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[Biologie moléculaire] Protocole électroporation cellules mammifères

[Biologie moléculaire] Protocole électroporation cellules mammifères.  [...] Je suis à la recherche d'un protocole efficace d'électroporation de cellules de mammifères (plus particulièrement des cellules de type murine C2C12).  [...]

[Journal club] Extinction de l'expression de gènes par les siRNA : la découverte

Cet article est à l'origine de l'ARN interférence dans les cellules de mammifères en culture. La caractérisation de ce processus par Craig Mello et Andrew Fire chez le nématode leur a valu le Prix Nobel de Physiologie et de Médecine en 2006. Ici, les travaux de recherche ont été conduit par Thomas Tuschl qui, après avoir effectué un séjour post-doctoral chez Philip Sharp (Prix Nobel 1993.  [...] En conclusion, les auteurs orientent les futures recherches sur les mécanismes d'ARN interférence dans les cellules de mammifères et introduisent aussi la possibilité d'utilisation de cette méthode simple dans les laboratoires et le développement thérapeutique.  [...]

Fin d'un dogme : les femmes produiraient des ovules toute leur vie

Jonathan Tilly a donc repris ce protocole pour vérifier la présence de ces OSC chez la femme et s'assurer qu'elles pouvaient effectivement mûrir et devenir des ovocytes. Son étude, parue dans Nature Medicine, l'atteste, et renverse donc un dogme qui semblait pourtant bien établi.  [...] Dans cet article, nous apportons les trois éléments clés que réclamaient les personnes plus sceptiques sur notre précédent travail, précise Jonathan Tilly. Nous avons développé et validé un protocole fiable pour purifier les OSC d'ovaires de mammifères adultes, prouvant une fois de plus que ces cellules très spécialisées existent.  [...]

Les principaux virus humains auraient un talon d'Achille

Les rhinovirus et les entérovirus comptent parmi les plus importants agents pathogènes humains. Peut-être parce qu'aucun antiviral efficace n'est disponible pour l'instant. Mais des chercheurs viennent de leur découvrir ce qui semble bien constituer un talon d'Achille.  [...] Les auteurs de cet article publié dans Chemistry and Biology ont entamé leur recherche sur le virus de la stomatite vésiculaire (VSV), cousin de l' agent causal de la rage qui se réplique très bien en laboratoire. L'idée était de trouver une molécule capable de bloquer la réplication de ce virus dans des cellules de mammifères.  [...]

Contre le diabète, une nouvelle protéine serait une bonne arme

Cette enzyme, appelée glycérol-3-phosphate-phosphatase (G3PP), dont on ignorait jusqu'alors l'existence dans les cellules des mammifères, joue un rôle clé pour éliminer les effets d'un excès de sucre, expliquent ces chercheurs dont les travaux sont dirigés par Marc Prentki et Murthy Madiraju du Centre de recherche du Centre hospitalier de l'université de Montréal (CRCHUM).  [...] Les résultats de ces travaux offrent une nouvelle cible thérapeutique potentielle contre l' obésité, le diabète et le syndrome métabolique, estiment ces chercheurs. Pour cela, ils s'efforcent de trouver de petites molécules capables d'activer l'enzyme G3PP.   [...]

[Biologie Cellulaire] Je recherche un Compteur de cellules automatique

Je suis une jeune tehcnicienne de culture cellulaire (et oui, seulement un an dans le metier, mais quelle année...) à la recherche d'un compteur de cellules (de mammiferes) automatique (et oui notre vieux coulter Z1 d'au moins 15 ans nous à laché...) et je fais un peu tout les fournisseur pour voir le quel serait le meilleur niveau rapport qualité/prix, et je me demandais si il n'y aurait pas qqun qui pourrait me conseilelr à ce niveau, en sachant que j'ai besoin de compter mes cellules pour faire des ensemencement après et que donc j'aimerais qu'il y ait un test de viabilité au bleu trypan inclus, que parfois je travaille sur de petit volume et que donc il me faut un volume de charge pas très elevé.  [...] je peux te conseiller un Compteur de cellules automatique scepter de millipore c'est une machine qui ressemble à une pipette qui vaut 2950 € et qui a des recharges (50 à 140€).  [...]

Le placenta humain est un héritage reptilien

Ces substances traversent la membrane dite hémato-placentaire, qui constitue une barrière efficace contre certains pathogènes. Par contre, les drogues, l' alcool, mais aussi les virus et certains parasites peuvent passer d'un organisme à l'autre et provoquer, dans certains cas, des malformations (retard de développement, retard mental, anomalies physiques ).  [...] Mais beaucoup de choses restent à apprendre. Le placenta des mammifères est issu d'un groupe de cellules dites trophoblastes, que l'on ne retrouve chez aucun autre genre animal, ni même chez les mammifères ovipares. L'origine de ce groupe de cellules reste un mystère, et c'est actuellement un des buts de recherches de l'équipe de Julie Baker.  [...]

[orientation] Recherche sur les mammifères!

Ce ke je cherche en effet c'est une personne qui fait de la recherche (et de la protection) sur les mammifères terrestres (ou marins).  [...] Eh bien sinon, il faudrait que tu fasses quelque chose qui pourrait vraiment profiter à ton projet professionel. élargir ton champ de recherche, et ne pas te cantonner aux mammifères.  [...]

influence des peptides signaux sur la sécrétion des protéines

2 mg/ml, ça me semble déjà pas mal en cellules de mammifères. Peut-etre que tu as une proteine naturellement difficile à replier (protéine de plus de 40 à 50 kDa, beaucoup de ponts disulfures, peu de structures secondaires,... ) et que quelque soit le peptide signal que tu rajoutes, tu arriveras à une expression assez faible de toute façon.  [...] Mais à 2 mg/ml, tu peux déjà quasiment tout faire ce que tu veux, même si c'est assez fastidieux en cellules de mammifères (2 mg/ml en cellules de mammifères, j'ai déjà donné et c'est vrai que c'est rapidement lourd). A la rigueur, ça peut valoir le coup de tenter en baculovirus, la production sera meilleure, mais il y a un risque d'aggrégation dans le cas d'une glycoprotéine.  [...]

[Biologie Moléculaire] Purification d'un plasmide à partir de cellules mammifères??

[Biologie Moléculaire] Purification d'un plasmide à partir de cellules mammifères.  [...] Merci des conseils je ne sais pas si je vais le faire tout de suite mais si j'essaie je vous tiendrai au courant. En fait mon idée serait de faire une sorte de criblage car en gros je complémente un phénotype de blocage du cycle en transfèctant certains micro-ARNs et je me dis qu'en transfectant un pool de micro-ARNs (exprimés via ce plasmide) je pourrai récupérer les clones qui poussent et alors regarder quel(s) micro-ARN(s) a favorisé la prolif.   [...]