• Santé - Quantité, Protéines, Méthode

proteinesdans le culot ou le surnageant

en effet j'en ai un organe ( foie) dans le quel je veux doser la quantite de proteines totale pouvez vous me dire si ma methode et juste.  [...] apres je prend le culot et j'ajoute 1 mL de triton 100x Hcl 0.1 M (0.4% v/w) puis je ferai une petite centrifigation a 10 000 g pendant 2 min et je dose la quantite des proteines par la methode BCA.  [...]

[Biochimie] méthode de BRADFORD

Je veux quantifier des protéines avec la méthode de BRADFORD, le problème c'est que je ne sais pas quelle est la plus faible et la plus forte quantité de protèines qu'elle peut détecter.  [...] Merci de m'avoir répondu. Mais en fait, je suis dans la zootechnie, et j'ai à determiner les concentrations en protèine d'ordre de microgramme (glandes hypopharyngiennes des abeilles) et je ne sais pas quelle concentration BSA à utiliser pour tracer ma courbe d'étallonnage autrement dit comment je dois préparer la solution mère (quantité de BSA en poudre et la quantité d'eau distillée).  [...]

[Biochimie] méthode etude macromolécules

La spectrophotométrie est une méthode permettant de suivre la purification des protéines en faisant appel aux caractéristiques des acides aminés aromatique visible a 280 nm.  [...] Comme tu le dis il s'agit d'une méthode pour suivre la purification des protéines c.a.d observer la quantité de protéines (par exemple) à un instant T. Cependant, il faut d'abord purifier les protéines par exemple en colonne d'exclusion par la taille (ou toutes autres méthodes) tu récolte au fur et à mesure dans des béchers puis direction cuve de spectro pour avoir une idée de la quantité (il y a ou pas et en quelle proportion).  [...]

[Biochimie] floculation des protéines dans EtOH

- la deuxième consiste à faire floculer les protéines, en rajoutant à notre oeuf brisé une solution très concentrée d'éthanol, ce qui a pour effet de faire précipiter les protéines. On dose ensuite par la même méthode, la quantité d'eau dans l'oeuf.  [...] Avec la première méthode, nous avons un pourcentage massique en eau bien inférieur à ce que nous attendions (de l'ordre de 40% alors qu'on attend plutôt du 60%). c'est d'ailleurs ce qui nous a amené à faire la deuxième méthode, en supposant que de l'eau pouvait être piégée dans les protéines (on avait après deshydratation des cristaux étranges qui pouvaient peut être emprisonner de l'eau, et ainsi fausser nos résultats).  [...]

[Biochimie] Méthode de Kjeldahl

Tout d'abord, la méthode de Kjeldahl est utilisé pour doser la quantité d'azote organique et ainsi pouvoir doser les protéines d'un échantillon, je le fais via cette appareillage.  [...] Mais quand je le fais expérimentalement, j'ai le double en concentration (1,4 g pour 100 g de solution) et donc j'en ai parlé avec ma prof de biochimie et elle aussi ne trouve pas le problème, on aurait pensé que le soucis est qu'il y ai un facteur 2 qui manque dans les équations (on avait pensé à la première réaction avec 2N -.   [...]

[Biochimie] Glycosylation des protéines

je souhaiterais savoir en quoi la glycosylation des protéines est un problème pour la quantification de celles-ci.  [...] En fait, j'ai vu dans un de mes cours qui porte sur les protéines du vin, que par la technique de combustion on obtenait une concentration en azote. Ainsi à partir de la concentration en azote, on pouvait déterminer la concentration en protéine par une formule.  [...]

determination de l'activité xanthine oxydase dans le foie

L'activité spécifique de ta protéine qui est une enzyme correspond aux micromoles de produits apparu par minute et par mg de protéines de départ U/mg.  [...] Pour le calculer on part de l'activité enzymatique qui sont les micromoles de produits formés par minutes et par ml de protéines et de la concentration en protéine en solution (mg/ml).  [...]

[Biochimie] Dosage des protéines

ok d accord, mais comment peux tu expliquer le fait que j obtient une augmentation en quantités de protéines aprés précipition est ce la méthode de lowry qui ne convient pas.  [...] Si vous considérez les chiffres absolus qui sortent du spectro, ce n'est pas une quantité, c'est une concentration qu'il faut rapporter au volume de protéines à chaque étapes. Normalement le nombre total devrait diminuer, si il augmente c'est que vous avez un souci dans la conduite de vos manip.  [...]

[Biochimie] Dosage des protéines totales méthode de Bradford.

Tu lit l'absorbance de ta gamme étalon et trace ta courbe tu auras un courbe de l'absorbance en fonction de la quantité de protéine présente dans tes tubes.  [...] Dans les deux cas quand tu testeras ton tube contenant ta protéine et le colorant, tu va obtenir une DO que tu repporte sur le graphe que tu a tracer manuellement ou c'est le spectro qui le fait automatiquement.  [...]

[Biologie Moléculaire] lyse cellulaire

voila je travail avec le stress osmotique chez les lactocoques et je veux faire un profil electrophoretique des proteines totales du contenu cellulaire mais je ne trouve pas la methode adequate pour provoquer la lyse cellulaire des bacteries.  [...] P.S j'ai utilisé la methode de congelation decongelation mais elle induit la production des proteines de type choc thermique donc je ne veux avoir sur mon profil que des proteines de choc osmotique et aussi j prefere ne pas utiliser les lysosymes qui faussent le resultat de quantification des proteines.  [...]