• Santé - Réponse, Fragment, ADN

[Génétique] ADN polymérase

ma question est surement très bête mais j'arrive vraiment pas à comprendre. dans un QCM on me demande quelle ADN polymérase est indispensable à la réplication de l'ADN, je pensais (très sure de moi) que c'était l'ADN pol 3, mais non... la réponse est ADN pol 1 Pourtant c'est bien la 3 qui sert pour l'élongation de l'ADN du brin avancé et qui permet la formation des fragment d'Okazaki non.  [...] La ligase vient achever le travail en catalysant la formation d'une liaison phosphodiester entre une extrémité 3'OH d'un fragment d'ADN et une extrémité5' phosphate d'un autre fragment.  [...]

[Microbiologie] mutagenèse dirigée par pcr

j'ai effectué une mutagenèse dirigée par pcr pour modifier trois codons de la séquence de la souche Mycoplasma meleagridis je trouve toujours des difficultés lorsque je mute plus qu'un codon en plus au moment de l'assemblage je trouve toujours des bandes non spécifiques pourtant j'ai modifier les paramètres physiques (température) ainsi que les paramètres chimiques.   [...] merci pour la réponse mais je tiens à vous informer que je vais effectuer une mutagenèse dirigée par pcr à partir d'un fragment d'adn qui n'a pas été préalablement inséré dans un plasmide tel qu'il est mentionné dans le kit pouvez vous me donner plus d'éclaircissement sur ce sujet.  [...]

[Biotechnologie] Electroporation

J'avais posé la même question à un de mos profs il y a deux ans, mais dans le cas de la transfection via le précipité de phosphate de calcium.On m'avait répondu que le passage de l'ADN depuis le cytoplamse vers le noyau était un processus incompris. Je ne sais pas si entre-temps, des recherches ont apporté un début de réponse à la question.  [...] Donc la réponse à la question serait peut-être qu'en électroporation, le fragment inséré attend dans le cytoplasme (en admettant qu'il ne soit pas détruit par des nucléases) et puis à la mitose, la membrane nucléaire se fragmente, ce qui permettrait au brin d'approcher l'ADN de l'hôte.  [...]

[Biologie Cellulaire] adn polymerase 1

J'aurai aimé savoir si le fragment de Klenow possède bien l'activité exonucléasique 3'-5' et l'activité polymérase 5'-3' Et donc que la deuxième activité exonucléasique 5'-3' que vous citez est sur un deuxième fragment de l'ADN Pol I.  [...] Bonjour, je voulais savoir si la deuxième partie de l'ADN polymérase qui comprend une unité exonucléase 5'3' est appelé domaine additionnel de l'ADN polymérase Et donc est il juste si je dis que l'ADN polymérase 1 est constitué de deux fragments. le fragment de Klenow qui comprend une unité polymérase 5'3' ainsi qu'une unité exonucléase 3'5' et le domaine additionnel qui comprend une unité exonucléase 5'3' Je vous remercie d'avance pour votre réponse, ma question peut sembler répétitive mais j'aimerais simplement confirmer ce point pour savoir si j'ai enfin compris ^^.  [...]

[Biologie Moléculaire] le séquençage??? une petite question

et en plus. une fois que la premiere polémirisation fait. donc on obtient une seul fragment...apartire de ça ou se fait les autre fragment que en va séparer par l'ectrophorese.  [...] Même réponse, je pense que ton interrogation vient du fait que tu négliges le fait que la réaction ne se fait pas sur un fragment d'ADN, mais sur plusieurs millions.  [...]

[Génétique] Plusieur question?

Oui c'est ce qu'il falait faire, c'est de transcrire la séquence d'ADN en une séquence d'ARN puis de traduire chaque triplé de nucléotides en acide aminé qui lui correspond.  [...] Pour la question ''Comment nomme t'on l'emplacement d'un géne d'une proteine sur un chromosome.'', si je ne m'abuse, il s'agit d'un locus.   [...]

[Biologie Moléculaire] Construction Banque ADNc

On peut faire un traitement au NaOH, qui détruit l'ARNm et on utilise une ADN polymérase pour avoir le 2e brin d'ADNc, via l'extrémité en épingle à cheveux du premier brin d'ADNc.  [...] Normalement c'est le fragment de Klenow qu'on utilise généralement sous le terme ADN pol I, non L'ADN polymérase I est une enzyme qui d'une part polymérise l'ADN à partir d'une matrice mais qui d'autre part coupe l'ADN grâce à son activité exonucléasique 5'-3'.  [...]

[Biologie Moléculaire] Réplication de l'ADN chez les eucaryotes SOS

juste un petit hic tu me dis que le fragment de Kleenow est une enzyme amputée de sa fonction exonucléase 3'5' et pourtant dans mon cours il est explicitement écrit. Le fragment de Kleenow est une sous-unité de l'ADN polymérase I. Il a une activité polymérase 5'3' et une activité exonucléase 3'5' Ce il ne peut correspondre qu'au fragment de Kleenow car si ça avait visé l'ADN polymérase I cela aurait été elle.  [...] Et on est bien d'accord que ce fragment agit à la fois sur le segment après réplication par son action exonucléase 5'3' de réparation et sur lesegment d'après par son activité à la fois polymérase 5'3' (synthétisation) et exonucléase 3'5' (réparation).  [...]

Adénovirus et cre-lox

Alors pour insérer qqch (je vais faire autrement pour les demi sites, ce sera plus simple ^^ ) dans un fragment d'ADN par recombinaison Cre-Lox.  [...] Pb n°1. soit ton ADN ciruclaire contient des portions d'ADN bactérien dont il faut se débarasser, soit il faut faire des minicercles plasmidiens (minicircles en anglais je crois, je sais pas l'exacte traduction en francais).  [...]

[Génétique] Sondes de Southern Blot et complémentation

Je ne suis pas experte du Southern Blot, prends mon hypothèse comme tout à fait possible mais elle n'est peut-être qu'un élément de réponse. Voyons ce que d'autres pourraient ajouter.  [...] Il était effectivement implicite dans ma réponse que je ne considère qu'un fragment d'ADNc comme sonde, de façon à hybrider une séquence qui correspond à un exon (éviter qu'elle soit à cheval entre deux exons et donc pas hybridable à l'ADNg).  [...]