• Santé - Restriction, ADN, Séquences

Définition | Plasmide | Futura Santé

Un plasmide est une molécule d' ADN circulaire double brin, qui possède obligatoirement une origine de réplication, afin qu'il puisse se répliquer de manière autonome dans la cellule et un gène de sélection pour qu'il ne soit pas perdu par l'organisme au fil des multiplications cellulaires.  [...] Les plasmides utilisés en recherche biomoléculaire peuvent être bien plus complexes, et notamment contenir également des cassettes de clonage, qui sont en fait des séquences courtes reconnues par des enzymes de restriction capables de couper l'ADN au niveau de ces séquences.  [...]

[Génétique] Notion d'insert et de vecteur

J'ai eu une seance de TD de genetique avec des exercice concernant ces notions mais je n'ai pas eu de cours auparavant, et mon professeur est flamand et sans etre mechant, malgres mes questions impossible d'obtenir une reponse que je puisse comprendre.   [...] Donc voila on me parle d'enzyme de restriction coupant l'adn celon des sequences, de vecteur, et d'un insert qui correspondrait a une sequence de nucleotide en rapport avec la coupure enzymatique... et je ne comprend pas vraiment cette histoire de insert.  [...]

Les empreintes génétiques !

Coucou, je suis pas super calé la dessus, mais je sais qu'il faut utiliser des enzymes de restrictions pour couper les séquences d'ADN spécifiques voulues, puis de chauffer pour séparer les 2 brins, avant de faire une électrophorèse sur gel d'agarose en oubliant pas d'ajouter un agent intercalant comme le BET.  [...] 3) On utilise une enzyme de restriction qui a la propriété de couper les brins d'ADN quand elle rencontre une séquence spécifique. Comme les régions ciblées sont variables selon les individus, la localisation des séquences à couper est différente d'un individu à l'autre.  [...]

activité endonucléasique

Bonjour, qu'est ce qu'un complexe enzymatique avec activité endonucléasique merci de m'éclaircir.   [...] quel type de complexe. Une endonucléase est un enzyme qui coupe les acides nucléiques (ADN ou ARN) au sein même de la molécule (alors que les exo c'est à partir des extrémités). Tu as notamment des endonucléases de restriction qui elles reconnaissent des séquences spécifiques.  [...]

[Génétique] Questions à propos de la thérapie génique

Ce document parle aussi de gènes de sélection qui contiennnent des sites de restriction () mais je ne pense pas que ce soit de notre niveau.  [...] Concernant les sites de restriction, ce sont des séquences d'ADN double brin qui sont reconnues et clivées par des enzymes bactériennes.  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

Faire une électrophorèse seule ne permet pas de différencier un ADN A d'un ADN B (même si c'est l'ADN humain et l'ADN d'une fougère...). il faut soit digérer l'ADN à l'aide d'enzyme de restriction (comme l'a dit noir-ecaille), soit utilisé la PCR pour amplifier certaine séquence (comme l'a dit TanguyE).  [...] Pour les enzymes de restrictions, on sait qu'elles sont les séquences qu'elles reconnaissent. Pas forcément celle qu'elle coupe. Il y a une petite nuance, mais qui existe, certaine enzyme de restriction étant capable de couper l'ADN à plusieurs dizaines paires de bases de leur lieu de reconnaissance.  [...]

[Génétique] endonucléases

Une endonucléase de restriction peut elle couper dans un exon.  [...] Bien sur, l'endonucléase ne reconnait que le type (ADN, ARN), l'orientation et la séquence d'un acide nucléique. Les séquences introniques et les exons mais aussi l'ADN non codant ont exactement la même structure et ne diffèrent que par leur rôle. Donc la présence d'un site de restriction suffit.  [...]

Expériences en génétique…

Il n'y a pas besoin de connaitre la taille du gène (d'ailleur tu fais migrer de l'ADN ou de l'ARN et pas forcément un gène) car tu fais migrer un marqueur de taille à coté. On utilise l'électrophorèse par exemple pour contrôler les manips que l'on fait. Par exemple si tu veux voir si un gène que tu as voulu insérer est bien présent dans un plasmide, tu peux faire une restriction en coupant dans le gène hypothètique et tu calcules la taille des fragments obtenus en supposant que ton gène est présent.  [...] On utilise alors des enzymes qui coupent l'ADN au niveau de séquences précises et connues (enzymes de restriction). Ensuite on fait migrer l'ADN sur gel d'agarose, en fonction de sa taille, et on le révèle aux UV grâce à une molécule fluorescente, le Bromure d'éthyduim (BET).  [...]

Mémoire en génétique : questions diverses

Ces derniers jours, j'étudie les empreintes génétiques, notamment le polymorphisme de l'ADN, les SNP et les séquences répétées en tandem. Je souhaite parler du polymorphisme de longueur des fragments de restriction, mais j'ai beau faire des recherches, je ne comprends absolument pas de quoi il s'agit.  [...] Après de nombreuses recherches, voilà ce que j'ai compris. les enzymes de restriction ont la faculté de couper la molécule d'ADN à des endroits spécifiques. Par exemple, une enzyme va couper entre G et A, c'est le site de restriction. Si on prend deux fragments de molécule d'ADN de deux individus différents.  [...]

Il y a t'il de l'ADN animal dans les excréments humains ?

Je ne suis pas un expert en la matière, cependant, certaines séquences peuvent être propre auxdits animaux que tu vas digérer, il faut donc trouver au préalable les primers correspondant et amplifier la région. Ils sembleraient que pour les souris, à la fin du transit, les enzymes de restriction laissent au final des morceaux d'adn de la taille d'un gène donc je pense qu'après une extraction d'adn des feces puis une PCR tu peux découvrir ce que la personne a mangé.  [...] Alors bien sûr pour que ce soit dangereux il faudrait que ce gène s'intègre dans une cellule souche. Même si cette séquence d'ADN n'est qu'un fragment de gène, il peut s'intégrer au niveau d'un promoteur, au milieu d'un gène, et entrainer un dysfonctionnement intestinal (même si très localisé).  [...]