• Santé - Résistance, Promoteur, Réplication

[Biotechnologie] Construction plasmidique

En ce qui concerne mon plasmide, il doit contenir. Un Promoteur, une Origine de Réplication, et des gènes de résistance ou de levé d'auxotrophie selon l'organisme.  [...] Mon cour traite en fait des différents plasmides, et des éléments qui le compose ( promoteur fort ou non, adn polymérase, gène de resistance etc...) ainsi que les transformation génétique chez les levures et bactéries.  [...]

[biologie moléculaire] Numérotation d'un plasmide

Quant à la position du gène de résistance, il faut veiller à ce qu'il soit pas trop près de la MCS, suffisament loin du gène rapporteur s'il y en a un- pour éviter que le gène de résistance soit exprimé à partir du promoteur qui précède la MCS- et qu'il y ait un terminateur après pour que les transcrits du gène de résistance n'altèrent pas la réplication.  [...] Les genes de resistance sont sous le controle de quel type de promoteur tu peux me donner un exemple parceque souvent sur une carte de plasmide le promoteur du gène de resistance n'est pas placé du coup parfois même je me demande comment sa marche.  [...]

[Biochimie] Vecteur d'expression pour une proteine recombinante

Vu que j'ai peu de chance d'avoir un site de restriction juste apres mon promoteur et juste avant mon terminateur, cela signifie que l'ARN polymerase va me polymeriser un ARNm qui contient des codons supplémentaires par rapport à l'ARNm issues de la transcription de l'ADNc uniquement.  [...] Ici tu peux voir entre le promoteur et le terminateur ce MCS qui contient plein de sites de restriction. Il y a aussi l'origine de réplication (ColE1), un gène de résistance à la néomycine (neoR).  [...]

vecteur d'expression

Il existe des cellules qui ont été modifié pour les rendre permissive pour SV40(ex. HEK293T)... mais si tu veux exprimer ton gène il faut les transfecter avec un vecteur contenant un promoteur SV40.  [...] Le vecteur d'expression comprend la partie codant de ton gène, ainsi que des séquence non codante. promoteur, origine de réplication, polylinker... et souvent des gènes de résistances (ampiciline, neomycine...) ou des tag.  [...]

régulation de l'expression de dam par dnaA

De plus, la protéine DnaA s'autoréprime. avant la réplication, elle est en concentration maximale. C'est ce qui permet l'initiation de la réplication, mais aussi le bloquage de l'expression du gène dnaA.  [...] Enfin, comme le gène dnaA est situé près de l'OriC, sa réplication se faire juste après l'initiation. Or son promoteur contient, lui aussi, des sites GATC. ils sont donc très rapidement hémiméthylés, ce qui rend le promoteur inactif. Il faut donc attendre que Dam méthyle le promoteur dnaA pour que la synthèse de DnaA recommence.  [...]

Quelques questions

16 la réplication et transcription procaryote nécessite toutes les deux l a dissociation de la structure nucleosomale.  [...] Pour le QCM, tu pourrais répondre ce que tu crois juste, et seulement après, les gens du forum pourrait te corriger le cas échéant.   [...]

[Génétique] vecteur de plasmide

Dans ce cas pour différencier ces bactéries de celles qui ont le plasmide recombinant avec ton insert, on fait ce que l'on appelle le test blanc-bleu. Dans ton plasmide tu as un gène de résistance, un gène lacz avec son promoteur et d'autre partie encore.  [...] Quand tu insères ton ADN tu vas l'inséré au milieu du gène lacZ sous la dépendance de son promoteur. De ce fait en rajoutant du X-gal dans ton milieu (contenant un antibiotique correspondant au gène de résistance) au moment de l'ensemence tu obtiendra 2 types de colonies.  [...]

[Biotechnologie] Composants d'un vecteur d'expression eucaryote

Ensuite, on a évidemment notre gène d'intérêt, son promoteur eucaryote, le signal de terminaison de la traduction, les sites de restriction (MCS) et le gène de sélection (auxotrophie le plus souvent ou résistance à un antibiotique). J'en suis à 7 (ou 6 si on compte les ORI pour 1).  [...] J'aurai mis un gène de sélection (un gène de résistance aux antibiotique ou un gène du métabolisme pr la levure) et un gène rapporteur, un promoteur, MCS (un site de clonage multiple). Tu peux mettre le + 1 avec la flèche juste après le promoteur.  [...]

[Biologie Moléculaire] Code génétique

En fait, ce sont les promoteurs des gènes qui dictent leur expression et certains sont constitutifs, d'autres tissus spécifiques, d'autres cycle cellulaire spécifiques, d'autres inductibles,... Il n'y a pas d'expression des gènes quand l'ADN est condensé en chromosomes (pendant la mitose par exemple) car la chromatine est alors inaccessible.  [...] Avant de poser d'autres questions, je vous conseil d'aller faire un tour sur wikipédia (ou autre) et de chercher gène, réplication, transcription, traduction, promoteur, épissage,  [...]

[Biologie Moléculaire] Séquence du promoteur du gène résistance à l'ampicilline

Ton gène est sous la dépendance de quel promoteur Son propre promoteur (P bla ) Si tu regardes la séquence de ton plasmide, tu risques d'y troruver quelques infos utiles.  [...] Je dois faire une restriction avec une enzyme et il ne faudrait pas que ça me coupe le promoteur. Je dois vérifier que l'enzyme est assez en amont du promoteur.  [...]