement au dosage protéique, et pas lactique. Ce ne sera donc qu'au second saut de pH qu'on dosera l'acide lactique.  [...]

[Biochimie] dosage des proteines

faire un dosage de proteine par la methode lowry ou autre methode de dosage.  [...] Pensez-vous que cela pose problème de resuspendre le culot de protéines dans de l'acide (sulfosalicilique 1.3%) avant d'effectuer le dosage.  [...]

[Biochimie] électrophorèse

Oui c'est possible que ça vienne de là. Ce qui est possible aussi, c'est que vous ayez contaminé les autres puits (que les protéines que vous avez disséminé lors du pipetage se retrouvent dans les autres puits). A votre place, je recommencerai la manip pour être certain du résultat.  [...] Question bête mais bon. concernant votre échantillon. êtes-vous sûr qu'il y avait des protéines Avez-vous fait un dosage Peut être que l'élution sur la colonne chromatographique n'a rien donnée.  [...]

[Biochimie] NanoDrop

Tu peux faire les dosages proteiques par colorimetrie. Il est preset pour diverses methodes (bradford, BCA, lowry etc). Il t'autorise evidemment a faire une gamme pour ta quantif si celle presente ne te plait pas.  [...] donc à priori pas de problème pour doser des protéines à 480nm. Il faut juste paramétrer le soft vu que ça ne doit pas être dans les programmes de dosage classique.  [...]